应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题:______ 。①过程需要的工具酶是_______ ,③过程培养到桑葚胚或囊胚阶段,可以采用_____ 技术,培育出多头相同的转基因犊牛。
(2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ最可能是______ 细胞,Ⅲ代表的细胞具有_______ 的特点。
(3)在抗虫棉培育过程中,⑤过程采用的技术是______ 。
(2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ最可能是
(3)在抗虫棉培育过程中,⑤过程采用的技术是
更新时间:2024-05-23 18:29:35
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【推荐1】质粒是基因工程中最常用的载体,如下图所示,质粒上有标记基因,a、b、c(b为氨苄青霉素抗性基因,c为四环素抗性基因)为外源基因的插入点,通过标记基因可推知外源基因插入的位置,插入位置不同,细菌在培养基上的生长情况也不同。请回答下列问题。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/27/9aefb41c-6310-4e8b-b386-16b302beaa41.png?resizew=365)
(1)质粒的基本组成单位是_____ 。
(2)将细菌放在含有四环素、氨苄青霉素的培养基中培养,属于基因工程操作中的____ 步骤。
(3)在插入外源基因过程中用到的工具酶有_____ 、________ 。
设计实验探究外源基因插入的位置
(4)步骤:
①将导入外源基因的细菌进行培养产生大量细菌。
②分组:将细菌平均分成2组并标号为1、2。
③培养:将第1组细菌放入含____ 的培养基中培养,将第2组细菌放入含四环素的培养基中培养。
④观察并记录结果。
(5)预测实验结果及结论:
①若第1组、第2组均能正常生长,则外源基因的插入点是____ 。
②若第1组能正常生长,第2组不能生长,则外源基因的插入点是____ 。
③若第1组不能生长,第2组能正常生长,则外源基因的插入点是____ 。
(6)人类胰岛素基因位于第11号染色体上,长度8416bp,包含3个外显子和2个内含子,人类胰岛素的氨基酸序列已知。回答相关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/27/ff92d1b8-5d70-4b83-bd4d-9dcb628880ea.png?resizew=534)
经过三轮循环可以得到所需的目的基因,一个DNA分子经过5轮循环,需要引物A_____ 个。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/27/9aefb41c-6310-4e8b-b386-16b302beaa41.png?resizew=365)
(1)质粒的基本组成单位是
(2)将细菌放在含有四环素、氨苄青霉素的培养基中培养,属于基因工程操作中的
(3)在插入外源基因过程中用到的工具酶有
设计实验探究外源基因插入的位置
(4)步骤:
①将导入外源基因的细菌进行培养产生大量细菌。
②分组:将细菌平均分成2组并标号为1、2。
③培养:将第1组细菌放入含
④观察并记录结果。
(5)预测实验结果及结论:
①若第1组、第2组均能正常生长,则外源基因的插入点是
②若第1组能正常生长,第2组不能生长,则外源基因的插入点是
③若第1组不能生长,第2组能正常生长,则外源基因的插入点是
(6)人类胰岛素基因位于第11号染色体上,长度8416bp,包含3个外显子和2个内含子,人类胰岛素的氨基酸序列已知。回答相关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/27/ff92d1b8-5d70-4b83-bd4d-9dcb628880ea.png?resizew=534)
经过三轮循环可以得到所需的目的基因,一个DNA分子经过5轮循环,需要引物A
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【推荐2】肠道病毒71型(EV71)为单股正链RNA病毒,是引起手足口病的主要病原体之一,在EV71中,病毒结构蛋白1(VP1)为主要的中和抗原(中和抗原与中和抗体结合后能阻止病原体入侵与增殖)。下图为利用重组大肠杆菌表达VP1蛋白,并以VP1蛋白为抗原制备单克隆抗体的过程。回答以下问题。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/2/4f660542-17d5-410a-a497-be8804dd9216.png?resizew=723)
(1)重组大肠杆菌中,由EV71病毒的RNA构建cDNA需经过_____ 过程,随后cDNA通过PCR技术扩增。将目的基因导入大肠杆菌需要构建表达载体,常用的表达载体是_____ 。
(2)在小鼠腹腔内注射VP1蛋白进行免疫,在35天获取B淋巴细胞悬液进行融合。在获取B淋巴细胞前3天需在腹腔再次注射VP1蛋白,这样做的原因是_____ 。
(3)缺失HPRT基因的细胞无法在HAT培养基中生存,HAT培养基可以筛选出骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的杂交瘤细胞,其它细胞都会死亡。据此推测,在单克隆抗体制备过程中缺失HPRT基因的细胞是_____ (填“大肠杆菌”“B淋巴细胞”“骨髓瘤细胞”)。
(4)在杂交瘤细胞筛选培养过程中需在培养基中添加胎牛血清,并置于37℃、50mL/LCO2培养箱中培养。培养箱中CO2的作用是_____ 。
(5)下图是研究人员对不同单克隆抗体(A/B)的检测结果。哪一种单克隆抗体适合进入下一步研制?判断并说出理由:_____ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/2/36c32074-a076-4ac8-bd4d-d21ae88eb7c9.png?resizew=612)
