科研人员制备某种单克隆抗体的流程如图所示,图中序号表示相应的步骤,SP2/0细胞为小鼠的骨髓瘤细胞。回答下列问题:(1)步骤①中的小鼠必须用特定的抗原进行免疫的目的是____ 。
(2)在对SP2/0细胞进行培养的过程中,需要创设的气体条件是____ 。与培养大多数动物体细胞不同,SP2/0细胞在培养过程中不会出现____ 的现象,只要营养等条件适宜即可一直增殖。
(3)步骤②常采用灭活的病毒诱导细胞融合,是因为灭活病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的____ 发生作用,使细胞互相凝聚,进而实现细胞融合。实验中进行步骤③筛选的原因是____ ,从功能上看,这种培养基属于____ 。
(4)步骤⑤的小鼠注射的是____ ,步骤⑥是从小鼠腹水中获得单克隆抗体,列举单克隆抗体的2个用途:____ 。
(2)在对SP2/0细胞进行培养的过程中,需要创设的气体条件是
(3)步骤②常采用灭活的病毒诱导细胞融合,是因为灭活病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的
(4)步骤⑤的小鼠注射的是
更新时间:2024-05-09 08:30:52
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解题方法
【推荐1】HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体,HER2过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物(抗HER2-ADC),科研人员开展了相关研究,实验流程如图1所示。回答下列问题:(1)在制备抗HER2-ADC的过程中,需要对小鼠多次注射______ 进行免疫,以期获得相应的B淋巴细胞。过程①得到的细胞有______ 种(考虑两两融合)。过程②和③的目的分别是获______ 、______ 。
③过程获得的细胞可以在体外培养或者注射______ 继续培养。
(2)抗HER2-ADC作为靶向药杀伤HER2过度表达的恶性肿瘤细胞的效果较为明显,其原因是______ 。
(3)为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响,科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠(先天性胸腺缺陷的突变小鼠)、多种化疗药物和试剂(磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗——美坦新联药物、磷酸缓冲液等)进行了相关实验。
①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内,待肿瘤体积达到200mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理,空白对照组的给药处理是注射______ ,一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积,结果如图2所示。②实验结果表明,抗HER2-ADC对BT-474细胞的______ 具有促进作用,且效果较其他药物更好。
③后续可通过研究抗HER2-ADC______ 、______ (答出2点)等情况,为抗HER2-ADC进入临床实验奠定数据基础。
③过程获得的细胞可以在体外培养或者注射
(2)抗HER2-ADC作为靶向药杀伤HER2过度表达的恶性肿瘤细胞的效果较为明显,其原因是
(3)为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响,科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠(先天性胸腺缺陷的突变小鼠)、多种化疗药物和试剂(磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗——美坦新联药物、磷酸缓冲液等)进行了相关实验。
①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内,待肿瘤体积达到200mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理,空白对照组的给药处理是注射
③后续可通过研究抗HER2-ADC
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【推荐2】H18杂交瘤细胞产生的抗人肝癌单克隆抗体(HAb18)对于人体肝癌的靶向治疗具有重要的意义,但H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着细胞的高密度培养以及生产能力的提高。通过基因工程可改造H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力,相关研究步骤如下。请回答:
(1)请完善表格中的实验步骤。
(2)向培养肝癌细胞的培养液中加入____ ,能为动物细胞生长增殖和保持动物细胞生物学性状提供不可缺少的物质,培养液中还需加入一定量抗生素的目的是____ ,培养时提供的二氧化碳气体的目的是____ 。
(3)在细胞融合及筛选步骤中,常用的生物诱导因素是____ 。在改造H18杂交瘤细胞时,通过脂质体法将基因表达载体导入H18杂交瘤细胞的原理是利用了____ 。
(4)与普通抗肝癌的化疗药物相比,用抗人肝癌单克隆抗体(HAb18)与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是能____ ,减少对正常细胞的伤害,减少用药剂量。也可以使用____ 标记抗人肝癌单克隆抗体(HAb18),显示肝癌肿瘤的位置,诊断肝癌肿瘤病灶是否转移,以指导手术范围。
(1)请完善表格中的实验步骤。
实验步骤 | 具体操作 |
肝癌细胞的培养 | 将人肝癌细胞在培养液中培养一段时间后,用① |
② | 向小鼠体内注射肝癌细胞悬液0.8mL,以后每隔2周免疫1次,共3次,最后一次免疫后3天,取脾脏制成细胞悬液备用。 |
细胞融合及筛选 | 将脾脏细胞悬液和③ |
改造H18杂交瘤细胞 | 利用PCR技术获得小鼠的④ |
使用⑤ |
(3)在细胞融合及筛选步骤中,常用的生物诱导因素是
(4)与普通抗肝癌的化疗药物相比,用抗人肝癌单克隆抗体(HAb18)与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是能
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【推荐3】Graves病(GD)是一种自身免疫性甲状腺疾病,主要表现为甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子1(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM-1作为抗原多次免疫若干只小鼠,目的是_______ 。几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入到多孔培养板的不同孔中,然后向多孔培养板中加入_______ 进行检测。依据反应结果,选出阳性反应最强的培养孔所对应的小鼠N。
