【推荐1】科学家将拟南芥的抗寒基因（CBF1），转入香蕉以获得抗寒的香蕉品种。下图是某质粒载体上的SacⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ四种限制酶的切割位点示意图。据图回答问题。

（1）在该实验中为构建基因表达载体，用SacⅠ、XbaⅠ切下CBFl基因后， 要用同一种限制酶对质粒进行切割，理由是___________________________________
（2）连接CBFl基因到该质粒载体后，作为基因表达载体的组成还必须有_____________。将重组质粒导入香蕉细胞最常用的方法是___________。
（3）为了鉴别受体细胞中是否含有CBFl基因，可用含________的培养基进行筛选。
（4）科学家将生长健壮、苗龄一致的转基因香蕉（实验组）与非转基因香蕉（对照组）进行_____________处理，鉴定两组之间的抗寒性差异。如果_________，则说明获得了抗寒的香蕉优质品种。

【推荐2】近年来，生物工程运用分子生物学的最新成就，发展出一系列的技术，可以为人类健康、生产、生活等服务。运用所学知识回答下列问题。
（1）科学家为了建立生产“干扰素”的乳房生物反应器，利用基因工程技术，构建含有启动子、 _______________ 、目的基因、复制原点和 _______________ 等元件的基因表达载体，其中启动子的作用是 _______________________________ ，最后通过显微注射法，导入羊的 _______________ 中，最终发育成能生产干扰素的转基因羊。
（2）在单克隆抗体制备过程中，诱导 _______________ 细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞，此过程需要两次筛选，第二次筛选出 ________________________ ，单克隆抗体的优点有 _____________________________ 。
（3）在胚胎工程中，通过对供体母羊注射 _______________ 激素，促进其 _______________ ，从而获得大量羊的卵母细胞；获取的卵母细胞需要培养至 _______________ ，才能与 _______________ 的精子结合。

【推荐3】如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的流程示意图，请回到下列问题：

(1)合成人胰岛素的RNA应从人类的______________细胞中获取；较之于从基因组文库中获取的目的基因，图示方法获取的目的基因所含碱基数量__________(填“更多”“更少”或“一样多”)。
(2)将质粒A和目的基因结合为重组质粒的过程中，需要使用的酶有______________________，这两个不同的DNA分子能进行重组的原因是_______________
(3)将重组质粒导入细菌B之前，常需要使用__________处理细菌B，使导入更易成功。
(4)在筛选目的细菌的过程中，我们应该选择__________(填序号)。
A．在含氨苄青霉素和四环素的培养基中都能存活的细菌
B．在含氨苄青霉素的培养基中能存活，含四环素的培养基中不能存活的细菌
C．在四环素的培养基中能存活，含氨苄青霉素的培养基中不能存活的细菌
D．在含氨苄青霉素和四环素的培养基中都不能存活的细菌
(5)选择细菌作为受体细胞的原因可能是______________，在细菌培养液中分离得到的目的基因的表达产物_____________(填“能”或“不能”)直接使用。

【推荐1】如图为某生物工程操作流程模式图，请据图回答下列问题：

(1)若该图表示基因工程，则①过程所需的酶是_________，得到的C必须含有的结构有_________。
(2)若该图表示植物体细胞杂交，则C的名称是杂种细胞，A和B原生质体融合需要加入_________(试剂)诱导，②过程属于_________技术。
(3)若此图表示单克隆抗体的制备，①过程不同于植物细胞融合的方法是用_________诱导。
(4)若此图表示克隆羊的培育，①过程涉及的生物技术有_________(写出两种)。

【推荐2】传统影像学诊断在发现转移瘤形成时往往已延误最佳治疗时机。目前可通过液体活检来检查血液中的循环肿瘤细胞（CTCs），用以诊断是否存在癌症转移，步骤如下：
注：上皮组织细胞来源的CTCs与正常白细胞表面蛋白质的一些差异（如下表）
细胞表面抗原标志物表达差异

