【推荐1】2006 年，科学家利用病毒载体将四个转录因子(Oct4、Sox2、Klf4 和 c-Myc)的组合转入分化的体细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎干细胞的一种细胞类型，称为诱导性多能干细胞(iPS 细胞)。2007 年 11 月，由中国科学家俞君英领衔的 Thompson 实验室报道，利用 iPS 技术同样可以诱导人皮肤纤维母细胞成为几乎与胚胎干细胞完全一样的多能干细胞。从 ES 细胞到 iPS 细胞，为早期胚胎发育的基础研究提供了一种新的体外研究系统，有助于我们了解早期胚胎发育和疾病发生之间的关系，以及研究和治疗出生缺陷和各种发育疾病，也使个体化器官再生最终有可能成为现实。下图 1 表示的是我国科学家获得 iPS 细胞，再将 iPS 细胞转入小鼠乙体内培养的过程，图 2 表示研究人员利用小鼠(2N=40)获取单倍体胚胎干细胞的一种方法。请回答下列问题：

(1)图 1 过程中，小鼠的成纤维细胞转变为 iPS 细胞，类似于植物组织培养中的______ 过程。
(2)研究人员发现，将 iPS 细胞团注射到缺乏 T 细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长。由此可推测图 1 中 iPS 细胞团逐渐退化的原因可能是小鼠乙发生______反应，使得 iPS 细胞团失去生命力。
(3)图 2 中，研究人员给小鼠丙注射了促性腺激素，目的是使其______，再利用 SrCl2溶液处理、激活卵母细胞，并体外培养至_______（填图 2 中的序号及名称），再筛选出________。
(4)研究发现，单倍体胚胎干细胞有发育全能性，其分化过程从分子水平上看是_______的结果。该技术培育的单倍体动物可成为研究_______（填“显性基因”或“隐性基因”）功能的理想细胞模型。为提高胚胎的利用率，可以采用_______技术，选用发育良好、形态正常的_______阶段的胚胎进行操作，在操作时应注意______，以保证胚胎的成活率。胚胎工程最后一道工序的实质是________。
(5)结合文中信息，下列可以应用 iPS 细胞实现的有         。

A．利用 iPS 细胞研究完整的哺乳动物胚胎体外发育过程

B．利用 iPS 细胞分化获得神经元，用于治疗阿尔茨海默病

C．诱导人的 iPS 细胞形成原肠胚并植入子宫，使其进一步发育成新个体

D．利用 iPS 细胞诱导形成疾病模型细胞，对药物的安全性和有效性进行检测

【推荐2】图甲为人体的部分细胞分化示意图，图乙为细胞内蛋白质合成与转运的示意图。

(1)图甲中细胞全能性最高的是_____（填字母）细胞，骨髓移植实质上是将图甲中的_____（填字母）细胞移植到患者体内。结构①③④都具有的化学成分是_____。
(2)图甲中来源于 a 的 bcde 细胞之间形态结构功能出现稳定性差异的根本原因是_____。
(3)流感病毒可以通过其表面蛋白 HA 与肺泡细胞膜上的_____特异性结合，随后启动包膜与细胞膜的融合，病毒进入细胞内部。这一过程体现了生物膜的_____性。

【推荐3】图1表示人体内某些淋巴细胞的分化过程，X表示抗原，数字表示免疫过程，m、n代表相关免疫器官，其余字母表示细胞或物质。图2表示将抗原注射到兔体内后抗体产生量的变化。请分析回答下列问题。

(1)在图1中，n表示的场所是_____，属于免疫活性物质的有_____。（填字母）
(2)在图1中，②和③表示受抗原刺激a、c细胞后进行的一系列的增殖分化过程，形成e、d、k细胞功能不同的根本原因是_____。
(3)在图2中，当注入抗原X，抗体产生量的变化是曲线A．若在第8天同时注射抗原Y和X，其中表示抗原X刺激机体产生的抗体数量的曲线是_____。判定的依据是在第8天注射抗原X时刺激了图1中_____（填字母）迅速增殖分化，快速产生大量抗体。
(4)为验证T细胞是细胞免疫过程中的细胞，通过是否切除图1中_____（填字母）器官来控制自变量，通过器官移植观察有无排斥反应来断定细胞免疫是否发生作用。如果实验分为对照组和实验组，理论上器官移植在_____组动物体内能完好保存，当我们再次输入_____后结果就与对照组一样。

【推荐1】在天宫二号上进行的拟南芥培育实验中，为监控植物的开花过程，科研人员给拟南芥安装了“追踪器”，即利用控制植物开花基因相同的“启动子”（启动子是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列，决定基因的转录与否）带动绿色荧光蛋白（GFP）基因在微重力条件下表达并获得实时荧光图像。转基因拟南芥植物在构建过程中首先需分别构建植株A和植株B，安装“追踪器”和构建植株A过程如图1所示。

