用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，灵敏度很高，在妊娠第8天就可以做出诊断，下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图（HCG：人绒毛膜促性腺激素）。
（1）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于___________ ，它能使小鼠产生___________ 细胞，此过程属于特异性免疫中的体液免疫。
（2）B细胞DNA合成途径有两条，途径①：由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为DNA分子的合成提供原料（此途径可被氨基蝶呤阻断）；途径②：利用次黄嘌呤和鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，为DNA分子合成提供原料。骨髓瘤细胞DNA合成只有途径①。HAT培养基是指在普通动物细胞培养液中加入次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶脱氧核苷三种物质的液体培养基。
据此推测：若用A表示骨髓瘤细胞，B表示效应B细胞，加促融剂后，试管中的细胞类型有___________ （用字母表示，不考虑三个及以上细胞融合类型）。在HAT培养液中，______________________ 类型细胞DNA 合成途径①被氨基蝶呤阻断，虽然途径②正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10天左右会死亡。___________ 类型细胞本身缺少DNA合成途径②，其途径①被___________ 阻断，所以不能增殖很快死亡。只有AB杂交瘤细胞能在HAT培养基中存活下来，原因是______________________ 。
（1）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于
（2）B细胞DNA合成途径有两条，途径①：由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为DNA分子的合成提供原料（此途径可被氨基蝶呤阻断）；途径②：利用次黄嘌呤和鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，为DNA分子合成提供原料。骨髓瘤细胞DNA合成只有途径①。HAT培养基是指在普通动物细胞培养液中加入次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶脱氧核苷三种物质的液体培养基。
据此推测：若用A表示骨髓瘤细胞，B表示效应B细胞，加促融剂后，试管中的细胞类型有
更新时间：2018-06-12 06:40:26
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【知识点】 动物细胞融合与单克隆抗体的制备解读
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解题方法
【推荐1】宫颈癌严重威胁女性健康，主要是由高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染所致，目前可通过接种HPV疫苗进行有效预防。2023年11月起，内蒙古自治区统一在“蒙速办”平台开放线上预约活动。L1蛋白是HPV的一种衣壳蛋白，E6蛋白仅存在于被HPV感染后癌变的肿瘤细胞中。根据所学知识，回答下列问题：
(1)若向小鼠体内反复注射L1蛋白，可从小鼠的血清中分离出L1蛋白抗体，但该方法的缺点是___ 。（写出三点）
(2)若要利用动物细胞融合技术制备抗L1蛋白单克隆抗体，可向小鼠反复注射L1蛋白获取B淋巴细胞，对B淋巴细胞和骨髓瘤细胞用_________ 方法（写出一种方法即可）诱导融合，再用________________ 进行筛选，得到杂交瘤细胞后，还需进行_________ ，经多次筛选，就可获得能分泌抗L1蛋白的细胞。
(3)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体，理由是__________ 。
(1)若向小鼠体内反复注射L1蛋白，可从小鼠的血清中分离出L1蛋白抗体，但该方法的缺点是
(2)若要利用动物细胞融合技术制备抗L1蛋白单克隆抗体，可向小鼠反复注射L1蛋白获取B淋巴细胞，对B淋巴细胞和骨髓瘤细胞用
(3)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体，理由是
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【推荐2】2023年1月，两北农林科技大学某团队利用核移植技术培育了一批克隆高产长寿奶牛，现在“克隆”一词的含义范围较大，包括不同系统层次的“复制”，例如个体水平、细胞水平、分子水平的克隆．请回答下列问题：
(1)高产长寿奶牛个体的克隆成功，说明动物的____________ 具有全能性，核移植过程中，从牛的卵巢采集的卵母细胞需在体外培养到____________ 期。为提高重构胚的利用率，可采用___________ 技术，该技术可以看作动物克隆的方法之一。若以保存的良种囊胚和相应数量的非繁殖期受体雌性奶牛为材料进行操作，以获得更多的高产长寿奶牛，该过程主要的操作步骤是___________ 。
(2)个体水平的克隆广义上还包括植物组织培养技术和微生物的繁殖等，将外植体培养得到完整植株时，植物激素中___________ 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向，分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是___________ 。
(3)单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和_____________ ，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4)分子水平的克隆如基因的克隆可采用PCR技术，PCR的产物常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与___________ 等有关（至少答出两点）
(1)高产长寿奶牛个体的克隆成功，说明动物的
(2)个体水平的克隆广义上还包括植物组织培养技术和微生物的繁殖等，将外植体培养得到完整植株时，植物激素中
(3)单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和
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名校
【推荐3】Graves病（GD）可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间黏附分子1（ICAM—1），导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM—1作为抗原间隔多次免疫小鼠，取小鼠的脾脏细胞制成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到杂交瘤细胞，筛选原理如下：
核酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径（如图）。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选出特定的杂交瘤细胞。融合前将骨髓瘤细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中_____ （填“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是可以通过_____ （全合成途径/补救合成途径）合成DNA。
(2)将上述杂交瘤细胞进行_____ 和抗体检测，从中选择抗体检测呈_____ 的杂交瘤细胞，将其植入小鼠腹腔中进行培养，一段时间后从_____ （小鼠腹水/小鼠血清）中提取实验用抗体，也可以将其进行体外培养，从_____ （培养液/细胞体）中获取抗体。
(3)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。
(1)用ICAM—1作为抗原间隔多次免疫小鼠，取小鼠的脾脏细胞制成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到杂交瘤细胞，筛选原理如下：
核酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径（如图）。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选出特定的杂交瘤细胞。融合前将骨髓瘤细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中
(2)将上述杂交瘤细胞进行
(3)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。
| 对照组（A） | 131I治疗组（B） | 单克隆抗体治疗组（C） |
| 给GD模型小鼠腹腔注射0．1mL无菌生理盐水 | 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0．1mL无菌生理盐水的131I | 给GD模型小鼠腹腔注射 |
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