回答与枯草杆菌纯化和a-淀粉酶固定化过程有关的问题:
(1)培养基的准备:在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中,完成加水、装锅、加热排气、 保温保压适当时间后,切断热源,让灭菌锅内温度自然下降,压力表的读数______________ , 打开排气阀,旋开固定螺栓,开盖,才可以取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至______________ 左右时倒平板。
(2)枯草杆菌是生产a-淀粉酶的优良菌种,为确定合适的稀释倍数,小组成员取1mL菌原 液进行如图1所示的操作,在无菌条件下,用______________ 取0. 1 mL稀释后的菌悬液进行 图2中____________ 所示的操作,接种后的平板在培养时的放置应如图3______________ (选填“a”或“b”)所示。在统计菌落时,发现平板上的平均菌落数为33个,则每毫升菌原液中的细菌数大约为______________ 个。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/4/14/2441327440404480/2441568915873792/STEM/b2358226d00c48debe332be842200828.png?resizew=553)
(3)a-淀粉酶宜采用吸附法进行固定化,下列关于反应柱的理解,正确的是______________
A.反应物和酶均可自由通过反应柱B.反应物和酶均不能通过反应柱
C.反应物能通过反应柱,酶不能通过反应柱D.反应物不能通过,酶能通过
(4)为了确定筛选出的a-淀粉酶的应用价值,还需要进一步检测固相a-淀粉酶的活性,在该实验中,亲和层析洗脱液中加入KI-I2指示剂后,试管中呈现______________ 色。相对于唾液淀粉酶,枯草杆菌产生的a-淀粉酶具有______________ 特性,从而有利于工业生产。
(1)培养基的准备:在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中,完成加水、装锅、加热排气、 保温保压适当时间后,切断热源,让灭菌锅内温度自然下降,压力表的读数
(2)枯草杆菌是生产a-淀粉酶的优良菌种,为确定合适的稀释倍数,小组成员取1mL菌原 液进行如图1所示的操作,在无菌条件下,用
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(3)a-淀粉酶宜采用吸附法进行固定化,下列关于反应柱的理解,正确的是
A.反应物和酶均可自由通过反应柱B.反应物和酶均不能通过反应柱
C.反应物能通过反应柱,酶不能通过反应柱D.反应物不能通过,酶能通过
(4)为了确定筛选出的a-淀粉酶的应用价值,还需要进一步检测固相a-淀粉酶的活性,在该实验中,亲和层析洗脱液中加入KI-I2指示剂后,试管中呈现
更新时间:2020-04-14 23:27:35
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【推荐1】新冠肺炎疫情期间,“外卖小哥”被誉为保障经济和人民生活的“英雄”,但是随之而来,“外卖是否卫生、是否环保”又成为了人们讨论的焦点话题。
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Ⅰ.淀粉填充聚乙烯类塑料(淀粉﹣PE)是一种聚乙烯类塑料替代材料,科研人员开展相关研究,从垃圾堆埋场中筛选到能够更高效降解淀粉﹣PE的菌株,试图解决外卖餐盒的环境污染问题。
(1)在进行该菌株的分离筛选时,需要将一定量的适宜稀释倍数的土壤悬液接种在以____________ 为唯一碳源的液体培养基上,重复多次进行富集培养。此种分离纯化微生物的接种方法称为_________________ 。研究未知的微生物一定要注意进行规范的无菌操作,以防________________________ ,实验后,一定要洗手。
(2)科研人员将富集得到的菌株分别接入以聚乙烯蜡(PE-WAX,一种低分子聚乙烯)为唯一碳源的基本培养基中,挑选能在该培养基中生长的菌株,结果如图1所示。同时,将富集得到的菌株转接至淀粉固体培养基,观察透明圈(出现透明部分说明该菌株能分泌胞外_______ 酶),结果如图2所示。综上分析,菌株________ (从图1、图2中选择序号)为所选菌株,原因是____________________________ 。
Ⅱ.外卖餐食的微生物污染状况也越来越多地受到人们的关注。研究人员通过实验探究了同种外卖餐食送达时的温度与其中的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的数量关系。
(3)检测金黄色葡萄球菌时,为了保证结果准确,一般选择菌落数在_____________ 范围的平板进行计数。值得注意的是,统计的菌落数往往会比活菌的实际数目低,这是因为_________________ 。除了上述的活菌 计数法外,_________ 直接计数也是测定微生物数量的常用方法。
(4)实验结果显示,送达温度与菌落数量呈负相关。因此送达温度较_________ (填高或低)的餐食,合格率较高。
(5)活菌计数技术广泛应用于土壤含菌量的测定、食品卫生和水源污染度的检验等方面。请从水源污染度的检验方面自拟一个课题做进一步的研究。你拟定的课题是:研究_________________________________ 。