(6)该单克隆抗体成功制备后,对于防治手足口病有什么作用?_____
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/2/4f660542-17d5-410a-a497-be8804dd9216.png?resizew=723)
(1)重组大肠杆菌中,由EV71病毒的RNA构建cDNA需经过
(2)在小鼠腹腔内注射VP1蛋白进行免疫,在35天获取B淋巴细胞悬液进行融合。在获取B淋巴细胞前3天需在腹腔再次注射VP1蛋白,这样做的原因是
(3)缺失HPRT基因的细胞无法在HAT培养基中生存,HAT培养基可以筛选出骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的杂交瘤细胞,其它细胞都会死亡。据此推测,在单克隆抗体制备过程中缺失HPRT基因的细胞是
(4)在杂交瘤细胞筛选培养过程中需在培养基中添加胎牛血清,并置于37℃、50mL/LCO2培养箱中培养。培养箱中CO2的作用是
(5)下图是研究人员对不同单克隆抗体(A/B)的检测结果。哪一种单克隆抗体适合进入下一步研制?判断并说出理由:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/2/36c32074-a076-4ac8-bd4d-d21ae88eb7c9.png?resizew=612)
(6)该单克隆抗体成功制备后,对于防治手足口病有什么作用?
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【推荐3】人血清白蛋白(HSA)是人血浆中的主要蛋白质,临床上用于肝硬化、糖尿病性肾病等疾病治疗。经过几十年的发展,科学家们应用转基因技术,已实现在大肠杆菌、牛乳腺细胞和苜蓿(一种豆科植物)中规模化生产HSA。请回答以下问题:
(1)科学家通过PCR技术扩增HSA基因,该技术的原理是__________ ,通过__________ 使DNA解链为单链,冷却至55~60℃后再加热至70~75℃ Taq酶从______ 开始进行互补链的合成。
(2)转基因技术的核心步骤是______________ 。为使导入大肠杆菌和苜蓿细胞中的目的基因能够表达,目的基因的上游和下游应分别具有__________ 元件;标记基因的作用是________________ 。
(3)与大肠杆菌相比,牛乳腺细胞和苜蓿等生物反应器所获得的HSA更符合人们的需求,原因是_________________________________ 。
(1)科学家通过PCR技术扩增HSA基因,该技术的原理是
(2)转基因技术的核心步骤是
(3)与大肠杆菌相比,牛乳腺细胞和苜蓿等生物反应器所获得的HSA更符合人们的需求,原因是
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【推荐1】为解决人类治疗时出现如人体免疫系统识别而产生人抗鼠抗体等问题,科学家们通过构建人免疫蛋白(Ig)转基因小鼠来生产单克隆抗体。
(1)构建人免疫蛋白转基因小鼠时,为避免小鼠细胞自身Ig基因表达而产生的免疫排斥,要选择自身Ig基因缺陷的小鼠___ 细胞作为受体细胞,并通过___ 操作导入重组DNA。将经筛选后受体细胞进行____ 、再将胚胎移植到_____ 处理的代孕鼠子宫内,经代孕母鼠分娩后培育、筛选获得人免疫蛋白(Ig)转基因小鼠。
(2)制备单克隆抗体时,取经抗原免疫的转基因小鼠脾细胞和_____ ,电刺激使之融合,筛选出杂交细胞后进行抗体检验,然后____ 培养能产生抗体的阳性细胞并再次进行抗体检验,筛选出的阳性克隆可称为单抗细胞株。
(3)检测受体细胞是否合成抗体的方法是__ ;基因工程制备的单抗与杂交瘤技术制备的单抗相比,最突出的优点是___________ 。
A.纯度高 B.亲合力强 C. 非异源性 D. 稳定性高
(1)构建人免疫蛋白转基因小鼠时,为避免小鼠细胞自身Ig基因表达而产生的免疫排斥,要选择自身Ig基因缺陷的小鼠
(2)制备单克隆抗体时,取经抗原免疫的转基因小鼠脾细胞和
(3)检测受体细胞是否合成抗体的方法是
A.纯度高 B.亲合力强 C. 非异源性 D. 稳定性高
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解题方法
【推荐2】细胞工程在药物生产和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料,回答下列问题。
材料一:人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。
(1)免疫处理的小鼠产生的B淋巴细胞群能合成并分泌___________ (填“一种”或“多种”)抗体。诱导小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合时,采用的化学诱导试剂是____________ 。经HAT培养基培养筛选得到杂交瘤细胞,该细胞具有____________ 特点,再进行克隆化培养和抗体检测,经过多次筛选,才能获得足够数量的能分泌____________ 的杂交瘤细胞。该过程一般在多孔细胞培养板上进行:先将细胞悬浮液稀释到7~10个细胞/mL,再在每个培养孔中滴入0.1 mL细胞稀释液,其目的是___________ 。
(2)单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂,如科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体,制作出了早孕试纸,该试纸可以利用尿液诊断早孕的理由是____________ 。
(3)若利用植物组织培养技术,可将龙井茶叶细胞培养到___________ 阶段,然后从___________ (填细胞器)中提取茶碱;一般来说,植物组织培养培育成植株的生殖方式为___________ 。
材料一:人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。
