【推荐1】科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组，得到的重组质粒导入奶牛受精卵，使其发育为转基因奶牛。pBR322质粒含氨苄青霉素抗性基因（Ap^t）和四环素抗性基因（Tc^r），含5个限制酶切点（PstI、EcoRI、HindIII、BamHI和SalI），如图甲所示。重组质粒形成与否需要鉴定和筛选，方法是将重组DNA分子导入大肠杆菌并在含抗生素的培养基上培养，观察大肠杆菌的生长、繁殖情况以进行判断，如图乙所示。请回答下列问题：

(1)获取人生长激素基因可以采用逆转录法合成，该过程中所用的mRNA是从______细胞中获得的。
(2)如果用某种限制酶切割质粒和人的生长激素基因，形成重组质粒，再将重组质粒导入大肠杆菌中，若受体菌在A培养基中不能形成菌落，在B培养基中能形成菌落。则使用的限制酶可能是______，即目的基因插入了______基因中。
(3)为了利用转基因奶牛生产人生长激素，最好让目基因在______细胞中进行表达，在构建基因表达载体时，需要对______进行改造。
(4)检测转基因奶牛能否产生人生长激素常用的方法是______。
(5)如果要加速转基因奶牛的繁育速度，采用核移植技术比杂交技术更好，这是因为杂交技术容易造成______。

【推荐2】2019年1月24日，《国家科学评论》发表了上海科学家团队的一项重要成果，即先通过基因编辑技术切除猕猴受精卵中的生物节律核心基因BMAL1，再利用体细胞克隆技术，获得了五只BMAL1基因敲除的克隆猴，这是国际上首次成功构建出了一批遗传背景一致的生物节律紊乱的猕猴模型，同时也是世界上首个体细胞克隆猴“中中”“华华”诞生后，体细胞克隆猴技术的首次应用。基因编辑技术是上述研究中的核心技术，该技术中的基因编辑工具是经改造的CRISPR/Cas9系统。该系统由向导RNA和Cas9蛋白组成，由向导RNA引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割来完成基因的编辑过程，其工作原理如下图所示。

（1）CRISPR/Cas9系统广泛存在于细菌体内，推测该系统在细菌体内的作用是___________。
（2）由于Cas9蛋白没有特异性，用CRISPR/Cas9系统切割BMAL1基因，向导RNA的识别序列应具有的特点是___________。
（3）为了获得更多的受精卵，可对母猕猴注射___________激素，使其超数排卵，判断卵细胞受精成功的重要标志是___________。在个体水平鉴定BMAL1基因敲除成功的方法是___________。
（4）该团队利用一只BMAL1缺失的成年猕猴体细胞克隆出5只后代的实验中，体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是___________。
（5）在人类生物节律紊乱机理研究方面，猕猴模型比小鼠、果蝇等传统模型动物更加理想，理由是___________。基因编辑后通过体细胞克隆得到的数只BMAL1缺失猕猴（A组），与仅通过基因编辑受精卵得到的数只BMAL1缺失猕猴（B组）比较，___________（填“A组”或“B组”）更适合做疾病研究模型动物，理由是___________。

【推荐3】某女性的线粒体携带某种严重致病基因，她的前两个孩子因患该病夭亡。后来她接受一个健康女性捐赠的卵母细胞，生育了一个拥有“三父母”的婴儿，培育过程如下图所示。

请据此回答有关问题：
（1）该健康婴儿培育过程中依次涉及___________、___________、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。
（2）图中取自健康女性的卵母细胞是___________（填“A”或“B”）。取卵之前对该女性而要注射___________（激素）。
（3）哺乳动物胚胎的培养液成分一般都比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及___________等物质。当人的体外受精卵在培养液中分裂至8~16个细胞阶段，即可进行___________。
（4）据图分析，理论上医疗团队在进行胚胎移植时___________（填“有”或“没有”）必要对胚胎的性别进行选择，理由是_____________。