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【推荐2】佩戴口罩是预防病原体感染的有效措施。熔喷布是口罩生产的重要原料,其主要成分是聚丙烯,其易降解程度是评价口罩合格性的重要指标之一,如图1表示从土壤中分离出高效降解聚丙烯的细菌的接种实验中的一些步骤。回答下列问题:
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(1)图1中接种工具的名称是_____ ,接种方法是_____ 。
(2)图中所用的培养基应以聚丙烯为唯一碳源,其目的是_____ 。这样的培养基按功能划分,属于_____ 培养基,其含义是指_____ 。
(3)在扩大培养时,若持续增加培养基中营养物质的浓度,将不利于提高菌种的种群密度,原因是_____ 。
(4)步骤②中,将接种工具冷却的目的是_____ 。
(5)称取10g某土壤样品,转入适量无菌水中,制备成100mL菌液,经_____ 后,获得细胞密度不同的菌液,从5号试管取0.1mL菌液涂布在固体培养基上,结果如图所示。结果表明每克土壤样品约含高效降解聚丙烯的细菌_____ 个。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/27/5bf144e9-156c-492c-be47-a668fd88273c.png?resizew=460)
(6)分别取三个平板用稀释涂布平板法培养三种细菌(甲、乙、丙),然后在培养基上打出直径为3mm的孔,并在孔中加入一定浓度的M抗生素,经过一定时间培养后,可以在孔的周围观察到一圈清晰区,这是M抗生素抑制细菌生长所致的。测量清晰区的直径(如图2所示),数据如表所示。
①三种细菌中对低浓度M抗生素最敏感的是_____ 。
②有人因感染了丙细菌而患病,使用M抗生素给予治疗,医生建议不能使用浓度大于25μg/mL的M抗生素,理由是_____ (答出两点)。
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(1)图1中接种工具的名称是
(2)图中所用的培养基应以聚丙烯为唯一碳源,其目的是
(3)在扩大培养时,若持续增加培养基中营养物质的浓度,将不利于提高菌种的种群密度,原因是
(4)步骤②中,将接种工具冷却的目的是
(5)称取10g某土壤样品,转入适量无菌水中,制备成100mL菌液,经
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(6)分别取三个平板用稀释涂布平板法培养三种细菌(甲、乙、丙),然后在培养基上打出直径为3mm的孔,并在孔中加入一定浓度的M抗生素,经过一定时间培养后,可以在孔的周围观察到一圈清晰区,这是M抗生素抑制细菌生长所致的。测量清晰区的直径(如图2所示),数据如表所示。
不同浓度M抗生素条件下清晰区直径(mm) | |||||
细菌 | 5μg/mL | 7.5μg/mL | 10μg/mL | 15μg/mL | 20μg/mL |
甲 | 7 | 10 | 14 | 16 | 16 |
乙 | — | 5 | 8 | 13 | 17 |
丙 | 5 | 7 | 9 | 14 | 19 |
②有人因感染了丙细菌而患病,使用M抗生素给予治疗,医生建议不能使用浓度大于25μg/mL的M抗生素,理由是
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【推荐3】某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A 。研究人员用化合物 A 、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/12/4cd632bd-0514-4ca1-ab19-eb8db592fed7.png?resizew=618)
(1)培养基中加入化合物 A 的目的是_____________ 。
(2)实验需要振荡培养,由此推测 “ 目的菌 ” 的代谢类型是_______________ 。
(3)在上述实验操作过程中,获得纯净 “ 目的菌 ” 的关键是_______________ 。
(4)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,此过程中所用的接种工具操作时采用___________ 灭菌的方法。
(5)某同学计划统计污水池中 “ 目的菌 ” 的活菌总数,应用_________ 方法统计。他取0.1ml的稀释倍数为106的菌液进行涂布3 个平板,测定平均数为50,则每升菌液中菌体个数是_________ 。
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(1)培养基中加入化合物 A 的目的是
(2)实验需要振荡培养,由此推测 “ 目的菌 ” 的代谢类型是
(3)在上述实验操作过程中,获得纯净 “ 目的菌 ” 的关键是
(4)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,此过程中所用的接种工具操作时采用
(5)某同学计划统计污水池中 “ 目的菌 ” 的活菌总数,应用
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【推荐1】“一天一苹果,医生远离我”。苹果是人们最喜爱的水果之一,由于全国各地大面积种植,近年来时有苹果滞销的新闻报道。
