【推荐1】阅读如下材料：
材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。
回答下列问题：
(1)材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用__________法。构建基因表达载体常用的工具酶有__________和__________。在培育转基因烟草时，若将外源基因转移到了烟草离体的幼嫩茎的韧皮部细胞，则由受体细胞发育成转基因植株需要经过__________和__________两个阶段。
(2)材料乙属于__________工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造制造一种__________的技术。在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的__________序列发生了改变。

【推荐2】叶绿体是植物基因工程的理想受体，将外源基因整合到叶绿体DNA中往往能够获得高效表达，由此发展出叶绿体基因工程。回答下列问题：
（1）叶绿体基因工程的核心是构建基因表达载体，表达载体中除目的基因外，还必须有启动子、终止子、复制原点、___________等，其中启动子的作用是_______________________。叶绿体DNA上的基因在结构和表达方式等方面有原核细胞基因的特性，若目的基因来源于真核生物，则往往选用目的蛋白对应的cDNA片段而不是基因组DNA片段作为目的基因，原因是_____________________________。
（2）将目的基因导入烟草细胞叶绿体时，要穿过多层生物膜，因而常将包裹在金属颗粒表面的表达载体轰击进入烟草细胞叶绿体，提高转化效率，该方法称为___________。
（3）转入叶绿体中的基因___________（填“会”或“不会”）随花粉传递给子代，理由是__________。

【推荐3】如图是利用基因工程方法培育抗虫棉的过程。请据图回答相关问题：

(1)从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具是_____________，此工具主要是从原核生物中分离纯化出来的，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的_____________。
(2)构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体。是因为Ti质粒上具有_____________，它能把目的基因整合到受体细胞的_____________上。
(3)E过程是利用_____________技术完成。要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做抗虫接种实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用____________方法进行检测。
(4)在转基因绵羊培育过程中，可利用_____________法将目的基因导入到该种生物的受精卵中。

【推荐1】布鲁菌病是一种由布鲁菌引起的人畜共患传染病。布鲁菌表面的脂多糖（LPS）能引起宿主产生明显的体液免疫反应。制备布鲁菌LPS单克隆抗体对于防治布鲁菌病具有重要意义。下列是获得LPS单克隆抗体的两种方法，回答下列相关问题：
(1)方法一：将LPS注射到小鼠体内，一段时间后，从免疫小鼠的脾脏中获取_____与骨髓瘤细胞进行诱导融合，以获得杂交瘤细胞。若采用化学方法进行诱导，将融合后的细胞在加入特殊物质的_____培养基中培养，只有杂交瘤细胞能够生长，杂交瘤细胞的特点是_____。
(2)方法二：从已免疫小鼠的B淋巴细胞内获取LPS抗体的_____，逆转录获取相应基因，利用PCR技术短时间内获取大量目的基因，该基因不包含基因中的启动子、终止子和内含子等片段，将该基因插入到质粒上的_____之间构建基因表达载体，利用显微注射技术将该目的基因导入骨髓瘤细胞，生产特异性单克隆抗体。
(3)欲检验获得的抗体效果，可将抗体注入_____的小鼠体内，观察小鼠的生活状态并采集血清，对各项指标进行检测。

【推荐2】不饱和脂肪酸具有重要的医疗价值和营养价值，但哺乳动物自身缺乏去饱和酶基因（Fat-1），因此自身所需的不饱和脂肪酸只能从食物中获取，下面是制备Fat-1转基因奶牛的技术路线：研究人员从线虫中筛选出Fat-1基因，进行相关优化处理后，构建成Fat-1基因表达载体，如图所示，接着将表达载体导入到奶牛的胚胎成纤维细胞，最后培育出转基因奶牛。请回答下列问题：
（1）Fat-1基因的优化：由于密码子具有______，而不同生物编码同一种氨基酸的密码子存在偏好性的差异，因此需要把从线虫中获取的Fat-1基因进行优化，把线虫的基因遗传编码方式改变为牛的编码方式以利于在受体细胞内进行表达。据此推测，优化后的Fat-1基因与优化前相比______

A．碱基序列有一定程度的改变
B．编码的氨基酸序列没有改变
C．编码的氨基酸序列往往变化
D．可提高该基因在牛细胞中翻译的效率
（2）构建Fat-1基因表达载体：在对优化后的Fat-1基因进行PCR扩增时，设计加入______酶切位点，便于构建如图所示的基因表达载体。若生产富含不饱和脂肪酸的牛奶，需要将Fat-1基因与______等调控元件重组在一起。
（3）转基因成纤维细胞的筛选与鉴定：将经过转化处理的成纤维细胞培养在含有______的选择培养液中培养，培养时需要定期更换培养液，原因是______。对能存活的细胞进行______检测，筛选出Fat-1基因成功整合到其基因组中的受体细胞。
（4）培育Fat-1转基因奶牛：请用上述筛选成功的转基因成纤维细胞为实验材料，简要写出培育Fat-1转基因奶牛的实验思路______________。

