【推荐1】下图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞（MEF 细胞）的示意图，图二是在用 MEF 细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞（ES 细胞）的示意图。

(1)图一所示，制备细胞悬液时，常用____酶来消化剪碎的组织块。配制培养液时，通常需要在合成培养基的基础上添加____等一些天然成分。当 细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂，这种现象称为细胞的____。
(2) 细胞是由____中分离出来的一类细胞， 细胞在功能上具有发育的____。
(3) 细胞能够分泌某些蛋白质，其合成到分泌至细胞外的过程是：核糖体 ____ 囊泡 ____ 囊泡，再通过____方式分泌到细胞外。在培养液中单独培养 细胞时， 细胞容易发生分化，结合图二可推知MEF细胞的作用是____。

【推荐3】科学家将小鼠多能干细胞的4种基因Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4，同时导入已分化的小鼠成纤维细胞中，结果后者被诱导成为多能干细胞，称为诱导多能干细胞（iPScell），此类细胞能分裂并产生皮肤细胞﹑神经细胞以及可以搏动的心肌细胞等。请分析回答下列问题：

(1)人体干细胞可以分为__________两大类。
(2)④过程表示细胞发生了分化，原因是D、E和F细胞中的__________（填2种化合物名称）种类不完全相同。细胞分化的实质是__________。
(3)动物细胞培养过程中需通入CO₂，其作用是___________。
(4)艾弗里在证明DNA是遗传物质的实验中，通过分别向不同实验组加入各类酶来确认“转化因子”的化学本质，利用了自变量控制的___________原理。参考此方法，如果要了解Oct3/4、Sox2，c-Myc和Klf4基因在诱导iPS细胞时，每个基因作用的相对大小，该如何进行实验?请你给出实验设计的思路。__________。

【推荐1】iPS细胞是利用病毒将四个基因（Oct4、Sox2、Klf4和 c-Myc）导入动物体细胞使其转化为类似胚胎干细胞的一种细胞。科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得iPS细胞，继而培育出克隆鼠。流程如下：

（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为____，培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为____________。
（2）图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠__________ 内获得，该过程称为_________。
（3）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的__________分离培养获得，胚胎干细胞（ES）在形态上表现为____________。
（4）若要获得雌鼠，胚胎移植前能否用重组囊胚的滋养层细胞作性别鉴定？______。最终获得的克隆鼠的体色为______________（黑色、灰色、白色）。

【推荐2】人乳头瘤病毒（HPV）可诱发细胞癌变，抗-HPV的单克隆抗体可作为宫颈癌的诊断试剂。科研人员以小鼠为实验材料制备抗HPV的单克隆抗体，流程如图所示。

(1)图中部位甲是小鼠的_________（器官），为使细胞悬液中一定含有能产生抗HPV抗体的B淋巴细胞、需进行的操作是_________。
(2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合所依据的原理是_________，图中筛选1通过用_________进行筛选，筛选2要对杂交瘤细胞Ⅰ进行克隆化培养和抗体检测，其目的是_________。
(3)为了得到大量的抗HPV单克隆抗体，可将杂交瘤细胞Ⅱ接种到适宜的动物细胞培养液中进行培养，但杂交瘤细胞Ⅱ的接种量会影响单克隆抗体的产量。科研人员为探究在培养液中杂交瘤细胞П的最佳接种量而进行实验，请写出实验思路：__________。
(4)抗HPV的单克隆抗体可作为宫颈癌诊断试剂的原因是_________。

【推荐3】为降低人类乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），过程如下图所示。

(1)动物细胞培养时，可以用___酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是___（至少回答两点）。
(2)为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用取自___的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导剂是___。为了获得杂交瘤细胞，应将诱导融合后的细胞放在___培养基上进行培养。
(3)通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和___才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时，首先应保证其处于___的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是___与5%CO₂的混合气体，此外在使用合成培养基时通常还需加入血清。
(4)单克隆抗体的优点是___。单克隆抗体是ADC中的___（填“a”或“b”）部分。
(5)研究发现，ADC在患者体内的作用如下图所示。

①单克隆抗体除了运载药物外，还有___等作用。
②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致___。
③ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于___原理。

【推荐1】今年非洲猪瘟导致大量生猪死亡，通过克隆猪来给生猪养殖户提供猪仔是一条值得探索的途径。早期胚胎细胞异常凋亡是目前克隆猪成功概率较低的主要原因，Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答下列问题

（1）图中应选择减数第二次分裂中期的卵母细胞进行核移植，原因是_______________，为了保证正常的二倍体核型，使用的良种猪体细胞一般都选择__________代以内的细胞。
（2）图中X过程使用的酶是_______________，用PCR扩增Bcl-2基因。该技术的前提是要有一段已知__________________。根据这一序列设计合成引物，PCR扩增过程中使用的酶是_______________。
（3）在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2cDNA的分子数，进而计算总mRNA中Bcl-2的分子数，从而反映出_______________________。
（4）胚胎移植中，应选择有__________________的个体作为受体母猪，并对受体母猪进行______处理。

