【推荐2】I．人的T细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质（Y），该蛋白质由一条多肽链组成。目前可以利用现代生物技术生产Y。回答下列问题。
(1)若要获得Y的基因，可从人的T细胞中提取_______作为模板，在_______催化下合成cDNA，再利用_______技术在体外扩增获得大量Y的基因。
(2)将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。若将上述所得Y的基因插入农杆菌Ti质粒上的______________中，得到含目的基因的重组Ti质粒，则可用农杆菌转化法将该基因导入某种植物的叶肉细胞中。若该叶肉细胞经培养、筛选等得到了能稳定表达Y的愈伤组织，则说明Y的基因已经______________。
(3)天然的Y通常需要在低温条件下保存。假设将Y的第6位氨基酸甲改变为氨基酸乙可提高其热稳定性，若要根据蛋白质工程的原理对Y进行改造以提高其热稳定性，具体思路是______________。
Ⅱ．根据所学知识回答问题：
(4)药用植物——川芎易受病毒侵染造成大幅度减产，日本学者用川芎的_______作为外植体进行脱毒培养，培养基一般含有水分、无机盐、_______、氮源、维生素等。
(5)植物组织培养的主要原理是植物细胞具有_______。科研人员利用植物的_______作为外植体培养出单倍体植株，具体过程是在_______和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过_______产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
(6)在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到_______阶段时，将胚胎移人受体（代孕）动物体内。

【推荐3】单克隆抗体的制备过程如图所示：
   
(1)植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备，都应用了细胞融合技术，在诱导动物细胞融合时，特有的融合方法是_____。细胞融合的原理是_____。
(2)融合后的细胞，仅由2个细胞互相融合的类型有_____种，其中符合要求的细胞是_____，其特点为_____。
(3)向动物体内反复注射某种抗原，并从动物血清中分离出抗体，这种抗体与单克隆抗体相比，存在的缺点是_____（写2种）。由单克隆抗体研制成的“生物导弹”由两部分构成，其中一部分被称为“瞄准装置”，它作用的原理是_____，其特点为_____。

【推荐1】自1996年世界上第一只体细胞克隆羊多莉诞生以来，人类已经成功克隆了马、牛和猪等大型家畜，但体细胞克隆灵长类动物一直没有取得进展，究其原因主要是灵长类动物的卵细胞极为敏感，极轻微挤压都可能导致异常分裂，且细胞核移植到去核卵细胞后不能完全恢复到分化前的功能状态，导致胚胎发育率低。2017年，我国科 学家利用“聪明的化学方法和操作技巧”成功培育出了体细胞克隆猴“中中”和“华华”， 该成果一经公布轰动了全世界。下图所示为克隆猴的培育过程。

(1)动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是______。
(2)我国科学家经过多年的反复试验，可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内完成核移植，操作迅速使卵细胞受损极小，在技巧上保证了实验的成功。实际操作中，去核是指去除______；去核前应保证采集的卵母细胞在体外培养至______期；核移植时将供体细胞注入_____，通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚；
(3)“聪明的化学方法”也是保证实验成功的条件。我国科学家将组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理重构胚，提高了胚胎的发育率和妊娠率。Kdm4d和TSA的作用机理分别是_____、_____，从而改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达。Kdm4d和TSA处理前后基因的碱基序列______（填“会”或“不会”）发生改变。
(4)除操作技巧和化学方法的运用外，克隆猴的成功也得益于每一步严谨科学的实验操作。体外培养重构胚时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入______等一些天然成分，将其置于含有______混合气体的CO₂培养箱中培养。胚胎移植前还需对代孕母猴进行______处理，以保证胚胎能够继续发育。

【推荐2】以我国科学家为主的科研团队将OSNL（即4个基因Oct4／Sox2／Nanog／Lin28A的缩写）导入黑羽鸡胚成纤维细胞（CEFs），诱导其重编程为诱导多能干细胞（iPS），再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞（iPGCs），然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中，最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代，实验流程如图。回答下列问题。

(1)CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的，为了获得单细胞悬液，鸡胚组织剪碎后需用___________________________处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加______________等天然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。
(2)体外获取OSNL的方法有______________（答出1种即可）。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白，需构建基因表达载体，载体中除含有目的基因和标记基因外，还须有启动子和______________等。启动子是______________识别和结合的部位，有了它才能驱动____________________________。
(3)iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是______________。
(4)诱导iPS细胞的技术与体细胞核移植技术的主要区别是__________。
(5)该实验流程中用到的生物技术有________________（答出2点即可）。