【推荐1】请回答下列有关现代生物科技专题的问题
(1)动物细胞培养时，需要利用 ____________________酶处理组织块，使其分散成单个细胞；培养过程中细胞表现出________________和_________________等特点；通常还要在细胞培养液中添加一定量的___________________，以防培养过程中的污染，另外通常需加入__________________ 等一些天然成分。
(2)杂交瘤细胞的特点是______________________________________ ，单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有___________________并可能大量制备的特点。
(3)植物体细胞杂交之前，需要用____________去除细胞壁，获得具有活力的___________________，一般用___________________作为诱导剂来诱导其融合。
(4)试管牛的生产过程中，在试管中完成的步骤为_____________________ 和 ___________________，将胚胎培养发育至__________________阶段再移植到代孕母体体内。
(5)对污染的矿山进行生态修复，一般选用耐重金属污染的本地植物进行种植，体现了生态工程的________________原理。

【推荐2】2018年11 月，来自中国深圳的科学家宣布，一对名为露露和娜娜的基因编辑婴儿于 11 月在中国健康诞生。这对双胞胎在的一个CCR5基因（HIV 病毒入侵机体细胞的主要辅助受体之一），经过修改，使她们出生后即能天然抵抗艾滋病。这是世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿。
(1)自然条件下，受精是在雌性动物的________内完成的。
(2)双胞胎的妈妈通过常规的试管婴儿技术受孕，涉及的胚胎工程技术主要有_________、 _______和早期胚胎培养等。
(3)医学家首先要向妈妈注射_________,已获得足够数量的卵子，受精前并对志愿者爸爸的精子进行_________处理。
(4)早期胚胎发育的过程大致为：受精卵→_________→囊胚→原肠胚，囊胚中的_________层细胞将发育成胎膜和胎盘。
(5)中国政府对涉及试管婴儿的态度是：_________生殖性克隆，不反对治疗性克隆。

【推荐3】毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFII基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

   

(1)构建基因表达载体时，为确保KIFII基因在受体细胞中能顺利表达，必须在基因的两端加上____________。
(2)培养成纤维细胞和卵母细胞需要的气体环境是____________的混合气体。
(3)在过程③中为了获得比自然情况下更多的卵（母）细胞，需用____________处理成年母绒山羊。
(4)早期胚胎能够在代孕母羊子宫存活的生理学基础是____________。
(5)目前科学家通过蛋白质工程制造出了味道鲜美的羊肌肉蛋白，采用蛋白质工程制造出味道鲜美的羊肌肉蛋白的思路是____________（排序）
①推测羊肌肉蛋白的氨基酸序列
②从羊肌肉蛋白的预期功能出发，设计其结构
③找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因
④获得味道鲜美的羊肌肉蛋白

【推荐1】如图所示表示采用不同方法培育良种牛的过程，a—h为操作过程，请据图回答有关问题：

(1)“试管牛”技术的操作流程是________________（用箭头将相关字母连接起来表示）。
(2)获得早期胚胎之后，还不能直接作为商品进行售卖，还需要对其进行性别鉴定。SRY-PCR技术是比较常用的性别鉴定方法，利用的原理是通过判断胚胎细胞是否具备雄性个体Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）来判断胚胎的性别。在进行PCR时应选择SRY基因的一段碱基作引物，取胚胎中_____________细胞的DNA作模板，最后利用SRY基因特异性探针，对扩增产物进行检测；我们应该选择反应结果呈_________（填“阴性”或“阳性”）者作为商品出售，原因是______________。
(3)流程cde相对于fg，具有的优势是__________。
(4)早期胚胎发育过程中，_________期细胞开始分化，进一步发展会发生透明带破裂，胚胎从其中伸展出来的现象，这一现象称为_________。

【推荐2】胚胎工程技术可用于良种奶牛的繁殖。请回答下列问题：
（1）用激素处理可促进良种奶牛超数排卵，对收集到的卵子长期保存时一般保存在______________中。显微受精技术借助显微操作仪可将精子直接注入卵子的细胞质中，因而不受精子数量和活力的限制，在这个过程中，注射针需要穿过卵子的____________（至少两项）等结构。
（2）在良种奶牛的繁殖过程中需要进行性别控制。一种方法是利用X精子和Y精子分离技术获取X精子，受精卵全部发育成雌牛。另一种方法是从囊胚上取少量____________，进行DNA分析鉴定性别。SRY基因是Y染色体的性别控制基因，在对取样胚胎细胞中的DNA进行PCR扩增后，用SRY特异性探针对扩增产物进行检测，出现阳性反应者，其胚胎为____________（填雌性或雄性）。
（3）胚胎分割可增加胚胎数量，在胚胎分割时应注意将内细胞团均分，原因是________________________________________________。
（4）良种奶牛胚胎移植的优点是____________________________________。移植胚胎不会与代孕母牛发生免疫排斥反应，因此，一般情况下，良种奶牛胚胎移植的成功率主要取决于____________________________________。