【推荐2】【生物——选修3:现代生物科技专题】约翰格登于1962年通过实验把蝌蚪已分化体细胞的细胞核移植进入卵母细胞质中，并成功培育出了“克隆青蛙”。请回答下列问题：
（1）由于动物细胞的全能性会随着动物细胞_______程度的提高而逐渐受到限制，直到今天也还不能用类似__________(某种植物细胞工程的技术手段）的方法获得完整的动物个体。因此，约翰格登培育“克隆青蛙”，实际是通过________(某种动物细胞工程的技术手段）来实现的克隆青蛙”和“试管婴儿”所共需的胚胎工程技术有___________________。
（2）山中伸弥于2006年把4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多功能干细胞。在该技术中，逆转录病毒是这4个关键基因进入成纤维细胞的______(基因工程的具），它能够携带外源基因进入受体细胞，并整合到其染色体的DNA上。该操作过程中，除了需要逆转录病毒外，还需要的操作工具有__________、__________。
（3）卡罗琳斯卡医学院2012年10月8日宣布，将2012年诺贝尔生理学或医学奖授予约翰格登和山中伸弥，以表彰他在“体细胞重编程技术”领域作出的革命性贡献。所谓“体细胞重编程技术”即将成年体细胞重新诱导成早期干细胞状态，即获得iPS细胞，iPS细胞与胚胎干细胞一样，具有______，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞，iPS细胞的形态特征是________________。
（4）动植物细胞工程在农业生产、医药卫生等领域有着广泛的用途，回答下列问题。
①在将两种植物细胞进行杂交时诱导两种植物细胞融合可以采用物理或化学的方法进行，常用的物理方法有__________(写2种即可）。融合的细胞形成愈伤组织，在愈伤组织的培养过程中，当生长素和细胞分裂素的比值___________(填“高”或“低”）时，有利于丛芽的分化；通过上述过程获得杂种植株依据的原理是____________。
②在制备单克隆抗体的过程中，若融合的结果随机出现多种不同的杂交细胞，就需要在特定的培养基上进行筛选，从而得到_________细胞。单克隆抗体与传统方法获得的抗体相比，具有________的特点，因此广泛用于疾病的诊断等方面。

【推荐1】回答下列有关胚胎工程的相关问题；
（1）1890年，英国剑桥大学的生物学家将纯种的安哥拉兔的两个4细胞胚胎移入一只纯种的比利时兔的输卵管内，成功地得到两只纯种的安哥拉子兔。这个实验首次证实了_____________________的可能性。
（2）哺乳动物卵子发生过程中，减数第二次分裂是在____________过程中完成的，哺乳动物卵子和精子在发生上的重要区别是_______________。在实施体外受精时，获能的精子与培养成熟的卵子，通常都可以在_________中完成受精作用，在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查_____________。
（3）胚胎移植需收集胚胎，收集胚胎时冲卵的生理学基础是___________。胚胎分割时用分割针取样的滋养层的用途是___________。
（4）ES细胞是研究细胞分化的理想材料，ES细胞在饲养层细胞上，或在_______的培养液中，能够维持不分化的状态。

【推荐2】重症综合性免疫缺乏症（SCID）小鼠是患有一种严重致死性隐性遗传病的小鼠。该品系的腺苷脱氨酶（ADA）缺乏导致表现出严重的联合免疫缺陷症状，B细胞核T细功能缺失。SCID小鼠是继裸鼠（免疫缺陷动物，先天无胸腺，缺乏T淋巴细胞）出现之后，人类发现的又一种十分有价值的免疫缺陷动物。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对SCID小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图所示。

（1）步骤①核移植前为获得更多的卵母细胞，采用_________ 处理使其超数排卵，从输卵管中冲出的卵子处于________时期，去除卵母细胞的____________（结构）。
（2）培养细胞过程中，要置于C0₂培养箱中，其中C0₂的主要作用是_______ 。
（3）图中ES细胞来自_______ 时期的______ 细胞。步骤③中，需要先利用PCR技术扩增正常基因片段，可以根据正常基因的__________设计引物，PCR技术中使用的酶为________。为检测目的基因是否表达，采用的方法为__________。

【推荐3】以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a～h为操作过程，请据图回答有关问题：

（1）图中c的操作名称是________，d、f的操作名称是_______。
（2）图中的精子获取之后要进行________处理，良种奶牛激素处理后获得了更多的卵母细胞，卵母细胞受精后发育可得到早期胚胎；图中早期胚胎属于胚胎发育的________期，其中胚胎干细胞来源于________（填数字标号）。
（3）过程h常用的方法是_________。采用_____________技术来检测转基因牛D的DNA上是否插入了________。
（4）图中A、B牛的性别________（填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。