蛋白种类 细胞类型	CD45	EpCAM
白细胞	有	无
CTCs	无	有

   
(1)制备单克隆抗体：首先用CD45蛋白对小鼠进行免疫，然后经过图1的①、②、③、④等步骤，获得大量单克隆抗体A；再用EpCAM免疫小鼠，经过相同步骤获得单克隆抗体B。
步骤①涉及到的细胞工程技术主要有________和________。
步骤②通常使用选择培养基，主要目的是筛选出________________。
步骤③主要需要经过________和抗体检测，并经多次筛选，最终获得________________________。
步骤④是大规模培养，主要方法有：________________和________________。体外培养到一定时期的单克隆杂交瘤细胞会因为________________（至少答出两点）而分裂受阻，需进行传代培养。
(2)利用免疫磁珠进行分离：取待测人员少量血液于采集管内，将连接有单克隆抗体________（填“A”或“B”）的磁珠加入采集管，外加磁场使磁珠定向移动到指定区域并取出，这样可以排除非肿瘤细胞的干扰；再将连接有单克隆抗体________（填“A”或“B”）的磁珠加入采集管，外加磁场使磁珠定向移动到指定区域取出，收集CTCs。
(3)计数并诊断：若出现________（细胞）数量超出正常范围，即可诊断发生癌细胞转移。

【推荐3】下面分别是试管婴儿和克隆羊培育过程的介绍材料，请阅读并回答后面的问题：
a. 试管婴儿
试管婴儿是指通过体外受精与胚胎移植的方式使妇女受孕而生出婴儿。人类第一例试管婴儿于1978年7月23日诞生在英国，婴儿的名字叫路易斯布朗。她的母亲由于输卵管堵塞而不能生育。妇产科医生与剑桥大学的生物学教授合作，成功地从婴儿母亲卵巢滤泡中取出卵细胞，并采取了婴儿父亲的精液，使卵细胞和精子成功在试管中完成受精。把受精卵放在盛有特制营养液的试管中，保持和体温一样的温度，使受精卵发育到胚胎时期，再移植到母亲的子宫内，完成发育过程直至诞生一个健康的婴儿。因此这项技术是治疗某些不孕症的好办法。中国第一例试管婴儿于1985年4月在台湾诞生；我国大陆的第一例试管婴儿于1988年3月在北京医科大学附属第三医院诞生。据不完全统计，从1978到1988年十年间，全世界已出生了七千多个试管婴儿。可以说试管婴儿技术已相当成熟了。
b. 克隆羊的培育过程（见图）

（1）多利和路易斯布朗分别是通过什么生殖方式获得的？__________。两种生殖方式的本质区别是什么？_______________。
（2）在繁殖多利和路易斯布朗的过程中是否遵循孟德尔的遗传规律？_______。为什么？____________。                         
（3）继植物组织培养之后，克隆绵羊的培养成功证明了_________________   。
（4）用克隆技术其实并不会克隆出一个“希特勒”，这是因为：
第一，克隆羊的遗传物质还有一部分来自母羊A，即还受______________________遗传的影响；
第二，生物的性状是遗传物质与______________之间相互作用的结果。
被去掉遗传信息的卵细胞能继续单独存活吗？_________。为什么？________________。

【推荐1】野化单峰骆驼原产于北非和亚洲西部及南部，多年前野生单峰骆驼就已经灭绝，仅圈养条件下还有部分驯养单峰骆驼存在。近几年，在我国戈壁无人区，科学家又发现了野化单峰骆驼小种群，由于数量极少，科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，技术流程如图所示。回答问题：
   
(1)为了让野化单峰骆驼母本提供更多优质的卵母细胞，需给野化单峰骆驼母本注射_____激素；若a为体外受精，则在这之前还要对采集的卵母细胞和精子要分别_____处理；对受体驯化单峰骆驼或者其他常见骆驼也要注射相关激素以达到_____的生理状态。
(2)若通过染色体测定对野化单峰骆驼进行性别鉴定，选择滋养层细胞而不选择内细胞团细胞的原因是_____，测定的结果是看滋养层细胞中_____。
(3)图中c是_____，应选择_____胚。过程b或d是_____，这个过程之前_____（填“需要”或“不需要”）是否需要对受体进行免疫检测，并请说明原因。_____。
(4)胚胎移植后，经受体孕育的后代，其遗传特性与_____（填“供体”或“受体”）一致？并请说明原因。_____。

