12. 2021年诺贝尔生理学或医学奖授予了大卫·朱利叶斯和阿登·帕塔普蒂安两位科学家,以表彰他们在发现离子通道蛋白TRPV1(辣椒素受体)等方面做出的重要贡献。下图为大卫·朱利叶斯团队利用基因工程方法发现TRPV1的过程,请据图回答:
(1)抽取背根神经节细胞的总RNA,并分离纯化得到mRNA,再经过
_________,得到全部的cDNA。cDNA结构上的特点有
__________(请写出2点)。
(2)将cDNA与
__________连接后储存在受体菌群种,获得cDNA文库。将cDNA文库分为16000个克隆池,并将每个克隆池瞬时转移到
_________中。
(3)将荧光钙敏感染料Fura-2和辣椒素同时加入转染细胞的培养基,一段时间后观察克隆池的荧光产生情况。若发出荧光,则说明
_________,发荧光的机理是
__________。通过对该池进行进一步细分和重新评估从而获得TRPV1受体,并提取出TRPV1受体基因。
(4)已知薄荷醇能与TRPM8(感受器的受体)结合,并激活皮肤的冷觉感受器产生神经冲动。请你尝试设计实验寻找能够编码TRPM8的基因。
___________