【推荐1】如图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图。复制原点是质粒能正常复制的必需组成。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0．7Kb）、PvuⅠ（0．8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度。请据图回答：

(1)质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是__________
(2)将图中的目的基因与质粒B进行重组，需要用到的是____酶。如果是两两重组，可能有___ 种长度的重组结果。
(3)基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤。现运用EcoRⅠ酶切质粒，完全酶切后进行电泳观察，若出现长度为1．1kb和5．6kb，或者 ___和____的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。
(4)若选择自身不含lacZ基因并对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，则在筛选导入成功的受体细胞时应如何操作？
(5)下列关于质粒运载体的说法正确的是      

A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解

B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞

C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的

D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则

E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达

F．没有限制酶就无法使用质粒运载体

【推荐1】2015年2月3日，英国议会下院投票通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。“三亲婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。请回答下列问题：

（1）过程①采用的是细胞工程中的____________技术。图中“三亲婴儿”的染色体来自________和父亲提供的细胞核。
（2）进行过程②中防止多精入卵的屏障有______________和卵细胞膜反应。
（3）过程③采用的是胚胎工程中的_____________技术，该过程所用培养液的成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及______________等物质。

【推荐2】亨廷顿舞蹈症（HD）患者是由于编码亨廷顿蛋白的基因（H基因）序列中的三个核苷酸（CAG）发生多次重复所致。
(1)某HD家系图（图1）及每个个体CAG 重复序列扩增后，电泳结果如图2。

①仅据图1判断 HD不可能是_____遗传病。
②结合图1和图2推测，当个体的所有H基因中 CAG 重复次数_____25次时才可能不患病。与Ⅰ-1比较，Ⅱ-1 并未患病，推测该病会伴随_____呈渐进性发病。
③与Ⅰ-1比较，Ⅱ-1、Ⅱ-3、Ⅱ-4、Ⅱ-5的H基因中CAG重复次数均有增加，这表明患者Ⅰ-1在_____过程中异常H基因中的 CAG 重复次数会增加。若Ⅱ-2（红绿色盲患者）成年后与一正常男性婚配，他们所生的孩子最好是_____（选填“男”或“女”）性。
④若Ⅱ-1是白化病基因的携带者，与一个携带有红绿色盲基因和白化病基因的正常女性婚配，所生正常女儿中为纯合子的概率为_____（用分数表示，只考虑本小题提及的两种疾病）。
(2)由于缺乏合适的动物模型用于药物筛选，HD患者目前尚无有效的治疗方法。我国科学家利用基因编辑技术和体细胞核移植技术，成功培育出世界首例含人类突变H基因的模型猪，操作过程如图 3。

①筛选含有目的基因的体细胞，将细胞核移植到_____中，构建重组细胞，再将重组细胞发育来的早期胚胎移植到代孕母猪体内，获得子代F₀，此过程依据的原理是_____。
②将F₀与野生型杂交得到F₁，F₁再与野生型杂交得到F_2．在F₀、F₁、F₂中，更适合作为模型猪的是F₂个体，理由是_____。
(3)近年来，HD的治疗研究取得了一些重要进展。下列可作为HD治疗策略的有_____。

A．诱导HD致病蛋白在细胞内特异性降解	B．杀死神经系统病变细胞
C．干扰异常H基因mRNA的翻译	D．基因治疗改变异常H基因

【推荐3】请阅读下面科普短文，并回答问题：
“人生最重要的事事有个孩子”，“没有什么比孩子更特别”。这是英国生理学家、剑桥大学名誉教授2010年诺贝尔生理或医学奖得主罗伯特·爱德华兹的名言。
自1978年首名试管婴儿诞生以来，全球已有超过500万试管婴儿降临人世，其中一半在过去6年中诞生。这说明体外受精技术已经成为不育治疗的“主流选择”。我们常常把“体外受精和胚胎移植”（IVF-ET）叫“试管婴儿”。试管婴儿技术的研究，促进了生殖医学、胚胎学、遗传学的发展。爱德华兹的贡献，树立了人工辅助生殖技术（assisted reproductive technology, ART）和现代医学发展的里程碑。从社会伦理和为人类福祉的贡献来看，试管婴儿技术毫无疑问解决了数百万家庭因为不孕不育而丧失了生育权利的重大问题，不单为每个家庭带来了天伦之乐与美满生活，更为人类的未来，基因的延续注入了一支强心剂。
从对科学研究的贡献来说，体外受精通常是转基因、基因打靶、遗传修饰动物制备，胚胎工程等研究中的必需环节，在现代生命科学研究中有着广泛的应用，试管婴儿技术的发展主要经历了以下三个阶段：

2016年，世界上首例“三亲试管婴儿’在英国顺利诞生。医生将患有线粒体遗传病的女性卵母细胞的细胞核取出，植入女性捐赠者提供的去核卵母细胞中，受精后再按照标准的试管婴儿技术进行培育。这样诞生的孩子将会继承一位父亲和两位母亲的遗传基因，也就是所谓的“三亲婴儿”。