1．据图1分析，图中步骤①进行的切割，选择的限制酶是           。

A．EcoRⅠ酶	B．HindⅢ酶
C．EcoRⅠ酶和HindⅢ酶	D．HindⅢ酶和BamHⅠ酶

2．获得转基因拟南芥植株A的基因工程目的基因是___________；受体细胞是___________。基因工程步骤④是___________。
3．在步骤⑤中，让含重组Ti质粒1的农杆菌侵入拟南芥愈伤组织而非拟南芥叶肉细胞的主要原因是______________________；步骤⑥主要运用的技术是____________。
科研人员进一步构建植株B，构建过程如图2所示，图2中启动子序列与图1中相同。

4．已知步骤⑤为农杆菌转化法。因为Ti质粒既有在细菌中表达的基因，同时又有在高等植物中表达的基因，所以需要将重组质粒2与Ti质粒重组后，再导入受体细胞。下列关于所选Ti质粒的说法正确的是                                    

A．Ti质粒本身应具有绿色荧光蛋白基因

B．Ti质粒本身应具有植物开花基因

C．Ti质粒为双链闭环DNA分子

D．Ti质粒的受体细胞应为农杆菌细胞

5．科研人员对重组质粒2直接进行基因测序，以筛选获得重组质粒2。除此方法外，利用图2所给信息，试举出其他筛选重组质粒2的方法。____________________________________。
6．科研人员成功获得植株A和植株B后，如何获得纯合转基因拟南芥植株?纯合转基因拟南芥植株有何优点?________________________________________________。

【推荐2】紫杉醇（C₄₇H₅₁O₁₄N）是一种具有抗癌活性的二萜类生物碱类化合物，是存在于珍稀植物红豆杉体内的一种次生代谢物，最早从其树皮中提取。
(1)次生代谢物在植物体中含量很低，是植物生命活动___（必需/非必需）的产物。利用植物细胞培养生产紫杉醇时外植体通常选择幼嫩的茎段而非树皮，理由是___，其生产过程___（体现/未体现）细胞的全能性。与从天然红豆杉植株中提取相比，该技术的意义是___。
(2)过去普遍认为紫杉醇通过抑制有丝分裂来发挥抗癌作用。用标准剂量紫杉醇治疗后对患者的乳腺癌细胞进行研究，结果如图。以上实验结果___（是/否）患者编号支持传统认知的紫杉醇抗癌机理，请说明理由___。

注：有丝分裂指数代表细胞增殖的活跃程度
(3)新的研究发现只有染色体不稳定性（CIN）水平高的乳腺癌患者才对紫杉醇敏感，推测紫杉醇可能通过提高这类患者体内含多极纺锤体癌细胞的比例诱导癌细胞死亡。选择一种药物，结合必需的实验材料和试剂，补充实验进行验证。
药物a：能提高CIN水平，且抑制有丝分裂
药物b：能提高CIN水平，但不能抑制有丝分裂
药物c：不能提高CIN水平，但能抑制有丝分裂
将CIN水平低的乳腺癌细胞分两组，___，培养一段时间，结果显示实验组多极纺锤体癌细胞比例、癌细胞死亡率均高于对照组。

【推荐3】赏植物蝴蝶兰可通过改变CO₂吸收方式以适应环境变化。长期干旱条件下，蝴蝶兰在夜间吸收CO₂并贮存在细胞中。

（1）依图9分析，长期干旱条件下的蝴蝶兰在0～4时___（填“有”或“无”）ATP和[H]的合成，原因是______；此时段_______（填“有”或“无”）光合作用的暗反应发生，原因是________；10～16时无明显CO₂吸收的直接原因是___________。
（2）从图10可知，栽培蝴蝶兰应避免____，以利于其较快生长。此外，由于蝴蝶兰属阴生植物，栽培时还需适当_______，此时，蝴蝶兰光合作用吸收二氧化碳的曲线是图9 中的哪一条？_________
（3）蝴蝶兰的种苗可利用植物细胞的______，其原理是____________，通过植物组织培养技术大规模生产，此过程中细胞分化的根本原因是________。

【推荐1】研究人员利用小鼠（2N=40）的单倍体ES细胞（只含一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示：

注：I、II、III、IV代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置；Amp ^r是氨苄青霉素抗性基因，Neo ^r是G418抗性基因。
（1）重组质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因，其作用是____________________。氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo ^r的小鼠细胞，结合上图推测，过程①选用的两种限制酶是__________（选填图中的编号），图中③处的培养液应添加__________（填“氨苄青霉素”或“G418”）。
（2）若图中过程①选用的两种限制酶识别序列和切割位置分别是 和，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是_____________．
（3）据图分析，细胞乙内除线粒体DNA外，还有________个DNA分子；细胞乙发育成桑椹胚的过程中细胞分裂方式是__________，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为__________技术。

