下图示利用重叠延伸PCR技术改造目的基因的原理。相关叙述错误的是( )
A.图示操作中至少需要用2种限制酶对目的基因进行处理 |
B.操作中引物2和引物3序列应含有拟突变位点,且可以互补 |
C.应选用引物1和引物4进行PCR3,以获得大量目的基因序列 |
D.此过程实现的基因序列改变属于基因突变,未发生基因重组 |
更新时间:2024-05-11 11:19:30
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【知识点】 PCR扩增的原理与过程解读
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【推荐1】甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白(血凝素蛋白)密切相关,现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程,图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/5/11/3235379953598464/3240466079563776/STEM/708283db40514c8f995697702729c108.png?resizew=491)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/5/11/3235379953598464/3240466079563776/STEM/708283db40514c8f995697702729c108.png?resizew=491)
A.电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定 |
B.图甲过程中至少需要应用到逆转录酶、限制酶、DNA连接酶 |
C.通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时,在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因 |
D.构建好的重组质粒长度共2000bp,据图乙可推测BamHⅠ在重组质粒上有3个酶切位点 |
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【推荐2】通过引物设计运用PCR技术可以实现目的基因的定点突变如图为基因工程中获取突变基因的过程,其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对,但不影响引物与模板链的整体配对,反应体系中引物1和引物2的5'端分别设计增加限制性内切酶a和限制性内切酶b的识别位点。有关叙述不正确的是( )
A.两种引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因的定向插入 |
B.一个DNA分子在第2轮PCR后,得到的四个DNA分子各不相同 |
C.第2轮PCR,引物1与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因 |
D.在第3轮PCR结束后,含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4 |
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【推荐3】巨噬细胞表面的CD23识别白色念珠菌(一种真菌)后,其细胞内的一氧化氮合酶被激活,产生一氧化氮,杀灭真菌。研究人员用白色念珠菌感染野生型小鼠和JNK(一种蛋白激酶)基因敲除小鼠,采集了感染前后两种小鼠血细胞中的mRNA,利用RT-PCR技术扩增CD23基因,过程和结果如下图所示。下列说法正确的是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/5/8/da447ac3-f32a-4e3c-bea9-6babd84bb73e.png?resizew=314)
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A.巨噬细胞、树突状细胞、T细胞都是具有摄取处理呈递抗原能力的免疫细胞 |
B.过程Ⅱ对1个单链cDNA进行20次循环,理论上需要消耗220个引物B |
C.野生型和JNK基因敲除组的CD23的数量和一氧化氮合酶的活性一定不同 |
D.JNK蛋白激酶抑制剂或一氧化氮合酶激活剂可治疗白色念珠菌的感染 |
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