农杆菌侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA插入到植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程，请据图作答：
（1）剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中，需用________ 处理DNA以防止DNA片段的自身环化，需用________ “缝合”双链DNA片段的平末端。
（2）目的基因是指编码蛋白质的结构基因和一些_________ 。由过程②形成的运载体中，目的基因的首端具有________ 识别和结合的部位。
（3）过程③常用_______ 处理使农杆菌成为感受态细胞。在过程⑤⑥前，常采用________ 技术检测农杆菌和愈伤组织细胞中是否有目的基因及转录产物。
（4）过程④需对植物细胞做冲洗和_______ 处理，然后用_______ 去除细胞壁。
（1）剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中，需用
（2）目的基因是指编码蛋白质的结构基因和一些
（3）过程③常用
（4）过程④需对植物细胞做冲洗和
更新时间：2016-12-12 21:32:04
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解题方法
【推荐1】抗癌药物紫杉醇是从红豆杉树皮中提取出来的生物活性物质，可抑制肿瘤细胞增殖。由于红豆杉生长缓慢，资源短缺，使紫杉醇的提取受到了极大限制，科研人员正试图通过多种方法提高紫杉醇的产量。
(1)紫杉醇属于红豆杉产生的___ 代谢物（填“初生”或“次生”）。紫杉醇能与细胞内的微管蛋白结合，推测其可通过影响___ 的形成，从而抑制肿瘤细胞的有丝分裂，达到抗癌效果。
(2)研究人员利用离体培养的红豆杉细胞生产紫杉醇。如图所示：___ 。
(3)研究人员还尝试运用植物体细胞杂交技术，将红豆杉与柴胡培育获得可产生紫杉醇的柴胡植株。实验过程中可用___ 酶处理可获得原生质体，再用化学法，如___ 融合法诱导原生质体融合，融合后得到的杂种细胞再经脱分化、再分化等进而发育成完整植株，其中启动脱分化和再分化的关键植物激素是___ 。
(1)紫杉醇属于红豆杉产生的
(2)研究人员利用离体培养的红豆杉细胞生产紫杉醇。如图所示：
(3)研究人员还尝试运用植物体细胞杂交技术，将红豆杉与柴胡培育获得可产生紫杉醇的柴胡植株。实验过程中可用
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【推荐2】下图表示通过二倍体植株甲（自花传粉植物）和植株乙培育植株A、B、C、D、E的过程，其中植株甲的基因型为AaBb，两对等位基因分别位于两对同源染色体上，乙基因型为DDdd。请据图回答下列问题：
（1）植株A经秋水仙素处理后获得的一株植株B的基因型为AABB的概率是_________ ，这种育种方法的优点是______ 。
（2）若快速大量培育植物甲，可用_______________ 技术，其中_______ （植物A、C、D、E）的获得也需要用到这项技术。
（3）获得植株E的过程称为_________ 技术，这项技术优点是________ 。
（4）植株A、B、C、D、E中可能与植株甲的基因型相同的是植株________ ，植株E基因型为___________ 。
（1）植株A经秋水仙素处理后获得的一株植株B的基因型为AABB的概率是
（2）若快速大量培育植物甲，可用
（3）获得植株E的过程称为
（4）植株A、B、C、D、E中可能与植株甲的基因型相同的是植株
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【推荐3】胡萝卜的根细胞中含有大量β－胡萝卜素，为培育出含β－胡萝卜素的水稻，科学家进行了如下实验，请回答下列问题：
（1）过程①②利用__________ 去除细胞壁，获得具有活力的__________ 。
（2）过程③若用化学法诱导融合，采用的诱导剂为__________ ，此过程依赖于生物膜__________ 。
（3）若只考虑两个细胞融合，融合成功的细胞进行过程⑤前需要进行筛选，原因是____________________ 。
（4）过程⑤依据的原理是__________ ，需经历__________ 和__________ 两个过程。
（5）上述过程培育杂种植物可__________ ，以对农作物进行改良并创造具有特殊性状的农作物新品种。
（1）过程①②利用
（2）过程③若用化学法诱导融合，采用的诱导剂为
（3）若只考虑两个细胞融合，融合成功的细胞进行过程⑤前需要进行筛选，原因是
（4）过程⑤依据的原理是
（5）上述过程培育杂种植物可
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【推荐1】绿色荧光蛋白（GFP）是一种在当今生命科学和医学研究中被广泛使用的示踪物。基于GFP的光学成像技术使人们可以直接观察到从微观到宏观各个层次上丰富多彩的生命现象。最早普瑞泽成功克隆了绿色荧光蛋白基因（sGFP），随后查尔菲实现了sGFP在大肠杆菌内的表达，大肠杆菌发出了绿色荧光。
