组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 细胞工程 > 动物细胞的培养和核移植技术 > 动物细胞培养技术
题型:非选择题-解答题 难度:0.4 引用次数:155 题号:22865127
中国科学家在国际上首次成功构建了高比例胚胎干细胞贡献的活嵌合体猴(将食蟹猴的胚胎干细胞注入原始胚胎后发育而成),这对于理解灵长类胚胎干细胞全能性具有重要意义,为遗传修饰模型猴的构建奠定了技术基础。其技术路线如下图所示:

注:4CL胚胎干细胞是指在4CL体系下培养的食蟹猴胚胎干细胞,具有较高的多能性。
(1)4CL胚胎干细胞不仅具有自我更新能力,且具有高度的______潜能。科学家将绿色荧光基因(GFP)导入4CL胚胎干细胞,用于检测4CL胚胎干细胞在胚胎和个体中的分布。请再举出一个荧光标记技术在生物学中的应用实例_____。嵌合体猴体内绿色荧光散乱分布的原因是________
(2)通过滚瓶培养可获取足够数量的单个细胞。培养时,需将盛有细胞、培养液的滚瓶放置于滚动架上,使其缓慢旋转。滚瓶培养的优点为_______,动物细胞培养的条件为_______(答2点)。
(3)可用囊胚的______部分的细胞做DNA分析,进行性别鉴定。
(4)科学家还利用胚胎干细胞的细胞核进行了核移植实验得到克隆猴,并分别对克隆猴、卵细胞供体猴、代孕母体猴和干细胞供体猴的线粒体DNA中某一特异性序列进行了检测、比对,结果如下图。分析可知,克隆猴的线粒体DNA特异性序列与______一致,并且不同于______。原因是_____

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【推荐1】科学家利用细胞融合技术研究细胞膜的结构特性,进行了下列实验。
(1)将鼠细胞和人细胞在________培养箱中培养一段时间,用________处理,获取实验用的单细胞悬液。
(2)将两种细胞在37℃下混合培养,在培养液中加入______________诱导融合,形成融合细胞,一般两两融合的细胞有_____________种。
(3)细胞膜的主要成分是磷脂和蛋白质。将连接了荧光染料的抗体与融合细胞在一定条件下培养,抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合,其目的是标记膜蛋白,以便于显微镜观察。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和_________,开始时,鼠的细胞为绿色,人的细胞为红色,两种颜色不混合;一段时间后,可观察到红绿荧光交替分布的“嵌合体”。统计____________,结果如下图所示。

(4)科学家据此提出两种假说解释嵌合体的形成。
假说一:融合细胞合成了新的膜蛋白;
假说二:原有膜蛋白在细胞膜平面上运动。
①使用_______________抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞,均对嵌合体形成没有显著影响,这个结果否定了假说一。
②在15℃、20℃和26℃的培养温度下重复上述实验,这些实验的结果为_________,为假说二提供了证据支持。
2018-03-27更新 | 1221次组卷
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【推荐2】“生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼,由单克隆抗体与药物配合而成。单克隆抗体能自动导向,在生物体内与特定目标细胞或组织结合,并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如下图所示,分析回答下列问题:

(1)制备特异性的单克隆抗体,首先要对小鼠注射特定_______________
(2)从单克隆抗体制备过程可以看出,它运用了__________(至少两种)等细胞工程技术。
(3)若只考虑细胞的两两融合,理论上融合的细胞有______种类型,符合要求细胞的特点是___________
(4)体外培养杂交瘤细胞的培养基与用于植物组织培养的培养基在物理性质上的主要区别是前者要用_________,从培养基的成分来看,前者培养基中除了添加必要的营养物质外还需要加入含天然成分的_____________
(5)特异性抗体也可以通过常规方法来制备:向动物反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物的血清中分离所需抗体。与这种常规方法相比,单克隆抗体具有____________等优点(答出三点即可)。
2018-04-04更新 | 324次组卷
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名校
【推荐3】急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者的胰腺组织,由于自身消化、水肿、出血甚至会坏死,所以具有很高的致病率与致死率。以往研究成果发现细胞自噬是引起急性胰腺炎的主要原因。在前期实验中发现AP的细胞中MasⅠ基因表达量异常,故推测该基因表达量的变化可能对AP细胞自噬有影响。为证明这一推测,科研人员做了如下实验。请据此回答:
(1)取小鼠胰腺的组织,剪碎、并用_____处理,使细胞分散以便进行_____代培养。与植物组织培养相比,培养动物细胞的培养基中不需要添加_________等物质,这样可以模拟动物细胞在体内的环境。
(2)已知雨蛙素(CAE)可以诱导细胞自噬。一些小分子RNA(siRNA)可以特异性的降解同源mRNA,从而抑制特定基因的表达。通过DNA重组技术导入特定的基因可以使细胞中该的基因表达量提高。下表显示了部分实验处理方法,“+”表示施加处理,“-”表示不施加处理,请在①②③后面的横线处填“+”或“-”,以完善实验方案:

处理方法

A 组

B组

C组

D组

加入雨蛙素

-

+

+

导入 MasⅠ-siRNA

-

-

+

导入 MasⅠ基因

-

-

+

处理①_____;处理②________;处理③_____
(3)细胞中的LC3蛋白表达量同细胞自噬程度呈正相关,可以使用_____法检测细胞中LC3的表达量,用以反映细胞自噬的情况。实验结果如图所示:

注:图中红色荧光的分布范围和亮度与LC3蛋白的表达量呈正相关
分析实验结果可知,与MasⅠ基因低表达组相比,高表达组细胞自噬现象_____。由此提示,若能_________________________________________,则有利于保护AP细胞。
2020-07-09更新 | 166次组卷
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