【推荐1】运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人的细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠的染色体而人类染色体则逐渐丢失，只剩一条或几条。右图是人的缺乏 HGPRT 酶突变细胞株（ HGPRT ^- ）和小鼠的缺乏 TK 酶细胞株（ TK ^一）融合后并在 HAT 培养液中培养的过程，结果表明最终人的染色体在融合细胞中仅存有 3 号染色体或 17 号染色体或两者都有。已知只有同时具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合细胞才可在 HAT 培养液中长期存活与繁殖。

( l ）体细胞杂交克服了______________________，过程 ① 常用的生物方法是_______________________________
(     )过程 ② 中，为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的____________，此外还要定期用____________处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液。
(     )从培养过程看， HAT 培养液不仅能提供养料，还起_________作用。
(     )从图示结果看，可以确定人的________基因位于_______号染色体；该方法可以对鼠基因定位吗？____________________________________________。

【推荐2】下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图，请回答相关问题：

(1)图示方法是____________技术的应用，该技术的基础是__________技术。
(2)操作所用的成纤维细胞应传代_____代以内，诱导融合时需要加入的化学促融剂是______。
(3)人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成______细胞，再经过一次________，形成单核细胞。
(4)HAT培养基起_______培养作用，培养时温度应为_____°C，操作中加入乌本苷的目的是_________。
(5)下表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶（“十”表示存在，“一”表示不存在），这4种酶均为单基因编码产生，据表判断，编码_______酶的基因位于染色体2上。

【推荐3】7岁的哈桑患有交界型大疱性表皮松解症(JEB)，该病的病因是编码层黏连蛋白332的基因之一LAMB3发生了突变，导致表皮和真皮很容易脱离，进而产生水疱和糜烂，并伴有多种炎症威胁其生命。科学家实施了表皮干细胞基因疗法拯救了哈桑，治疗过程如下图：

(1)用改造过的病毒作运载体，有利于提高基因治疗成功率，下列可能的原因有_____(填字母)。
a.感染率高        b.对宿主细胞没有毒性        c.更易于感染处在分裂状态的细胞
(2)改造病毒在宿主细胞中能够合成某种“整合酶”，它能切开DNA双链的特定区域，便于目的基因与宿主DNA整合，由此可推测整合酶的作用类似于基因工程工具中的________。感染过的细胞的后代就有了正确的LAMB3基因，经过___________过程可以制造正常的层黏连蛋白332。
(3)图中过程③所涉及的技术属于生物工程中的____________。过程③需要在_____（设备）中进行。三种克隆都能培养成单层细胞，因为细胞分裂生长具有______________的特点。
(4)干细胞移植和基因治疗最大的风险就在于导致癌症。原因是载体病毒会把基因______插入基因组里，如果破坏了一些____________________，那么就有可能导致细胞癌变。
(5)当患者全身的皮肤细胞大概更新过4轮时，科学家发现，绝大部分移植的细胞存活了，却没有复制留下自己的后代。由此可推测，人体皮肤是________________(选填“所有细胞”或“少数皮肤干细胞”) 负责复制、分化、更新所有的皮肤。

【推荐1】2012年4月，世界首例转乳糖酶基因奶牛“克拉斯”在我国内蒙古大学生命科学院生物制造重点实验室诞生。2011年5月，科研人员在一头黑白花奶牛（甲）怀孕45天的一个胎儿（乙）中提取成纤维细胞，然后用病毒作运载体把乳糖酶基因转到该细胞中，接着再将该细胞注入到去核的卵母细胞中，再在体外将该杂合细胞培养成早期胚胎，然后将胚胎移植到代孕母牛（丙）的子宫内，283天后，代孕母牛正常分娩，“克拉斯”就此诞生；科研人员预期，“克拉斯”所产的牛奶中，乳糖含量将大大降低，这样的牛奶适合于乳糖不耐症的人群的饮用。
（1）人类婴幼儿时期以乳汁为食，此时小肠上皮细胞是能够产生乳糖酶的，但成年后乳汁摄入很少，尤其在亚洲人群中，乳糖酶基因的表达受到抑制，这体现了基因表达在______上的差异。
（2）“克拉斯”是否是一头真正的转基因牛，可以对其基因进行检测，检测的原理是________。
（3）“克拉斯”转入的目的基因是_________，该基因只在___________细胞中表达。
（4）将早期胚胎移植到代孕母牛（丙）子宫内时，必须对丙注射______，使其子宫适合于胚胎的着床，囊胚时期的_________细胞发育为胎膜和胎盘，可与子宫建立正常的生理和组织联系。
（5）“克拉斯”的培育过程涉及的生物技术有_______、_______、_________。

