【推荐2】对于老上海人来说，豆浆是他们最爱的早餐饮品，但它易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：
①取少量变质的豆浆在无菌条件下接种到培养基X上，一天后长出了S₁、S₂和S₃三种菌落，计数后分别制成菌液。
②将三种菌液分别接种到加入了乳酸链球菌素的新鲜豆浆中，一段时间后统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图所示。

1．步骤①中适宜采用的接种方法是___________。
2．培养基X应使用_____。

A．加伊红、美蓝染料的选择培养基	B．牛肉膏蛋白胨通用培养基
C．加四环素的选择培养基	D．加青霉素的选择培养基

3．据图可知最能耐受乳酸链球菌素的细菌是______________。为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在______________mg/kg左右。
4．腐败细菌细胞膜内侧附着有少部分核糖体，合成运输到胞外的蛋白酶。由此可知下列结构中作用最类似于腐败细菌细胞膜的是_____。

A．中心体	B．内质网
C．叶绿体	D．溶酶体

5．科研人员还发现碳源与氮源的浓度都会影响腐败细菌分泌的蛋白酶活性（活性越强越易使豆浆变质），为确定碳氮源浓度的最佳组合。以a和b分别代表碳源和氮源的浓度，假设酶活性a₁＞a₂＞a₃；b₁＞b₂＞b₃，据此形成下列四种方案，其中最佳的是方案____________。
方案一：a₃和b₃组合。
方案二：将每一种a的浓度分别与b₁、b₂、b₃组合，根据酶活性取其中的最弱组合。
方案三：a₃和b₃组合，a₂和b₂组合，根据酶活性取其中的最弱组合。
方案四：a₃分别与每种氮源浓度组合，b₃分别与每种碳源浓度组合，根据酶活取其中的最弱组合
6．乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是___________________________________。

【推荐3】花生是我国重要的经济作物之一，根系在生长过程中，会分泌苯甲酸、苯乙酮、丙三醇、苯甲醛等物质，这些物质会抑制青枯病原菌和其他植物的生长。由于土地限制等原因，同一土地多年连续种植现象十分普遍，这些物质产生的自毒作用越来越明显，造成花生产量下降。扬州大学已采用“采集根际土壤→选择培养→分离、纯化培养→菌种鉴定”途径筛选出将苯甲酸降解为无毒小分子（CO₂和H₂O等）的根际菌。回答下列相关问题：
(1)花生根系分泌的苯甲酸等物质属于其____________（填“初生”或“次生”）代谢物，合成该类物质的代谢的进行特点是___________________。
(2)为什么要从连作花生的土壤中寻找降解苯甲酸的根际菌？______________
(3)为确保能够分离得到苯甲酸分解微生物，常将土壤稀释液先进行选择培养，该培养基的碳源要求为________________，进行该步操作的目的是________________。
(4)分离、纯化培养时，可采用____________________方法接种，从物理形态角度考虑，该培养基属于___________培养基。
(5)获得的菌种可通过___________工程大量增殖，并作为微生物肥料施用于土壤。采用微生物降解、修复土壤技术的优点有____________________
(6)筛选得到的降解苯甲酸的根际菌并不能直接推广应用，还需考虑的原因有哪些？（答出1点即可）____________

【推荐1】研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草，该过程所用的质粒与含抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性核酸内切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。请回答下列问题。

(1)利用PCR技术扩增干扰素基因时，扩增第n次时，需要________个引物。
(2)用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，应选用限制酶___________切割质粒，选用限制酶___________切割含目的基因的DNA片段。
(3)将上述切开的质粒与目的基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入受体细胞，受体细胞的类型（对两种抗生素表现出抗性R或敏感性S）可能包含_________（不考虑基因突变）。
①XR、YR            ②XR、YS　          ③XS、YR       　     ④XS、YS
(4)转基因植物所携带的目的基因可能传递给非转基因植物，造成基因污染。如果将目的基因导入叶绿体DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是________________________。

【推荐2】科学家发现细菌细胞中存在清除入侵病毒DNA的功能系统（见下图1），并发明了CRISPR/Cas9基因编辑技术，目前已成为生物科学领域最热门的基因操作技术。下图2 是科研人员运用CRISPR/Cas9基因编辑技术（其中表达载体1的作用是在受体细胞中控制合成CRISPR复合体，表达载体2可以与相应DNA的同源区进行互换、重组），成功地将基因A精确导入到绒山羊细胞内的甲、乙两个基因之间，并和绿色荧光蛋白基因一起表达的过程示意图。请回答。

（1）由图1可知，CRISPR复合体中crRNA的主要功能是________________________，而Cas9蛋白催化断裂的化学键位于____________之间。细菌的这种清除能力的生理意义是________________________。
（2）结合对图1的理解，图2中表达载体1首先要表达出含有________________________序列的crRNA和Cas9蛋白，以结合形成CRISPR复合体。
（3）根据图2，基因表达载体2上需要加入:①基因甲片段、②基因乙片段、③基因A、④绿色荧光蛋白基因等四种DNA片段，这4种片段在载体上的正确排列顺序应是___________（用序号代表相应片段）。在形成重组DNA时需要___________酶参与催化表达载体2与绒山羊DNA的连接。
（4）实验室一般会将重组DNA导入山羊的胚胎干细胞中，以培育、筛选出转基因山羊，选择胚胎干细胞作为受体细胞的主要依据是______________________。
（5）与传统的基因工程相比较，运用CRISPR/Cas9基因编辑技术培育转基因生物的明显优点是_________________________________。