【推荐2】一对表型正常的夫妇生育了一个患甲病的儿子、两个表型正常的女儿。已知该病是基因突变引起的，为单基因遗传病，该家庭成员的基因检测结果如图所示（不考虑X、Y染色体非同源区段）。回答下列问题：
   
(1)正常基因与突变基因的结构差异是____________ 。基因检测是指_____________ ，以了解人体的基因状况。
(2)甲病的遗传方式为 ___________ ，判断理由是_______________。女儿1在第二次检测中为阴性的概率是________________ 。

【推荐3】人体中的促红细胞生成素（EPO）是由肾皮质、肾小管周围间质细胞和肝脏分泌的一种激素样物质，能够促进红细胞生成。服用促红细胞生成素可以使患肾病贫血的病人增加血流比溶度（即增加血液中红细胞百分比）。EPO兴奋剂正是根据促红细胞生成素的原理人工合成，它能促进肌肉中氧气生成，从而使肌肉更有劲、工作时间更长。当机体缺氧时，低氧诱导因子（HIF）与促红细胞生成素（EPO）基因的低氧应答元件（非编码蛋白质序列）结合，使EPO基因表达加快，促进EPO的合成，过程如下图1所示。研究发现癌细胞因迅速增殖往往会造成肿瘤局部供氧不足；下列说法错误的是_________


（1）图1过程①，需要RNA聚合酶结合在HIF基因的启动子上驱动转录
（2）HIF从转录水平调控EPO基因的表达，进而影响红细胞生成
（3）骨髓造血功能不全患者，EPO表达水平较正常人低
（4）肿瘤细胞HIF基因的表达可能比较活跃，产生比较多的HIF
（5）遗传信息蕴藏在4种碱基的排列顺序中
（6）转录过程中，形成了蛋白质-核酸复合物
（7）翻译过程中，没有氢键的形成和断裂过程
（8）转录和翻译过程中，碱基互补配对的方式不完全相同
（9）几乎所有的生物都共用一套密码子
（10）mRNA沿着核糖体从起始密码子向终止密码子移动，完成肽链的翻译
（11）一个mRNA分子可以相继结合多个核糖体，迅速合成大量的多肽链
（12）tRNA上存在与密码子互补配对的反密码子
（13）细胞中DNA分子的碱基总数与所有基因的碱基数之和相等
（14）细胞中以DNA的一条单链为模板转录出的RNA均可编码多肽
（15）遗传信息可以从DNA流向RNA，也可以从RNA流向DNA
（16）染色体DNA分子中的一条单链可以转录出不同的RNA分子
（17）图2中X表示DNA聚合酶，能识别DNA特定序列，移动方向是由左向右
（18）核糖体含有rRNA，能识别mRNA特定序列，移动方向是由左向右
（19）图2过程Ⅱ中有多个核糖体和mRNA结合，每个核糖体上形成的肽链是不同的
（20）图2过程I还未完成，过程Ⅱ即已开始，该现象可能发生在真核细胞中
（21）基因中碱基对的改变不一定会导致遗传信息的改变
（22）翻译过程中需要3种RNA参与
（23）tRNA 比mRNA大得多，其羟基端是结合氨基酸的部位
（24）同一细胞中两种RNA的合成不可能同时发生

【推荐1】异丁醇具有燃值高、能量密度高等优点，其开发和利用对优化我国能源结构和保护环境有非常重要的战略意义。基于酿酒酵母的发酵途径（图甲）和图乙的质粒，研究者构建了一种表达载体pUC18,用于过表达ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以实现异丁醇的大规模生产。已知氨苄青霉素能抑制细菌细胞壁的形成。据此回答下列问题：
   
(1)图乙质粒上有多个限制酶切位点，作用是____。研究人员先用pUC18转化经___处理的大肠杆菌，以便筛选、鉴定扩增重组质粒。重组质粒上有____ ,所以能在大肠杆菌中扩增。
(2)将环状载体pUC18导入酿酒酵母时，一般会将其进行酶切得到线性化载体，随后再将其导入受体细胞。根据所学的知识推测酶切得到线性化载体的目的是_____。
(3)提取成功构建的表达载体并导入酿酒酵母菌株，将菌株接种在培养基中以获得单菌落，培养基中___(需要/不需要)添加组氨酸，原因是_____。培养基中需要添加凝固剂_____。
(4)异丁醇的大量积累会伤害细胞，研究人员给该工程菌导入一个经改造的光敏蛋白基因，使工程菌对特定的蓝光敏感。进行不同的光照处理，使其在异丁醇产生阶段和生长繁殖阶段进行切换，结果如下图丙所示。
   