(1)免疫处理的小鼠产生的B淋巴细胞群能合成并分泌
(2)单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂,如科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体,制作出了早孕试纸,该试纸可以利用尿液诊断早孕的理由是
(3)若利用植物组织培养技术,可将龙井茶叶细胞培养到
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【推荐3】全球新冠肺炎疫情仍在流行,防控疫情最有效、最经济的办法就是接种疫苗。目前我国疫苗研发取得可喜进展,新冠疫苗接种工作也有序展开。2021年2月,陈薇院士团队成功开发了一种以人复制缺陷腺病毒为载体的重组新型冠状病毒基因疫苗,目前已获批上市。请回答下列问题。
(1)已知新冠病毒的S抗原基因编码的S蛋白在感染人体细胞的过程中起到关键作用。制备腺病毒载体新冠病毒疫苗时,首先需要在_____________ 的作用下,以新冠病毒的遗传物质RNA为模板经过逆转录得到S抗原基因。接着常利用PCR技术扩增S抗原基因,为了便于S抗原基因与腺病毒载体的连接,需要在引物的___________ (填“3'”或“5'”)端加上限制酶切割位点。
(2)S抗原基因整合进腺病毒基因组时,需将S抗原基因插在腺病毒载体的启动子和终止子之间,原因是:_________________________ ;且腺病毒中负责复制的关键基因片段也被剪切掉,目的是:____________________________________ 。
(3)注射以上腺病毒载体疫苗后也难以使人类彻底摆脱新冠病毒,可能的原因有:________________ (至少答出两点)。
(4)研究人员还可将S蛋白注入动物体内,一段时间后从脾脏中获取浆细胞,与骨髓瘤细胞融合,并利用选择培养基筛选出_________ 。接着经过多次筛选获得针对S蛋白的___________________ 。利用该方法制备的产物来治疗新冠肺炎的原理是_____________________ 。
(1)已知新冠病毒的S抗原基因编码的S蛋白在感染人体细胞的过程中起到关键作用。制备腺病毒载体新冠病毒疫苗时,首先需要在
(2)S抗原基因整合进腺病毒基因组时,需将S抗原基因插在腺病毒载体的启动子和终止子之间,原因是:
(3)注射以上腺病毒载体疫苗后也难以使人类彻底摆脱新冠病毒,可能的原因有:
(4)研究人员还可将S蛋白注入动物体内,一段时间后从脾脏中获取浆细胞,与骨髓瘤细胞融合,并利用选择培养基筛选出
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【推荐1】紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草,但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁,单宁可与植物蛋白质结合,不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的新型牧草,科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如下图:(注:IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段,R-6G可阻止线粒体的功能)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/5/31/3249707642175488/3251183020228608/STEM/6862c968d10d4777bb8baf9d9bf7c68f.png?resizew=554)
(1)在制备两种植物原生质体时,先将两种细胞分别置于0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液中,使细胞在较高渗透压环境下处于较为稳定状态,从而有利于用_____ 酶去除细胞壁,分别获得两种植物的原生质体。
(2)步骤②为_____ ,经过步骤②、③到形成再生植株,体现的主要原理是_____ 。
(3)利用图示技术进行育种的优点是_____ 。
(4)谷蛋白是野生清水紫花苜蓿中含量较高的一种蛋白质,科研人员为比较植株不同部位谷蛋白的含量,想通过制备相应的单克隆抗体进行检测,部分流程如下图:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/5/31/3249707642175488/3251183020228608/STEM/329da43dfc6340109cb9055978a83ccc.png?resizew=235)
经过a步骤,细胞两两融合的产物有_____ 种。在步骤b的基础上经过步骤c_____ 和抗体检测筛选得到符合要求的杂交瘤细胞,获得的杂交瘤细胞可采用体外培养的方式进行扩大培养,培养一段时间后可从培养液中提取单克隆抗体。
(5)百脉根花的提取液可用于生产护肤品,为研究百脉根花提取液对受损皮肤的修复效果,需要一批遗传性状基本一致的实验小鼠,研究人员从_____ (填“同一”或“不同”)小鼠个体中取出体细胞核进行体细胞核移植,形成的多个胚胎再通过_____ 技术,以进一步增加胚胎的数量,最后移植到经过_____ 处理的受体雌鼠中获得实验小鼠。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/5/31/3249707642175488/3251183020228608/STEM/6862c968d10d4777bb8baf9d9bf7c68f.png?resizew=554)
(1)在制备两种植物原生质体时,先将两种细胞分别置于0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液中,使细胞在较高渗透压环境下处于较为稳定状态,从而有利于用
(2)步骤②为
(3)利用图示技术进行育种的优点是
