【推荐1】现代生物工程技术的发展给人类生活带来了很多惊喜。请回答有关问题；
(1)技术的发明使基因工程的实施成为可能。1967年，科学家发现细菌拟核DNA以外的质粒可以____，这一发现为基因转移找到了一种运载工具。
(2)蛋白质工程是基因工程的延伸，它最终要达到的目的是_____，以满足人类的生产和生活的需求。
(3)胚胎工程的重要成就之一是ES细胞的分离和培养成功。ES细胞具有胚胎细胞的特征，在形态上，表现为____。
(4)奥林匹克森林公园的建设坚持“绿色奥运”的理念，这是生态工程建设的一个生动缩影。
①在开工前，要先做森林公园的整体设计，其设计要与生态工程所遵循的整体性、协调与平衡、____(答出两点即可)等基本原理相吻合。
②在污水净化过程中，除发挥污水处理厂的作用外，若要利用生物来回收污水中的 铜、镉等金属元素，请提供一个简单的方案:________。

【推荐2】下图1为某种常用质粒的序列图，Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色，Amp^r为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题：

（1）若要筛选成功导入目的基因的重组质粒，培养基中应加入的物质有________，构建重组质粒时需要的工具酶有_______________，对获取的目的基因可用____________技术对其扩增。   
（2）实验小组用BamH I和Bgl II两种限制酶切割目的基因和质粒，构建重组质粒后导入大肠杆菌中，在筛选重组质粒的培养基上，若大肠杆菌菌落显蓝色，说明导入了_____________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_____________（填“能”或“不能”）在该培养基上生存。   
（3）若质粒和目的基因用BamH I和Bgl II两种限制酶切割后，用DNA连接酶相连，然后再用BamH I和EcoR I切割成功连接后的重组质粒，可获得长度不同的_____________种DNA片段。（假定每一种限制酶都充分切割。）

【推荐3】鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。回答问题：
(1)目的基因合成后可在Taq酶的作用下通过PCR技术大量扩增，该技术的原理是________________________。利用PCR技术扩增干扰素基因时，需要加入两种引物，原因是_____________________________________。
(2)基因表达载体中应有RNA聚合酶识别和结合的部位，该部位称为_________________。将基因表达载体导入农杆菌常用的方法是___________________________________。
(3)该实验中，将农杆菌转入烟草细胞的原生质体，原生质体再生出细胞壁。请从理论角度提出实验室检测原生质体是否再生出细胞壁的一种方法：________________________。
(4)科研人员提取烟草愈伤组织细胞的RNA后，先通过__________获得DNA，再进行PCR扩增。若最终未能检测出干扰素基因，可能原因是____________________；若转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能原因是__________________。

【推荐1】2019 年中国科学院神经科学研究所利用 CRISPR—Cas9 基因编辑技术，成功构建了世界首例核心节律基因 BMAL1 敲除猕猴模型，并成功用基因敲除猴的体细胞通过克隆技术培育了5只克隆疾病猴，为节律紊乱相关疾病机理的研究提供了比较理想的动物模型。CRISPR—Cas9 基因编辑系统由单链向导 RNA（sgRNA）和 Cas9 蛋白组成。回答下列问题：
（1）科学家常用______法将 CRISPR—Cas9 基因编辑系统导入猕猴细胞，编辑系统利用 sgRNA 来识别靶基因 DNA，并引导 Cas9 蛋白剪切 DNA，使靶基因发生改变，实现基因敲除。sgRNA 能识别靶基因 DNA 的原因是______________________ 。
（2）在体外培养猕猴体细胞时，需要一定比例的 O₂ 和 CO₂，故通常采用________或_________________________（填实验器材），将其置于 CO₂ 培养箱中进行培养。所使用的培养基属于_________________________（填“合成”或“天然”）培养基，培养基除了灭菌外，还需要通过_____________________________来保证无菌无毒环境。
（3）进行体细胞克隆选择去核卵母细胞作为受体细胞，可能原因是 _____________________   （答出两点）。
（4）克隆猴被用于人类疾病研究与治疗中所具有的突出优点是_____________________。（答出一点）

【推荐2】【生物——选修3：现代生物科技专题】人血清白蛋白是一种在医学上应用广泛、需求量大的蛋白质药物。而目前血浆提取生产的方式难以满足市场的要求，用基因工程方法生产人血清白蛋白无疑具有巨大的商业价值。毕赤酵母菌由于具有增殖快、易培养等优点，使得其在表达外源蛋白中具有突出的优势。
（1）若从cDNA文库获取人血清白蛋白基因，则需要从能够表达人血清白蛋白基因的细胞中提取mnRNA分子，再通过___过程获得cDNA文摩，从中获得目的基因；在构建基因表达载体时，目的基因前后还应分别加上___和___，否则会影响目的基因的转录。
（2）目的基因导入酵母菌之前，一般先用 ___处理酵母菌使之成为感受态细胞，其原因是感受态细胞能够____。
（3）人血清白蛋白基因进入酵母细胞内，能够维持稳定和表达的过程称为___；若要检测酵母菌细胞内是否存在目的基因，通常采用的检测方法是 ___技术：要检测酵母菌是否生产人血清白蛋白，采用抗原一抗体杂交，若有 ___出现，表明已表达出人血清白蛋白。