正如试管婴儿技术刚刚问世时所面临的质疑，“三亲婴儿”也面对诸多挑战。有一些批评者认为，这项技术的本质就是人造胚胎，相当于“设计”新生儿，甚至是在制造转基因人。依赖这种技术。研究人员可以对胚胎实施基因改造，以干预新生儿的发色和成人后的身高，甚至可以修改智商、体质等特征。这标志着试管婴儿伦理道德的转折点。
而参与研究的科学家辩解说，额外的线粒体DNA片段并不参与婴儿的基因重组与改造，而且这种“无害”的遗传物质不会影响到正常的智力、性格发育，因此，这批婴儿的基因和基因组并未被修改，不能称其为“转基因婴儿”。
在人类文明和道德伦理框架的所有内涵和外延中，究竟是古老的法则更重要，还是个体的自由选择权更重要?
(1)试管婴儿培育级关键的两个技术环节是________、________。
(2)试管婴儿技术可用于解决下列哪些生殖问题？____________。
A.女性输卵管堵塞造成的不孕
B.男性精子活力不足造成的不孕
C.对有家庭遗传病风险的夫妻进行胚胎性别筛选
D.对胚胎性别、智商、体能等有要求夫妇，可进行量身定做
(3)“三亲试管婴儿”可以规避哪种遗传病的风险?________________。
(4)“三亲试管婴儿”与2018年11月诞生的基因编辑婴儿有何异同__________？

【推荐1】欲利用基因工程技术将人胰岛素基因转入到小鼠基因组中，以期利用小鼠生产出人胰岛素，请回答：
(1)若用逆转录的方法获得人胰岛素基因，则需要从人体相应的_________细胞中提取mRNA，获得的人胰岛素基因经过相应处理后，再利用显微注射技术将其注入到受体细胞中，下列最不适合作为受体细胞的是________(A．受精卵B．胚胎干细胞C．第一次卵裂形成的细胞D．第三次卵裂形成的细胞）
(2)为获得更多的受体细胞，可先对成年雌鼠注射激素进___________处理,将获得的卵母细胞培养成熟，与经__________处理的精子结合形成受精卵后再进行后期操作。
(3)导入胰岛素基因的受体细胞还需借助___________、___________等技术才能成为转基因小鼠。

【推荐2】由于环境污染问题日益严重，导致由于不能体内受孕而无法“生儿育女”的现象越来越普遍，“试管婴儿”技术应运而生。试管婴儿至今已发展几代，但基本原理都是一样的，即将精子和卵子在体外完成受精，待受精卵发育到早期胚胎，再移入子宫继续发育成新个体。回答下列相关问题：
（1）在精子形成过程中，细胞中的____________将发育成顶体, ____________将发育成精子的尾。体外受精时，从父方采集的精子需先进行一定处理才能与卵子结合，该处理过程称为________________。受精卵需在体外培养到_________个细胞，才能移植到母体子宫继续发育。对接受胚胎的母体是否要用激素进行类似于牛胚胎移植的同期发情处理____________(填“是”或“否”）。
（2）2000年9月，一位名叫玛尼的女孩患上了一种致命的贫血病,需要进行造血干细胞移植，其父母通过体外受精获得早期胚胎，在植入母体前将胚胎的—个细胞取出，进行遗传学诊断确认符合要求后将胚胎植入体内，生出一位名叫安蒂的男婴，医生用其脐带血中造血干细胞挽救了玛尼的生命。若所用的遗传学诊断是基因检测，则采用的是___________技术。没有给玛尼移植父亲或母亲骨髓以获取造血干细胞来治疗贫血病,是因为子代对来自父亲或母亲骨髓的造血干细胞的__________比较严重，而对于来自同胞兄妹脐带血中造血干细胞，则更容易成功。获得男婴安蒂的过程涉及的技术有________________(答出两种即可）。

【推荐3】供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAm⁶A修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者进行系列实验。
(1)核移植的受体是_________细胞，核移植后的重构胚发育至_________阶段可利用_________技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的_________可用于医学研究。
(2)RNAm⁶A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm⁶A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如图1、2。

   

结果表明，核供体细胞的分化程度越高，_________。
(3)为验证RNAm⁶A修饰水平与核移植胚胎发育能力的关系，研究者进行如下实验：

组别	核移植胚胎发育能力的检测结果	对核供体细胞的处理方法
		胚胎总数	胚胎卵裂率	囊胚率
对照组	导入空载体.	187	59.4%	16.8%.
实验组	导入M基因过表达载体	185	71.3%	27%

导入空载体是为了排除_________等对实验结果的干扰。结果表明，_________可提高核移植胚胎的发育能力。
(4)为研究导致不同供体细胞RNAm⁶A修饰水平差异的原因，研究者分析了M基因启动子的甲基化水平，发现骨髓间充质干细胞中M基因启动子的甲基化水平为22%，而猪胎儿成纤维细胞则为50%。据此设计实验：实验组用DNA甲基化抑制剂处理骨髓间充质干细胞，对照组不处理检测两组的M基因启动子甲基化水平。
请修正实验方案：_________
(5)研究表明，RNAm⁶A修饰水平高的供体细胞核移植胚胎中DNA损伤位点较少。请推测猪骨髓间充质干细胞核移植胚胎发育的能力较高的原因：_________。