(1)每当到了丰收季节,苹果堆满仓库,常因保存不当腐烂变质。为了研究导致苹果腐烂的微生物,实验小组制备了苹果浸出液。若要确定浸出液中细菌的种类和数量,一般采用______ 法接种,该法往往用统计的菌落数目代表菌体数量,其原理是:__________________ 。
(2)为了解决滞销问题,并且提高水果附加值,可以将苹果加工成果酒。在苹果酒发酵过程中,不同品种的酵母菌发酵产生的酒精度不同,若要从野生酵母菌中选出对酒精耐受能力强的高产品种,可用______ 的培养基进行筛选。对选择培养出的优良菌种要长期保存可采用______ 的方法。
(3)除了制备苹果酒,也可直接榨汁生产苹果汁。为了尽可能多地榨出果汁,可以加入果胶酶。果胶酶包括______ 、果胶分解酶和果胶酯酶等。为了降低成本,使果胶酶可以反复利用,可将其制成固定化酶。固定果胶酶一般不采用包埋法,原因是:__________________ 。
(4)苹果中的苹果多酚具有抗过敏、抗癌细胞增生、调节脂质代谢等多种生理功能,提取苹果多酚已成为一个热门产业。提取苹果多酚适宜采用萃取法,是根据苹果多酚具有______ 的特点,萃取的效率主要取决于______ 。
(1)每当到了丰收季节,苹果堆满仓库,常因保存不当腐烂变质。为了研究导致苹果腐烂的微生物,实验小组制备了苹果浸出液。若要确定浸出液中细菌的种类和数量,一般采用
(2)为了解决滞销问题,并且提高水果附加值,可以将苹果加工成果酒。在苹果酒发酵过程中,不同品种的酵母菌发酵产生的酒精度不同,若要从野生酵母菌中选出对酒精耐受能力强的高产品种,可用
(3)除了制备苹果酒,也可直接榨汁生产苹果汁。为了尽可能多地榨出果汁,可以加入果胶酶。果胶酶包括
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(0.65)
【推荐2】某植物组织含有果胶、淀粉和纤维素等成分,某科研小组开展对该植物组织相 关成分以及相关酶综合利用的研究,请回答:
(1)果胶酶包括果胶酯酶、_____ 、_____ 。其中果胶酯酶,可利用凝胶色谱法将其分离,操作中,装填凝胶柱时不能出现气泡,原因是 _____ 。
(2)为了筛选出能分泌较多果胶酶的微生物,一般需用_____ 的培养基进行选择培养。
(3)若要将纤维素分解菌固定化,宜采用_____ 法,原因是__________ 。该方法的优点是__________ 。
(1)果胶酶包括果胶酯酶、
(2)为了筛选出能分泌较多果胶酶的微生物,一般需用
(3)若要将纤维素分解菌固定化,宜采用
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【推荐3】(1)催化果胶分解的酶主要包括果胶酶和____ 很多微生物能生产果胶酶,它们能将果胶彻底分解为 _________ ,很多微生物能生产果胶酶,它们能将果胶彻底分解,如_____ 和苹果青霉。果胶酶广泛地应用于食品、酿酒、环保、医药及纺织工业等领域,已成为世界四大酶制剂之一。
(2)果胶酶在生产上需求量大,且多为一次性使用,既造成了很大的浪费,又大大提高了产品的生产成本。而固定化果胶酶可以实现_____ ,从而能够减少果胶酶的使用量,节约生产成本。果胶酶固定化的方法很多,主要包括吸附法、包埋法、_____ 、交联法等。固定化的果胶酶可以用来制备果汁,其原理是果胶酶能把果汁中的果胶彻底水解,从而提高果汁的 _____ 。用特定染色剂将果胶染色之后,可以通过_____ 法测定 OD 值进行定量检测。
(3)某研究小组用果胶酶来制作澄清型的桔汁时,发现果胶酶固定化后 pH 对酶活性的影响也发生了变化,为研究 pH 值对固定化果胶酶的影响,用 50%的桔汁,0.05g/ml 的酶量,并用柠檬酸和_____ 调节 pH 值,完成实验,得到如下结果:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/10/11/2309508607221760/2309690530783233/STEM/fc9d7501e107410ab6cffce00b5fe3c4.png?resizew=648)
根据结果,桔汁的 pH 值控制在_____ 以下,固定化果胶酶的澄清效果较好。
(4)工业生产中,果汁封装前为了尽可能延长保存时间同时尽可能地保持其中的营养,宜采用方法是( )
A.高压蒸汽灭菌法 B.高温瞬时杀菌法 C.G6 玻璃砂漏斗过滤 D.紫外线消毒
(2)果胶酶在生产上需求量大,且多为一次性使用,既造成了很大的浪费,又大大提高了产品的生产成本。而固定化果胶酶可以实现
(3)某研究小组用果胶酶来制作澄清型的桔汁时,发现果胶酶固定化后 pH 对酶活性的影响也发生了变化,为研究 pH 值对固定化果胶酶的影响,用 50%的桔汁,0.05g/ml 的酶量,并用柠檬酸和
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/10/11/2309508607221760/2309690530783233/STEM/fc9d7501e107410ab6cffce00b5fe3c4.png?resizew=648)
根据结果,桔汁的 pH 值控制在
(4)工业生产中,果汁封装前为了尽可能延长保存时间同时尽可能地保持其中的营养,宜采用方法是
A.高压蒸汽灭菌法 B.高温瞬时杀菌法 C.G6 玻璃砂漏斗过滤 D.紫外线消毒
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