【推荐3】TALEN技术是一种靶向基因敲除技术，使用的基因敲除工具TALEN由人造TALE蛋白和FokⅠ(核酸内切酶)等组成。图1是TALE蛋白中的二联氨基酸(如NI、NG、NN、HD等，其中字母N、I、G、H、D分别代表一种氨基酸)与恒定识别DNA的四种碱基之间的对应关系，图2是TALEN技术的基本原理示意图，其中FokⅠ形成二聚体后才能切断DNA，导致DNA双链断裂，使基因被敲除。基因敲除基本步骤如下：

步骤1   TALE靶点识别模块构建   TALE的核酸识别单元中二联氨基酸NI识别A，NG识别T，HD识别C，NN识别G。因此设计相应TALE单元串联，使TALEN特异识别某靶点基因。
步骤2 获得完整的TALEN   将构建好的一对TALE靶点识别模块融合其他必要的序列，并与质粒构建基因表达载体(TALEN质粒对)。
步骤3 将TALEN质粒对转入细胞中实现目标基因敲除   将TALEN质粒对转入细胞后，其表达的蛋白可分别找到其DNA上的靶位点并与靶位点特异结合。FokI形成二聚体，发挥内切酶活性，于两个靶位点之间打断目标基因，诱发 DNA 损伤修复机制。由于在此修复过程中总是有一定的错误率存在，在修复中发生错误的个体即形成目标基因敲除突变体。
请回答：
（1）步骤1中，欲使TALEN特异识别靶点基因，需根据____构建一对TALE靶点识别模块。若图2中左侧TALE蛋白识别的基因部分序列为-GTC-，则对应的二联氨基酸序列应为____。
（2）步骤2中需要____的催化，要获得完整的TALEN，构建的基因表达载体中还需要融合____序列。
（3）步骤3中FokI二聚体作用的化学键是____。步骤3完成后可能获得多种DNA，可利用限制酶对相邻靶位点之间的相应片段进行切割，再根据切割后形成的DNA分子大小，运用____(技术)分离筛选出发生目标基因敲除的突变个体。
（4）科研人员使用TALEN技术对水稻光周期敏感蛋白基因P进行靶向敲除，以获得长日照条件下纯合光敏雄性不育新品种。已知水稻光周期敏感蛋白基因P只在花粉细胞中表达，使其能够合成淀粉。不含光周期敏感蛋白的水稻在长日照条件下表现为雄性不育，短日照条件下均为雄性可育。
①将TALEN技术处理得到的亲本水稻植株，种植在____日照条件下自交获得F₁。
②若要鉴定F₁是否为纯合光敏雄性不育新品种，可将F₁植株种植在____日照条件下，然后____，若未出现蓝色，则该植株为所需新品种。

【推荐1】2019年通过DNA编码单克隆抗体技术来预防寨卡病毒的首项人体研究项目启动。该技术将优化后的质粒直接输送到细胞中，然后局部转染，细胞会产生单克隆抗体，使入体细胞成为制造治疗性抗体的“工厂”。请回答下列问题：

(1)制备预防寨卡病毒感染的DNA药物时，从_________细胞中获得相应的mRNA，反转录产生目的基因，不能将目的基因直接导入受体细胞的原因是__________。
(2)过程②叫_________。驱动目的基因转录出mRNA的是质粒上的_________。DNA编码单克隆抗体预防寨卡病毒的技术中使用的载体除质粒外，还可以是_________。
(3)传统单克隆抗体的生产需将免疫小鼠的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，再用_________进行筛选，得到杂交瘤细胞，然后进行_________和抗体检测，最终得到单克隆抗体。与传统单克隆抗体相比，DNA编码单克隆抗体技术的优点有_________（写出一项即可）。

【推荐2】CRISPR/Cas9系统基因编辑技术是近年来颇受关注的一项新技术。该基因表达系统主要包含引导RNA和Cas9蛋白两个部分，引导RNA能识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白结合到相应位置并剪切DNA，最终实现对靶基因序列的编辑。研究人员试图用CRISPR/Cas9系统对水稻产量基因Q基因进行编辑，请回答下列问题：
(1)研究发现，CRISPR/Cas9仅存在于原核生物，故需借助____________技术才能在水稻细胞中发挥作用。Cas9蛋白与_____________酶的功能相似。
(2)首先依据___________的部分序列设计DNA片段A（负责编码相应引导RNA），再将片段A与含有Cas9基因的质粒B连接，以构建编辑水稻Q基因的CRISPR/Cas9系统基因表达载体（如图所示）。位点Ⅰ、位点Ⅱ分别表示_____________酶切位点。

(3)常用农杆菌转化法将目的基因导入水稻受体细胞，依据农杆菌的侵染特点，目的基因将插入到Ti质粒的_______上，经过转化作用，进入水稻细胞，并将其插入到____________，从而使其得以维持稳定和表达。
(4)质粒B大小为2．5kb（位点Ⅰ与位点Ⅱ相隔60b），经酶切后的片段A大小为0．5kb（千碱基对），连接形成的表达载体大小为___________kb。（1kb=1000b）
(5)CRISRP/Cas9基因编辑技术有时存在编辑对象出错而造成脱靶，试从引导RNA的角度分析脱靶的原因： 其他DNA序列也含有___________。

【推荐3】生长激素制剂是治疗侏儒症的特效药。利用基因工程让大肠杆菌合成人类的生长激素，部分流程如图所示（注：Amp^r为氨苄青霉素抗性基因，Tet^r为四环素抗性基因，Ori是复制原点；EcoRⅠ、BglⅡ、ClaⅠ表示限制酶）。回答下列问题。

（1）EcoRⅠ识别的碱基序列是GAATTC，该序列中有____________个嘌呤。切割图中的目的基因时不能选择EcoRⅠ，理由是____________。
（2）将重组质粒导入大肠杆菌时，常选用____________处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。该状态的细胞具有____________的特性。
（3）利用标记基因筛选含重组质粒的大肠杆菌时，所用培养基中需添加____________（填“氨苄青霉素”或“四环素”），理由是____________。该基因工程所用的大肠杆菌细胞内本身不能携带____________基因，否则筛选出的大肠杆菌细胞内不一定有目的基因。