(1)sGFP的_______________ 中储存着决定GFP的遗传信息。sGFP在细胞内的表达过程中，需要下列选项中的_______________
A．脱氧核苷三磷酸 B．RNA聚合酶 C．氨基酸 D．tRNA
(2)通过PCR可在短时间内大量获取sGFP。PCR必须要先人工化学合成引物。若有一条引物的部分碱基序列是5'-GCTGCACGT-3'，则与该引物结合的模板DNA链上相应的碱基序列是5'-_______________ -3'。已知该条引物结合模板DNA的位置和扩增方向，请在图方框中用箭头标出另一条引物的位置和扩增方向_______________ 。
大丽轮枝菌（一种丝状真菌）是引起棉花黄萎病的主要病原菌。为观察大丽轮枝菌对棉花根的侵染路径，研究人员利用绿色荧光蛋白基因（sGFP）转染大丽轮枝菌，培育转基因大丽轮枝菌，主要过程如图所示（图中a链和b链分别是相应基因转录模板链）。
(3)据图所示，过程①处理后，sGFP一端a链的黏性末端碱基序列是_______________（5'→3'）。
(4)图中过程②需加入_______________酶，从而获得重组质粒。对获得的重组质粒用BamHⅠ和Hind Ⅲ联合酶切，再进行电泳，得到的电泳条带应是_______________。
(5)重组质粒导入农杆菌后，需对农杆菌进行培养和筛选，在此过程中需用到的仪器是_______________ 。（编号选填）
(6)农杆菌转染大丽轮枝菌的孢子细胞后，孢子细胞也需进行培养和筛选。请简述对农杆菌和大丽轮枝菌的筛选方法并说明原因。_______________________ 。
(1)sGFP的
A．脱氧核苷三磷酸 B．RNA聚合酶 C．氨基酸 D．tRNA
(2)通过PCR可在短时间内大量获取sGFP。PCR必须要先人工化学合成引物。若有一条引物的部分碱基序列是5'-GCTGCACGT-3'，则与该引物结合的模板DNA链上相应的碱基序列是5'-
大丽轮枝菌（一种丝状真菌）是引起棉花黄萎病的主要病原菌。为观察大丽轮枝菌对棉花根的侵染路径，研究人员利用绿色荧光蛋白基因（sGFP）转染大丽轮枝菌，培育转基因大丽轮枝菌，主要过程如图所示（图中a链和b链分别是相应基因转录模板链）。
(3)据图所示，过程①处理后，sGFP一端a链的黏性末端碱基序列是_______________（5'→3'）。
| A．GATC | B．CTAG | C．AGCT | D．TCGA |
A． | B． | C． | D． |
(6)农杆菌转染大丽轮枝菌的孢子细胞后，孢子细胞也需进行培养和筛选。请简述对农杆菌和大丽轮枝菌的筛选方法并说明原因。
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【推荐2】转基因生物作为生物反应器，用于生产人们所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。如图是通过生物工程培育能产生人胰岛素烟草的过程。请据图回答：
（1）构建重组DNA分子的A过程中，需要用到的工具酶有________ 和________ 。
（2）D过程常采用的方法是________ 。若把重组质粒导入动物细胞，常采用的方法是________ 。
（3）E过程用的技术主要包括________ 和________ 两个阶段。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，F过程应该用________ 作为探针。
（1）构建重组DNA分子的A过程中，需要用到的工具酶有
（2）D过程常采用的方法是
（3）E过程用的技术主要包括
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，F过程应该用
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【推荐3】人金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，使其观赏价值降低。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因技术培育出了抗枯萎病的新品种金茶花。请据图回答下列问题：
（1）①和②结合能形成③，首先均要用______________ 处理抗病基因和质粒上特定核苷酸之间的______________ ，使两者露出相同的黏性末端，再用_________________ 将二者连接形成③。
（2）形成③的过程是___________ ，它是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心步骤。
（3）若④过程为将目的基因导入受体细胞，则将此抗病基因导入植物细胞最常用的方法是________ ；除此之外，还可以用____________ 方法导入目的基因到受体细胞。
（1）①和②结合能形成③，首先均要用
（2）形成③的过程是
（3）若④过程为将目的基因导入受体细胞，则将此抗病基因导入植物细胞最常用的方法是
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