【推荐2】细胞工程的发展是一代又一代科学家经过长时间探索的结果，其中我国科学家发挥了重要作用。下图表示细胞工程操作中的某些过程，请回答下列问题。

(1)如果A、B分别是白菜和甘蓝的原生质体。它们是用_____________处理白菜和甘蓝的体细胞而获得。用_____________试剂诱导A与B融合成细胞C，细胞C再生出细胞壁后需要通过_____________技术才能得到杂种植株“白菜——甘蓝”。
(2)如果该图表示抗新冠病毒的单克隆抗体制备过程中的一个环节，A细胞是小鼠的骨髓瘤细胞，获得B细胞的过程是_____________，通过该技术获得的单克隆抗体具有_____________的特点。
(3)如果该图表示“试管动物”技术的体外受精过程，A表示精子，B表示卵子，受精之前需要把B细胞培养至_____________。将C发育至囊胚阶段，对其进行胚胎分割，需将_____________均等分割，否则将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，如需做性别鉴定，还需从_____________细胞取样做DNA分析。

【推荐3】亚麻酸（ALA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答：
①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在39℃、5%CO₂的培养箱中培养22～24h。
②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1。
③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。
④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44～48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次培养液，第5～9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2。
表1亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响

表2亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响

（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO₂的作用是_____________。
（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_____________。步骤③中，判断是否受精的依据是_____________。
（3）步骤④中，受精卵经_____________（时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是_____________。
（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L^-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起_____________（促进、抑制）作用。
（5）实验结果表明，_____________μmol·L^-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，判断依据是_____________。

【推荐1】回答下列（一）、（二）小题：
（一）关于分离以尿素为氮源的微生物实验，请分析回答以下问题：
（1）脲酶可以催化尿素分解为__________，其中碱性物质可以能使酚红指示剂变为__________。
（2）分离以尿素为氮源的微生物，培养基配制必须加凝固剂__________，培养基在__________g/cm²压力下灭菌30分钟，冷却至60℃，加入通过__________的尿素溶液，混合均匀待用。
（3）为了从土壤中分离得到以尿素为氮源的微生物，分离效果比较好的操作方法是采用__________，采用该方法分离，土壤溶液必须经过__________处理。
（二）下图是科学家培育能生产人血清白蛋白乳腺生物反应器的过程，请回答相关问题：

（1）要获取人血清白蛋白基因，可采用PCR技术进行大量扩增，前提是__________。
（2）过程①获得的产物是______________。过程②需对卵细胞供体母牛进行__________处理。过程③常采用______方法。过程④通常将受精卵培养至_________阶段。并在进行过程⑤之前对胚胎进行筛选，选择__________胚胎进行移植。
（3）若转基因母牛只有一条染色体上含有人血清白蛋白基因，该母牛与普通公牛杂交，产下转基因母牛的概率是_________________。

【推荐2】如图为经过体外受精和胚胎分割、移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题：

(1)A细胞是________，为了获得更多的A细胞，对供体母牛进行____________处理。
(2)在体外受精前要对精子进行________处理；受精后，体外培养受精卵时，培养液中提供CO₂的目的是________。
(3)进行胚胎分割时，应选择发育到________时期的胚胎进行操作。
(4)图中①②分别指的是________、_________。

【推荐3】猪蓝耳病又称猪的繁殖与呼吸综合征（PRRS），由动脉炎病毒与呼吸综合征病毒（简称蓝病毒）的蛋白质外壳引起。患病动物主要表现为繁殖障碍、呼吸困难、耳朵蓝紫。母猪感染该病毒后会在妊娠晚期流产，为培育抗蓝病毒的转基因猪，工作人员根据哺乳动物受精作用和早期胚胎的发育过程提出了解决方案（如图）。请回答下列问题：

   

(1)B猪体细胞在培养瓶中培养时，要保证培养液无菌、无毒，常在培养液中加入______，另外还需定期更换培养液，以防止______对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，还需用______处理后分装到多个培养瓶中进行传代培养。
(2)由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建基因表达载体，该过程需要用的酶有______。常采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和载体，其优点是______。
(3)通过步骤①的技术手段______得到甲，培养至乙______，然后移植到经______处理的C猪的______，由于C对乙不发生______，从而为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(4)利用______技术检验D猪是否产生相应的抗体。该抗体也可使用杂交瘤技术来制备，通常情况下，杂交瘤细胞是由经培养的骨髓瘤细胞和______细胞融合获得的，与诱导植物原生质体融合方法不同的是______。