(2)培养骨髓瘤细胞时需要定期更换培养液,目的是防止_______ 。融合前将部分骨髓瘤细胞置于筛选杂交瘤细胞的培养基中培养,一段时间后,若培养基中_______ ,说明该培养基符合实验要求。
(3)取小鼠N的脾脏细胞制备成细胞悬液,与骨髓瘤细胞进行融合,然后用选择培养基筛选得到具有分裂能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上进行培养,然后进一步检测,从中选择_______ ,将其植入小鼠腹腔中克隆培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
(1)用ICAM-1作为抗原多次免疫若干只小鼠,目的是
(2)培养骨髓瘤细胞时需要定期更换培养液,目的是防止
(3)取小鼠N的脾脏细胞制备成细胞悬液,与骨髓瘤细胞进行融合,然后用选择培养基筛选得到具有分裂能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上进行培养,然后进一步检测,从中选择
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【推荐1】请回答与动物细胞培养及胚胎工程有关的问题:
(1)欲获得牛的单个体细胞,需用________ 处理动物组织;在体外培养时,通常需在培养液中添加_________ 等天然成分。
(2)获取的卵子需培养到________ 时期才能用于核移植,通过核移植获得的动物称作_________ 。
(3)在胚胎分割技术中,需将牛囊胚的________ 均分,可利用囊胚的____ 细胞进行性别鉴定。
(4)ES细胞在_________ 上或含有抑制因子的培养基上培养时,不会发生分化;可用ES细胞分化出人造器官用于器官移植,优点是________ 。
(1)欲获得牛的单个体细胞,需用
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【推荐2】电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物,此类靶向药物可称为“生物导弹”。利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段,如图为单克隆抗体制备流程图:
(1)若该图中的单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌,则图中特定抗原通常是___________ 。
(2)用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞进行_______________________ ,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(3)在动物细胞原代培养过程中,当细胞分裂生长到细胞表面相互接触时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为_____________ 。
(4)近年来,科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响,某科研小组进行了相关实验,结果如表所示:
丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响
该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中培养,CO2的主要作用是_____________ ,该实验的自变量为_____________ 。
(1)若该图中的单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌,则图中特定抗原通常是
(2)用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞进行
(3)在动物细胞原代培养过程中,当细胞分裂生长到细胞表面相互接触时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为
(4)近年来,科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响,某科研小组进行了相关实验,结果如表所示:
丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响
丁酸钠的浓度(mmol/L) | 时间(h) | ||
48 | 96 | 144 | |
0 | 1:320 | 1:640 | 1:1200 |
0.25 | 1:320 | 1:1280 | 1:2500 |
0.5 | 1:160 | 1:2500 | 1:2500 |
0.75 | 1:320 | 1:320 | 1:640 |
该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中培养,CO2的主要作用是
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【推荐3】甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸,科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体,其基本操作过程如下图。请回答下列相关问题:
(1)据图分析可知,制备抗甘草酸的单克隆抗体应用的动物细胞工程技术包括_________ 和_______ 。给小鼠注射甘草酸—牛血清白蛋白结合抗原后,从小鼠的_________ (填器官名称)中提取细胞甲,细胞甲是_________ 细胞。骨髓瘤细胞进行体外培养时,_________ (填“会”或“不会”)出现接触抑制现象。
(2)诱导细胞甲与骨髓瘤细胞融合可采用灭活病毒诱导法,其原理是病毒表面含有的_________ 和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。过程②诱导细胞融合得到的细胞乙是否一定为杂交瘤细胞,并说明理由:_____________ 。
(3)对获得的杂交瘤细胞丙进行克隆化培养和抗体检测,经过多次筛选,就可获得所需的细胞丁。与血清抗体相比,抗甘草酸的单克隆抗体的特点是________________ (答出两点)。
(1)据图分析可知,制备抗甘草酸的单克隆抗体应用的动物细胞工程技术包括
(2)诱导细胞甲与骨髓瘤细胞融合可采用灭活病毒诱导法,其原理是病毒表面含有的
(3)对获得的杂交瘤细胞丙进行克隆化培养和抗体检测,经过多次筛选,就可获得所需的细胞丁。与血清抗体相比,抗甘草酸的单克隆抗体的特点是
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