(4)谷蛋白是野生清水紫花苜蓿中含量较高的一种蛋白质,科研人员为比较植株不同部位谷蛋白的含量,想通过制备相应的单克隆抗体进行检测,部分流程如下图:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/5/31/3249707642175488/3251183020228608/STEM/329da43dfc6340109cb9055978a83ccc.png?resizew=235)
经过a步骤,细胞两两融合的产物有
(5)百脉根花的提取液可用于生产护肤品,为研究百脉根花提取液对受损皮肤的修复效果,需要一批遗传性状基本一致的实验小鼠,研究人员从
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【推荐2】炎炎夏日即将到来,小蚊子总会给人们带来大烦恼,于是人们想到了用菊花(能分泌除虫菊酯)驱蚊、用转基因的真菌灭蚊等。回答下列问题:
(1)我国科学家已经完成了对菊花全部基因的测序,基因测序需要构建菊花的基因组文库,理由是________________________________ 。
(2)为大量繁殖菊花,可以采用________ 技术,该技术的优点除了可以高效快速地实现种苗的繁殖,还可以________________________________ 。
(3)科学家从澳大利亚蓝山漏斗网蜘蛛中提取了Hybrid杀虫剂基因,将其导入某种野生真菌中获得了转基因真菌。
①大量扩增Hybrid杀虫剂基因可利用PCR技术,该技术的前提是要有________________________ 用以合成引物。
②获得转基因真菌的关键步骤为________________________________________ ,此后将其导入野生真菌中以获得转基因真菌。
(1)我国科学家已经完成了对菊花全部基因的测序,基因测序需要构建菊花的基因组文库,理由是
(2)为大量繁殖菊花,可以采用
(3)科学家从澳大利亚蓝山漏斗网蜘蛛中提取了Hybrid杀虫剂基因,将其导入某种野生真菌中获得了转基因真菌。
①大量扩增Hybrid杀虫剂基因可利用PCR技术,该技术的前提是要有
②获得转基因真菌的关键步骤为
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【推荐3】乙醇等“绿色能源”的开发备受关注.利用玉米秸秆等生产燃料酒精已成为大势所趋.
(1)植物组织培养可实现玉米等的大规模快速繁殖,图解如下,由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植株,这项技术利用了___________ 原理,通过组织培养技术进行植物繁育,可以很好地保持亲本的优良性状,原因是________________ ?A与B分别代表________ 和________ ,过程①与②分别表示________ 和________ ?
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/5/26/1953402332954624/1956947034939392/STEM/5c39f4a9024748b7b03e7c91067fe41a.png?resizew=240)
(2)在玉米组织培养过程中,有关说法不正确的是 (______ )
A.培育出的玉米植株个体都是纯合子
B.A细胞全能性最高
C.从外植体到A的过程不需要光照
D.从外植体到完整植株,细胞分裂都是有丝分裂a
(3)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:
步骤1:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理
步骤2:制备选择培养基,在基本培养基的基础上,注意________ 和________ ,加琼脂后灭菌,制成固体平板
步骤3:将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板
步骤4:根据____________________ 筛选出突变菌
(4)上述步骤2、3和4的依据分别是_______________________________________
(5)突变菌往往带有一些特殊的基因,在获得这些基因的过程中,PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物和DNA聚合酶的作用分别是什么?_________________________
(1)植物组织培养可实现玉米等的大规模快速繁殖,图解如下,由外植体通过植物组织培养技术培育成完整植株,这项技术利用了
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/5/26/1953402332954624/1956947034939392/STEM/5c39f4a9024748b7b03e7c91067fe41a.png?resizew=240)
(2)在玉米组织培养过程中,有关说法不正确的是 (
A.培育出的玉米植株个体都是纯合子
B.A细胞全能性最高
C.从外植体到A的过程不需要光照
D.从外植体到完整植株,细胞分裂都是有丝分裂a
(3)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:
步骤1:野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理
步骤2:制备选择培养基,在基本培养基的基础上,注意
步骤3:将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板
步骤4:根据
(4)上述步骤2、3和4的依据分别是
(5)突变菌往往带有一些特殊的基因,在获得这些基因的过程中,PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物和DNA聚合酶的作用分别是什么?
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