【推荐3】长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：
      
(1)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②精卵识别；③精子头部进入；④雌、雄原核的形成；⑤核膜消失，雌、雄原核融合。其正确的顺序为_________（填序号）。
(2)供体胚胎能在受体子宫存活的生理学基础是________。
(3)从A到E中，适宜于牛的胚胎分割时期有_________；图中标号3为_________，它将来可发育为胎膜和胎盘。
(4)动物的早期胚胎移植到同种且_________与供体相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。对受体母牛同期发情处理，一般用激素_________。
(5)试管牛E的性别为_________。克隆羊多利的遗传物质来自于_________，ⓑ过程的实质是_________。

【推荐1】2018年，中国科学家成功培育全球首例体细胞克隆猴“中中”和“华华”，体细胞克隆猴的培育过程如下图所示。

   

(1)克隆猴培育过程与克隆高产奶牛过程类似，用到了_____、_____以及动物细胞核移植技术。体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植技术，原因是体细胞_____程度高，很难表现出全能性。
(2)上述实验核移植的受体一般选用供体猴减数第_____次分裂中期的_____细胞，原因是细胞体积大、易操作、营养物质丰富且含有促进_____表达的物质。
(3)目前核移植技术中普遍使用的去核方法为_____去核法。
(4)克隆猴的成功为阿尔茨海默症等脑疾病以及免疫缺陷、肿瘤等疾病机理研究、干预、诊治带来前所未有的光明前景。与以往用普通猴子做实验相比，克隆猴作为实验动物模型的优势是：_____。（写出1条）

【推荐2】如图是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a﹣h为操作过程，回答有关问题：

（1）图中A牛和B牛的性别_______（相同/不同/不一定相同）。
（2）C过程一般是将发育到_____（阶段）的早期胚胎进行处理，再植入到受体内。操作过程中应注意将③____________均等分割，以免影响胚胎的恢复和进一步发育，该技术的意义在于______________________。
（3）用于移植的胚胎除了图中所示的途径外，还可以来自__________；胚胎移植能否成功依赖于一定的生理学基础，____________________________为胚胎的收集提供了可能。
（4）图中C牛的培育过程属于_____生殖，D牛的培育过程属于____生殖。（有性或无性）

【推荐3】人的血清白蛋白在临床上需求量很大，利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的血清白蛋白。回答问题：
（1）在培育转基因奶牛时，血清白蛋白基因应与多种调控组建重组在一起，其中_______应连接在目的基因首端。通过______________技术将其导入奶牛的受精卵中。
（2）导入目的基因的受精卵需培养到__________________阶段才可进行胚胎移植。暂不移入的早期胚胎可使用______________方法保存。
（3）进行胚胎移植前需要进行_________，目前最有效最准确的方法是SRY — PCR法，操作的基本程序是:从被检测的囊胚中取出几个_________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，若未出现杂交链，则胚胎性别为____________，而基因工程中的______________步骤也会用到DNA探针。

【推荐1】如图表示利用胚胎干细胞（ES细胞）所作的一系列研究，请据图分析回答。

（1）图中的胚胎干细胞（ES细胞）可以从早期胚胎和_____________中分离获取。
（2）过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞_____________的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞分裂、增殖所需的_____________。
（3）过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有_____________的特点。
（4）过程Ⅲ是培育转基因小鼠，将获得的目的基因导入胚胎干细胞之前需构建基因表达载体，目的是_____________________________________。
（5）过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须去除小鼠的胸腺，使其存在免疫缺陷，其目的是__________，该过程研究的意义在于解决____________________问题。
（6）该研究中，包含的生物技术有________________________（至少写出两种）。

【推荐2】长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。请据图完成下列问题：

(1)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②精卵识别；③精子头部进入；④雌、雄原核的形成；⑤核膜消失，雌、雄原核融合。其正确的顺序为_________________（填序号）。
(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_________________；冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的__________________冲洗出来。
(3)图中E处于_______________时期；图中标号1为______________，它将来可发育为_________________。
(4)动物的早期胚胎移植到同种且_________________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜_________________。
(5)试管牛E的性别为_________________。克隆羊多利的遗传物质来自于__________________，性状和__________________最接近。
(6)从哺乳动物2-8细胞期胚胎分离出来的细胞，称为ES或EK细胞，这类细胞的特点是_________________。

【推荐3】美国怀俄明大学分子生物学家兰迪·刘易斯创造出一种特殊的“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白。蛛丝蛋白可用于研制人造韧带、肌腱和防弹衣，有“神奇之丝”之称。回答下列问题：
(1)ES细胞通常作为目的基因的受体细胞，ES细胞是指由_______中分离出来的一类细胞；ES细胞具有胚胎细胞的特性，ES细胞在形态上具有的特点是_______。
(2)科学家为保证羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，可以用_______技术来检测蛛丝蛋白基因是否整合到了染色体上；在体外培养重组细胞时，需要满足的条件有_______。
(3)胚胎移植能否成功与供体和受体的生理状况密切相关，胚胎移植的生理基础有_______（答出2点即可）。