组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 细胞工程 > 动物细胞融合与单克隆抗体的制备
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:175 题号:3179049
据新华社北京2008年8月11日电 :由中国农业大学李宁院士领导的研发团队与生物技术有限公司合作,日前在北京转基因动物试验基地成功培育出了一头健康的转入“抗CD20抗体基因”的转基因奶牛——贝贝。抗人CD20单克隆抗体是目前治疗B淋巴细胞瘤等恶性肿瘤的特效药物。该研发团队通过转基因技术获得转基因奶牛乳腺生物反应器,其生产的抗人CD20单克隆抗体表达量显著高于采用哺乳动物细胞系的表达量。
(1)下列各图表示采用哺乳动物细胞系制备单克隆抗体过程的各阶段图解,请据图回答下列问题:

①请用箭头和图中字母表示出单克隆抗体制备的过程:_____________________
②图B注射的特定抗原是指____抗原,图H中进行克隆化培养和抗体检测呈阳性的细胞是_______细胞。
(2)转基因牛贝贝可通过分泌乳汁来生产抗人CD20抗体,在基因表达载体中,人CD20抗体基因的首端必须含有乳腺蛋白基因的____________,它是______________识别和结合点位点。将基因表达载体通过特定技术导入到受精卵,再受精卵移植到母牛的输卵管或子宫内,使其发育成为转基因牛犊。
(3)科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发许多动物细胞的分裂,这为单克隆抗体的制备提供了新的途径。有人提出,可以直接通过基因工程制备单克隆抗体,其思路如下图所示。请回答:

形成重组质粒过程中,对核苷酸序列有严格要求的工具酶是______(用图中字母回答)。导入的受体细胞Ⅱ是__________,对导入重组质粒的II进行“检测”的目的是________________________

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(1)过程a是基因工程的相关操作,构建表达载体时需要使用的工具酶有___________,这是培养转基因鼠的核心步骤。
(2)过程b为获取免疫激活的B细胞与骨髓瘤细胞置于培养液中,对所需培养液应进行___________,目的是___________;采用灭活病毒诱导细胞融合的原理是___________。该过程获得的杂交瘤细胞必须经过___________(填筛选过程)才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。
(3)上述过程获得的全人源单克隆抗体在抗病毒治疗方面的优点是___________,具有该优点的原因是___________。单克隆抗体除了治疗疾病外,还有___________等作用。
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(1)科研人员获得上述小鼠的脾脏细胞,制备两种杂交瘤细胞。每种杂交瘤细胞产生的抗体结构、与抗原结合的情况如图1所示。

①制备杂交瘤细胞时,需将上述小鼠的脾脏组织,用有关酶处理获得单细胞后,再与小鼠的骨髓瘤细胞融合,筛选得到两种杂交瘤细胞。将两种杂交瘤细胞用_____试剂处理促进其融合,在培养基中加入_____(天然成分)培养。如果两种细胞成功融合,则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b,这种细胞称作双杂交瘤细胞。
②抗体由两条重链和两条轻链组成,重链和轻链均分为恒定区和可变区,两条重链依赖于A1或B1进行组装(A1与B1相同),重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b(a与b相同)。因此,双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多,其中有一种抗体能同时与抗原α、β结合称为双特异性抗体,如图2请将A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中。

1

2

3

4

5

6

A2

B2

___

___

α

___


③为使双杂交瘤细胞只产生图2所示双特异性抗体,降低纯化分离成本,科研人员对重链、轻链的结构进行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定区通过改变_____,进而改变蛋白质的空间结构,实现“榫卯”式互补组装的唯一性,这种改造属于现代生物技术中的_____工程。
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(1)实验前将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p54注入小鼠甲体内,该处理的目的是____
(2)为了得到能产生抗p54蛋白的单克隆抗抗体的杂交瘤细胞,需要进行筛选,图中筛选1所采用的培养基属于____使用该培养基进行细胞培养的结果是____。筛选2对杂交瘤细胞进行________,经过多次筛选,获得施分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
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