【推荐3】基因疫苗是指将编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划采用基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：
(1)基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括启动子、目的基因、________、 ________。启动子位于基因的_________，有了它才可以驱动基因转录。
(2)制备基因疫苗的基因可以从基因文库中获取，基因文库实际上是含有某种生物不同基因的许多DNA片段的____________群体。
(3)检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上的检测方法是_____。
(4)胚胎工程最后一道工序的实质是___________________________
(5)为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用____________________的桑椹胚或囊胚进行分割。

【推荐1】转基因技术的应用大大提高了动植物的品质，如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪培育示意图，

据图和材料回答下列问题：
（1）水母和猪的遗传物质都是DNA，水母的基因能通过质粒运输至猪的细胞中且能进行表达，说明水母和猪：①_____；②_____
（2）重组质粒除了目的基因外，还应有_____、_____、_____等结构。将重组质粒导入猪的成纤维细胞的方法是_____
（3）图中除了基因工程技术外，还应用了_____、_____等技术。
（4）为了使绿色荧光蛋白发出的绿光强度更大，某科研机构欲采用蛋白质工程技术实现这一目的，该工程技术的基本途径是：根据预期的蛋白质功能设计出蛋白质结构，推测其中的_____排列顺序，进而根据这一序列人工合成出_____。

【推荐2】（1）水稻为单子叶植物，我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

①获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性核酸内切酶作用于上图14中的_____（填“a”或“b”）处。
②将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有_____法和花粉管通道法。
③为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_____作探针进行分子杂交检测，又要用_____的方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
（2）下图为几种限制酶识别序列及其切割位点。

限制酶	Bam HⅠ	HindⅡ	Eco RⅠ	SmaⅠ
识别序列及切割位点	↓ GGATCC CCTAGG ↑	↓ AAGCTT TTCGAA ↑	↓ GAATTC CTTAAG ↑	↓ CCCGGG GGGCCC ↑

       
①重组质粒中抗生素抗性基因的作用是_____。
②将目的基因切下并构建重组质粒，选用的限制酶是_____，与使用一种酶切割相比，此法的优点在于_____。

【推荐3】科学家将某些诱导基因转入小鼠成纤维细胞中成功获取诱导性多能干细胞，这类细胞可用于一系列的研究，具体过程如图所示。回答下列问题。

（1）过程①需要借助_______________的运输作用将诱导基因导入受体细胞，从而得到诱导性多能干细胞。过程②的实质是______________________________。
（2）在体外培养诱导性多能干细胞时，通常将细胞置于含_______________的混合气体的培养箱中进行培养；另外，应定期更换培养液，以便清除细胞代谢产物，防止_______________。
（3）过程③如果采用化学试剂诱导细胞融合，则该化学试剂通常是_______________。由丙细胞获得丁细胞的过程中至少要进行两次筛选，对第一次筛选得到的细胞还需要进行_______________，最终筛选出的丁细胞是符合要求的细胞。
（4）过程④可将筛选到的丁细胞注射到小鼠的腹腔内增殖，最终可从_______________中提取单克隆抗体。与注射针对H₁N₁病毒的单克隆抗体相比，注射针对H₁N₁病毒的疫苗发挥疗效时间较晚，其原因是_________________________。

【推荐1】普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。


（1）图甲中，过程①需要的酶有_____。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以_____作为唯一碳。②、③过程需要重复几次，目的是 _____。
（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____；推测该同学接种时可能的操作失误是_____。
（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种_____菌的发酵罐需要先排气，其原因是_____。

【推荐2】如图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：

(1)图中采用的目的基因获取方法是_______技术，其中②过程需要________酶才能完成，该酶最主要的特点是___________________ 。
(2)在培养转基因绵羊的过程中常用的受体细胞是____________，目的基因导入的方法是____________。
(3)在抗虫棉的培育过程，其中④过程常用的方法是 ____________，要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上鉴定的具体方法是______________ 。

【推荐3】我国拥有自主知识产权的抗虫棉核心技术是将抗虫基因转入棉花用于生产。下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题：

(1)上图的重组质粒中除了含有抗虫基因和标记基因外，还有_____（至少填两个）等结构原件。
(2)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—GATC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切割位点是—GGATCC—，那么在①过程中，应分别选用限制酶_____（填“Ⅰ”、“Ⅱ”或“Ⅰ和Ⅱ”）切割质粒和抗虫基因，其原因是_____。
(3)②③过程提高了④过程的成功率。④过程成功的关键是由于农杆菌的Ti质粒上含有_____，能促使_____随之表达。
(4)⑤过程培养植株是否具有抗虫特性，最终的检验方法为_____。
(5)相较于普通棉花，抗虫棉的优点有_____（答出一点即可）。