【推荐3】应用生物工程技术可获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是_______________，②过程常用的方法是_______________。
（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_______________
。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用_______________和______________技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ是_________细胞，Ⅲ代表的细胞具有_______________的特点。
（4）在抗虫棉培育过程中，⑤过程采用的是_______________技术。

【推荐1】我国传统白酒酿造过程中糖化与发酵往往同时进行，随着发酵的进行发酵产物会使酒糟酸度不断降低，普通α-淀粉酶的活性也随之降低，导致淀粉水解不彻底。获得耐酸性α-淀粉酶成为生产的迫切需求，某科研团队欲对α-淀粉酶进行改造或获得高产耐酸性α-淀粉酶的酵母菌。回答下列问题：
(1)使用酵母菌作为菌种进行酒精发酵时，酸度不断降低的原因是________。
(2)某研究人员从芽孢杆菌中获得耐酸性α-淀粉酶基因通过基因工程技术获得产耐酸性α-淀粉酶的酵母菌，其流程如图所示：

①为让目的基因插入质粒，质粒DNA分子上应有_______。基因工程的核心步骤是_______（填图中字母）。
②过程c中欲检测耐酸性α-淀粉酶基因是否插入酵母菌的DNA上，可采用DNA分子杂交技术，即将转基因酵母菌的基因组DNA提取出来，以________作为探针，使探针与基因组DNA杂交。
(3)研究人员通过蛋白质工程也获得了耐酸性α-淀粉酶：
①基本操作流程是从耐酸性α-淀粉酶功能出发→_________（从下列操作或思路中选择正确的序号并排序）。
A．人工合成α-淀粉酶基因；
B．人工合成耐酸性α-淀粉酶基因；
C．推测耐酸性α-淀粉酶的氨基酸序列；
D．设计耐酸性α-淀粉酶的三维结构；
E．将获得的基因导入受体细胞生产耐酸性α-淀粉酶；
F．将获得的基因导入受体细胞生产α-淀粉酶；
②不同团队对α-淀粉酶进行了不同改造，实验后获得其中两种耐酸性α-淀粉酶，分别标号1、2；在一定条件下测定酶活性，结果如图所示。研究人员认为______更适宜工厂化生产，理由是________。

(4)根据以上信息，总结基因工程与蛋白质工程的区别与联系：___________。

【推荐2】如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线．请回答：

（1）天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有_____（填序号）。
①标记基因   ②多个限制酶切割位点     ③对受体细胞无害   ④启动子 ⑤起始密码子
（2）若对图1中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性将会_____。
（3）用图2中的人乳铁蛋白目的基因和图1所示的质粒构建重组质粒时，选用的限制酶是_____（从“EcoRⅠ”、“BamHⅠ/HindⅢ”、“SmaⅠ/HindⅢ”中选择），不能选择其他限制酶的理由分别是_____。
（4）图3中，①将重组质粒导入牛的________，导入方法是_____，为了获得雌性转基因牛，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_____。

【推荐3】普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞，培育出了抗软化、保鲜时间长的转基因番茄。图1为操作流程图，KmR为卡那霉素抗性基因PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ为四种限制酶切割位点，据图回答问题。

（1）本实验中的目的基因为_____________，使用___________技术获取大量的该基因。在构建重组质粒过程中，为了确保目的基因和质粒定向连接，需要使用的限制酶有____________。
（2）将获得的重组质粒利用__________导入到普通番茄细胞中，为筛选含有目的基因的番茄细胞，需要在培养基中加入___________。
（3）如果利用上述方法培育出的番茄不具抗软化性状，用____________作探针进行分子杂交技术检测，发现细胞内有目的基因存在，但检测不到mRNA1分子，可能原因是目的基因上游缺少______。
（4）根据图中转基因番茄细胞中的信息表达过程，分析转基因番茄抗软化的原理____。