【推荐2】回答下列（一）、（二）小题：
（一）（1）山西老陈醋的天然发酵醋醅中存在多种醋杆菌，拟从醋醅中分离高产酸的醋杆菌。取10g样品加入装有90 mL________的锥形瓶中，混匀，用________法接种于平板分离培养基(用溴甲酚紫做指示剂，根据有无变色圈判断是否产酸)上，30℃下________培养48h，挑取____________的菌落，纯化培养。
（2）天然发酵醋醅中除了醋杆菌，还有酵母菌、红曲霉菌等微生物，这些微生物赋予了食醋独特的风味，若要分离醋醅中的红曲霉菌，可用________________培养基（A.LB培养基       B.MS培养基       C.土豆培养基       D.牛肉汤培养基）。山西老陈醋一般采用高粱等粮食作物，红曲霉菌中具有酯化酶、糖化酶等，因此，除了能赋予食醋独特风味以外，还能_________，以增加产量。
（3）影响食醋风味的主要因素除了温度、氧气、pH 等环境因素外，还有_______________(答出两点即可)。
（二）结核病是一种由结核分枝杆菌传播引起的人畜共患病。我国某研究团队在奶牛的28号染色体上定点插入小鼠SP110基因，生产出巨噬细胞抗结核杆菌功能显著提高的转基因牛。回答下列问题：
（1）从小鼠白细胞中提取 SP110 mRNA，经_____得到cDNA，再经PCR扩增得到目的基因。
（2）研究最好选择_______________________(填“胎牛成纤维细胞”或“巨噬细胞”)作为受体细胞，依据是_______。
（3）成功导入外源基因的受体细胞还需经过_____技术，再将早期胚胎移植入_________的受体牛子宫内，使其妊娠产仔。
（4）关于上述研究的叙述，正确的是_____
A.本研究所采用的目的基因序列与小鼠SP110基因完全相同
B.受体细胞中没有检测到SP110蛋白，说明目的基因导入不成功
C.通过杂合转基因牛杂交实验，可培育出能稳定遗传的抗病转基因牛
D.转基因牛的巨噬细胞可以特异性识别并吞噬结核杆菌以显著提高抗病能力
（5）检测发现只有牛巨噬细胞有SP110蛋白，而在肌肉、乳腺等其他器官和组织中没有，原因是________。

【推荐3】我国科学家突破了体细胞克隆猴的世界难题，成功培育出世界上首个体细胞克隆——“中中”和“华华”。这标志着我国将率先开启以猕猴作为实验动物模型的时代。下图为克隆后的流程示意图。请回答下列问题：

（1）我国克隆猴利用的是猴胎儿成纤维细胞，该细胞是一已分化的体细胞，从理论上分析，它具有细胞的全能性，这是因为____________________。
（2）上图中，一般选择处于__________时期的卵母细胞进行“去核”操作，然后采用__________技术将体细胞核移植于该细胞，得到重组细胞。再进行人工激活使重组细胞分裂形成胚胎。
（3）科学家将79枚克隆胚胎移植入21只代孕母猴中，最终只有两只母猴正常怀孕产下“中中”和“华华”，它俩的性别是否一致？__________；原因是____________________。
（4）克隆动物技术有很多优点：①可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；②__________。
（5）1890年，英国剑桥大学的生物学家将纯种的安哥拉兔的两个4细胞胚胎移入一只纯种比利时兔的输卵管内，成功地产下了两只纯种安哥拉子兔。这个实验首次证实____________________。

【推荐1】2018年1月25日报道，两只克猕猴“中中”和“华华”在中国诞生，突破了现有技术无法克隆灵长类动物的世界难题，将为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病带来前所未有的光明前景，图为过程流程图，请回答下列有关问题:

（1）欲获得单个雌猕猴体细胞，可用_______酶处理动物组织块。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至_______时期再进行，目前使用的去核方法是显微操作法。
（2）A细胞的获得过程属于_______(有性/无性）生殖，在培养早期胚胎时，培养液中通常要添加_______等一些天然成分，当胚胎发育到__________阶段时，将进行②_________(填过程名称)。
（3）获得的“中中”和“华华”小猕猴与供体动物的遗传物质不完全相同，遗传物质不相同地方是_______。
（4）与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样，“中中”和“华华”猕猴克隆动物的成功证明了__________。

【推荐2】2018年1月25日，中科院神经科学研究所团队利用类似克隆羊多莉的体细胞克隆技术克隆的猕猴“中中”和“华华”，登上了全球顶尖学术期刊《细胞》的封面，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。下图是体细胞克隆猴的技术流程图，请据图回答下列问题：
   
（1）图中使用的一般都是体外培养10代以内的成纤维细胞，其原因是_______________，刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现______________现象。
（2）图中步骤①是克隆猴技术难点之一，需要将卵母细胞培养到_______________（时期）进行去核操作，步骤①中使用了特殊的显微镜对卵母细胞内的纺锤体以及透明带结构进行非侵入性观察和分析，去核事实上是去除卵母细胞的纺锤体和________________结构。目前最常用的去核方法是____________________。
（3）过程②是通过电刺激使成纤维细胞与卵母细胞发生_______________，同时还需通过物理或化学方法，激活受体细胞，目的是____________________________________。
（4）理论上通过上述方法可获得无限个克隆猕猴，这是因为当培养的成纤维细胞达到一定密度后，可以进行________________以得到更多数量的细胞。
（5）体细胞克隆猴的另外一个难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差，科学家发现胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中KDM4d mRNA翻译产生的酶的作用是________________________。

【推荐3】我国科学家突破了体细胞克隆猴的世界难题，成功培育出世界上首个体细胞克隆猴——“中中”和“华华”。这标志着我国将率先开启以猕猴作为实验动物模型的时代。下图为克隆猴的流程示意图。请回答下列问题：

（1）我国克隆猴利用的是猴胎儿成纤维细胞，该细胞是一已分化的体细胞，从理论上分析，它具有细胞的全能性，这是因为________________。
（2）克隆猴时需要进行“去核”操作，即去掉卵母细胞的细胞核。先在体外培养卵母细胞让其分裂，一般选择__________的细胞进行去核操作；然后进行“核移植”，即将体细胞的细胞核移到去核卵母细胞中形成重组细胞，
此时采用的技术是_________________________；得到的重组细胞在进行人工激活使其分裂形成胚胎。
（3）科学家将79枚克隆胚胎移植入21只代孕母猴中，最终只有两只母猴正常怀孕产下“中中”和“华华”，他俩的性别是否一致？_____________；原因是_________________。
（4）克隆动物有很多优点：①可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；②_______________。
（5）灵长类生物克隆成功是克隆技术的重大突破，在该技术应用方面，应注意哪些潜在的风险？_______________________________________________________________________。