【推荐2】CRISPRCas9基因编辑技术荣获2020年度诺贝尔化学奖，其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（如图所示）。请回答下列问题：

（1）Cas9蛋白借助向导RNA对目标DNA分子进行精准定位，依赖于_____；对目标位点进行准确切割，依赖于_____。在使用Cas9蛋白对不同目标DNA进行编辑时，应使用Cas9蛋白和_____（填“相同”或“不同”）的向导RNA进行基因编辑。
（2）在设计向导RNA识别序列时，若目标DNA的a链切点附近序列为…TCCAGAATC…则向导RNA上识别序列为_____，向导RNA双链区和识别序列的杂合区，二者相同的碱基配对方式有_____。
（3）CRISPR/Cas9基因编辑技术具有广泛的应用，如_____（答出1点即可）。

【推荐3】利用转基因技术研究小鼠PON蛋白在修复小鼠受损神经中的作用机制，研究主要经过以下阶段
Ⅰ．使用运载体1与小鼠OPN基因构建重组DNA分子（如图）并导入大肠杆菌中进行大量复制
Ⅱ．再利用EcoRⅠ和BamHⅠ酶从重组DNA分子中切取目的基因，将目的基因与经EcoRⅠ和BamHⅠ酶切割的运载体2连接
Ⅲ．连接形成的重组DNA分子2导入小鼠受损细胞并表达，以检测OPN蛋白的作用

1．已知OPN是编码294个氨基酸长度的DNA片段，则其长度为_________个碱基对EcoRⅠ酶识别序列可在重组DNA分子1到4上的_____________________
2．阶段1是为了得到大量的目的基因，为此所选择的运载体1最好是（       ）

A．随大肠杆菌拟核DNA同步复制的单链线状DNA

B．随大肠杆菌拟核DNA同步复制的双链线状DNA

C．独立于大肠杆菌拟核DNA能多次自主复制的双链环状DNA

D．独立于目的基因整合到大肠杆菌拟核DNA上的双链环状DNA

3．从Ⅰ～Ⅲ阶段，至少需要筛选_________次，发生在Ⅰ～Ⅲ过程中的_____________。
4．筛选所得到的受体细胞中必须含有（       ）

A．运载体	B．含OPN基因的重组DNA分子
C．游离的OPN基因	D．游离的EcoRⅠ酶的识别序列

5．根据实验目的，阐述没有选用大肠杆菌表达OPN蛋白的两个原因___________________。

【推荐1】胚胎工程技术包含的内容很丰富。下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是本地黄牛。请据图回答下列问题：

（1）应用1与应用2的培育过程相比较，在应用1过程中特有的技术手段是____________，应用2的繁殖方式是____________。若要获得大量的试管牛，可于早期胚胎的____________时期进行分割后移植。
（2）细胞B主要提供重组细胞的____________部分，细胞A离体培养过程中必须保证无菌无毒的环境，其中无菌的措施有__________________________。
（3）供体1经过____________激素处理，可以排出更多的卵细胞；细胞D的名称是____________。
（4）将各种方式产生的胚胎移植到受体的小牛中，充分体现出这种操作技术的优势在于____________。

【推荐2】应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品，是生物科学技术转化为生产力的重要体现。请回答下列有关问题：
（1）基因工程中将目的基因导入双子叶植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，该方法是将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的___________上，其作用是将目的基因___________，使之遗传特性得以稳定维持和表达。对于转基因动物来说，一般将目的基因注入受精卵的原因是___________。
（2）动物细胞培养过程中，培养环境中除需提供CO₂外还需混入一定量的O₂，O₂的主要作用是______。为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，应定期______防止代谢产物积累对细胞自身造成伤害。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，原因是______________。
（3）目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，原因是动物细胞的全能性会随着_________而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。哺乳动物核移植技术可以分为______和________。
（4）胚胎工程是指对动物 ____________所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割等技术。

【推荐3】利用生物工程技术，可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子IV，用于血友病的治疗。请回答下列问题：
（1）根据凝血因子IV基因上游和下游的碱基序列，可用 ___技术获取并扩增基因。构建该基因表达载体时，所用到的工具酶是__，该基因表达载体中，凝血因子Ⅳ基因的上游和下游分别__。
（2）将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是___。受体细胞选用受精卵的优点是细胞大易操作、营养物质含量高和___。
（3）在体外胚胎培养时，应选用囊胚的 ___进行DNA分析，用于选择雌性胚胎。此期的胚胎也适于胚胎分割移植，此技术的优点是_____。
（4）人凝血因子IV是一种胞外酶，该蛋白的加工是在___等细胞器上进行的。人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因是___________________。