注：5/10/20hpulse分别代表在黑暗条件下每隔5、10、20h发出15s和65s的蓝光脉冲30min
①对照组的酵母菌需要导入____。
②以葡萄糖为碳源，利用该转基因酿酒酵母进行发酵时，若想进一步提高其异丁醇产量，综合图甲和图丙信息，进一步优化菌株的措施是敲除该工程菌的____基因，可采取的工艺措施是_____。

【推荐2】科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因牛，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

（1） 由过程①获得的A为________________________。过程②③④分别采用的是胚胎工程中的___________技术、______________技术、_______________技术。
（2）图中去掉卵母细胞的核，目的是________________________。受体应选用____________期卵母细胞。
（3） 体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O₂和CO₂，其中CO₂的作用是____________。
（4）进行胚胎移植时，代孕母牛对移入子宫的重组胚胎基本上不发生__________________，这为重组胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。为了提高已有胚胎的利用率，可采用____________________技术。
（5）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因牛，这是因为__________________________________。

【推荐1】研究人员利用一种从某生物体内分离出的抗盐碱基因，通过基因工程、植物细胞工程等现代生物技术，培育出了抗盐碱大豆，使大豆能在盐碱地中正常生长，提高了大豆的产量。下图为培育流程，其中①~⑥为不同过程，其中Amp^R为氨苄青霉素抗性基因，AluⅠ、SmaⅠ、HindⅢ和PstⅠ为限制酶。根据所学知识，回答下列问题：

(1)不用限制酶AluⅠ切割抗盐碱基因的原因是_____。用限制酶切割抗盐碱基因和质粒时，选择SmaⅠ和PstⅠ比只选择PstⅠ的优点是_____（答出两点）。
(2)研究人员用AluⅠ切割原质粒得到7.7kb的DNA片段，切割重组质粒得到3.0kb、4.8kb的DNA片段；SmaⅠ和PstⅠ切割原质粒得到2.3kb、5.4kb的DNA片段（注意：DNA片段大小与图中所画比例一致），则抗盐碱基因的长度为_____。
(3)利用PCR技术可获取大量目的基因，PCR反应体系中有两种引物，在复性时引物会结合到互补DNA链上，对两种引物的设计要求之一是_____；除引物外，PCR反应体系中还需要加入_____（答出两点）。
(4)将目的基因导入植物细胞时，常采用农杆菌转化法，将目的基因插入Ti质粒中。利用Ti质粒，通过农杆菌转化法可将抗盐碱基因导入大豆愈伤组织细胞的理论依据是_____。
(5)为了筛选出成功导入重组质粒的农杆菌，1号培养基中需要加入的物质是_____。诱导组织细胞脱分化的是_____号培养基。图中④⑤⑥过程，所利用的生物技术的理论基础是_____。

【推荐2】将PVY病毒外壳蛋白基因（PVY-CP）导入马铃薯，并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，PVY-CP可以从质粒pBBZY中获取；质粒pMON316是选用的运载体，其中NPTⅡ基因是卡那霉素抗性基因，另已知部分限制酶识别序列和切割位点：

BamHⅠ	HindⅢ	BglⅡ	ClaⅠ	SmaⅠ	KpnⅠ
G↓GATCC CCTAG↑G	A↓AGCTT TTCGA↑A	A↓GATCT TCTAG↑A	AT↓CGAT TAGC↑TA	CCC↓GGG GGG↑CCC	GGTAC↓C C↑CATGG

请结合图像，运用所学知识回答问题：
（1）含有PVY-CP的质粒pBBZY保存在某细菌群体中，各个细菌含有相关不同的基因，这样的细菌群体称为_____________.
（2）以下对于步骤②中Klenow Polymerase这种物质功能方面的猜测，合理的是______。
A.具有催化作用                 
B.可以将DNA片段的黏性末端变成平末端
C.可以被胰蛋白酶水解       
D.与DNA连接酶的功能相似
（3）步骤④中应该使用的限制酶是_______________（注意基因接入的方向）。
（4）以上过程中构建的基因表达载体除了图中所显示的组成部分以外，还应该包括______________________和复制原点等组成部分。
（5）利用农杆菌对植物体细胞进行转化，操作过程如下：首先需要将重组质粒pEY3导入____________________细胞中，要实现重组质粒成功导入，应使其处于____________。而后将转化的细胞转移到含有______________的培养基上进行筛选，再用于侵染植物细胞，最后将转化成功的植物细胞过_____________________技术培养成转基因抗病毒马铃薯植株。