【推荐3】请根据有关生物工程方面的知识回答下列问题：
（1）基因工程的核心是___________，所需的工具酶有___________。从分子水平上看，基因工程得以实现的遗传学物质基础是：______________________ (写出两点)。基因工程中限制酶切割后的运载体与目的基因能再次拼接的理由是_____________________。
（2）将目的基因导入植物细胞最常见的方法是___________， 原理是利用其菌体中质粒的T- DNA片段可___________的特点；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是___________。
（3）动物细胞工程中___________技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞工程的一项重要应用是制备单克隆抗体，在该过程形成的杂交瘤细胞中发生的遗传信息流动有DNA→DNA、___________。
（4）胚胎工程中，胚胎移植选择受体的条件是___________并具有健康体质和正常繁殖能力，受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生___________，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。为了获得产奶量高的奶牛，需取囊胚期___________细胞做性别鉴定。若对囊胚进行胚胎分割，要注意__________，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

【推荐1】I．人的T细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质（Y），该蛋白质由一条多肽链组成。目前可以利用现代生物技术生产Y。回答下列问题。
(1)若要获得Y的基因，可从人的T细胞中提取_______作为模板，在_______催化下合成cDNA，再利用_______技术在体外扩增获得大量Y的基因。
(2)将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。若将上述所得Y的基因插入农杆菌Ti质粒上的______________中，得到含目的基因的重组Ti质粒，则可用农杆菌转化法将该基因导入某种植物的叶肉细胞中。若该叶肉细胞经培养、筛选等得到了能稳定表达Y的愈伤组织，则说明Y的基因已经______________。
(3)天然的Y通常需要在低温条件下保存。假设将Y的第6位氨基酸甲改变为氨基酸乙可提高其热稳定性，若要根据蛋白质工程的原理对Y进行改造以提高其热稳定性，具体思路是______________。
Ⅱ．根据所学知识回答问题：
(4)药用植物——川芎易受病毒侵染造成大幅度减产，日本学者用川芎的_______作为外植体进行脱毒培养，培养基一般含有水分、无机盐、_______、氮源、维生素等。
(5)植物组织培养的主要原理是植物细胞具有_______。科研人员利用植物的_______作为外植体培养出单倍体植株，具体过程是在_______和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过_______产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
(6)在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到_______阶段时，将胚胎移人受体（代孕）动物体内。

【推荐2】人胰岛素由A、B两条肽链构成。研究人员用大肠杆菌作生产菌，利用基因工程TTA号冻技术分别生产两条肽链，并在体外将两条肽链加工成胰岛素。请回答下列问题：
（1）由A、B两条肽链可推导出A、B基因的碱基序列，依据是______。因为A、B基因中的脱氧核苷酸数较少，因此常用______的方法获取目的基因。
（2）在基因表达载体中，标记基因的作用是______。基因工程中不能将A、B基因直接导入大肠杆菌的原因是______。
（3）检测A、B基因是否导入受体菌时，常用______作探针。若A、B基因表达的肽链售中氨基酸数目增多，肽链后延，则需对A、B基因进行改造，这个改造是______。
（4）引导肽是由引导肽基因控制合成的段多肽序列，若在A、B肽链的前端加上引导肽序列后，可将A、B肽链引导到大肠杆菌的细胞膜外，便于A、B肽链提取。为实现上述目的，在基因层面的操作是______

【推荐3】干扰素是动物体内合成的一种蛋白质，可以用于治疗病毒感染和癌症，但体外保存相当困难，如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在-70℃下保存半年，给广大患者带来福音。
（1）蛋白质的合成是受基因控制的，因此获得能够控制合成“可以保存的干扰素”的基因是生产的关键，依据蛋白质工程原理，设计实验流程，让动物生产“可以保存的干扰素”。_____、_____、_____、_____

（2）和蛋白质工程相比，基因工程在原则上只能生产_____的蛋白质，不一定符合人类生产和生活的需要。而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过_____或_____，对现有蛋白质进行_____，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需要。
（3）蛋白质工程实施的难度很大，原因是蛋白质具有十分复杂的_____结构。
（4）对天然蛋白质进行改造，应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？_____。原因是_____。