【推荐3】糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”。治疗该病的胰岛素过去主要从动物（如猪、牛）中获得，自20世纪70年代遗传工程（又称基因工程）发展起来以后，人们开始采用这种高新技术生产胰岛素，其操作的基本过程如下图所示：

（1）图中基因工程的基本过程可概括为“四步曲”，即_________________、_________________、__________________、________________。
（2）图中的质粒存在于细菌细胞内，在基因工程中通常被用作__________，从其分子结构可确定它是一种_______________。（与真核细胞染色体DNA相比，答质粒的特点）
（3）根据碱基互补配对的规律，在____________酶的作用下，把图中甲与乙拼接起来（即重组）。
（4）细菌作为受体细胞进行转化时，常用CaCl₂处理，使其处于____________以利于吸收外部DNA分子。目的基因通过活动（即表达）后，能使细菌产生治疗糖尿病的激素，这是因为基因具有控制________合成的功能，它的合成过程包括______________________。

【推荐1】糖尿病是影响人类健康的重大疾病，利用基因工程结合细胞工程、胚胎工程生产人胰岛素为糖尿病患者带来了福音，请回答下列问题：
(1)将人胰岛素基因与载体结合成重组人胰岛素基因表达载体，此过程需要的酶是____________。
(2)大肠杆菌是生产胰岛素常用的工程菌，其优点是__________（至少答出两点）；但利用大肠杆菌得到的胰岛素需要进一步加工和修饰才能获得生物活性，原因是______________。
(3)转入胰岛素基因牛可通过分泌乳汁来生产人胰岛素。在转入牛受精卵的基因表达载体中，人胰岛素基因的前端必须含有________________。将培养到________时期的胚胎进行移植，移植前需要对受体进行____________处理，使胚胎能正常着床。若要对胚胎的性别进行鉴定，可在囊胚期取_______细胞进行性别鉴定。
(4)若在分子水平上判断获得的转基因牛中人胰岛素基因是否表达，可通过检测___________（填物质）进行确定。

【推荐2】甘蓝型油菜中，抑制PEP基因的表达可提高油菜籽的含油量。通过基因工程将PEP基因反向连接在启动子后，构建转反义PEP基因油菜是提高油菜籽含油量的常用技术路径。如图为PEP基因及Ti质粒的结构示意图。

   

(1)利用PCR 技术扩增PEP基因需要一对特异性引物，所用引物的作用是________。
(2)为将PEP基因反向连接在启动子后，需要在PEP基因的上游引物和下游引物的________（填“3′端”或“5′端”）分别引入________酶的识别序列。
(3)为检测反义PEP基因是否进入细胞，研究者通常检测细胞中是否存在ntp基因，而不检测PEP基因，其原因是________。
(4)构建转反义PEP基因油菜过程中，需要将PEP基因反向连接在启动子后，原因是________。

【推荐3】马铃薯是全球第四大重要的粮食作物，仅次于小麦、水稻和玉米。近年来对马铃薯育种的研究越来越多。请回答下列问题。
（1）马铃薯在无性繁殖过程中感染的病毒易传播给后代，从而影响后代产量和品质。为了解决这一问题，可选取植物茎尖通过___________技术来脱除病毒，选择茎尖的原因是_____________________________。
（2）科学家常采用_______法将控制HPV-16病毒(人宫颈癌病毒)外壳蛋白合成的基因导入马铃薯细胞，培育出可生产的且抗该病毒的转基因马铃薯，人食用后可获得抗性。若要使目的基因在受体细胞中表达，需要构建________，而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是目的基因缺乏___________________。 科学家发现某些细菌的质粒上存在抗生素基因，该基因在基因工程中可作为_________________。
（3）实验发现，该转基因马铃薯经烹煮后抗病毒效果较差，分析其原因可能是________。若要确定某食品是不是转基因生物或是通过转基因技术加工而成的，可以从检测其是否含有外源基因或DNA、____________________等方面进行检测。