通过咽拭子取样进行RT-PCR技术检测是目前临床上诊断新型冠状病毒感染疑似患者的常用方法,用于核酸检测的RT-PCR试剂盒的部分工作原理简图如下。回答下列问题:
(1)RT-PCR是指以病毒的RNA为模板通过_________ 过程合成cDNA,并对cDNA进行PCR扩增的过程。进行RT-PCR过程中,需要加入的酶有__________ 。
(2)利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行检测时,除借助上述RT-PCR技术外,还需要有特异性探针。制作该探针的依据是__________ ,利用该探针对新型冠状病毒进行检测的原理是___________ 。
(3)除核酸检测外,研究人员还研发了基于病毒蛋白的检测技术,该项技术的关键是生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产该种抗体的大致方案如下:
①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白;
②分离免疫小鼠的B淋巴细胞,并与小鼠的骨髓瘤细胞融合,多次筛选、检测,最终获得所需杂交瘤细胞;
③将获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,获得大量的特异性抗体。
上述生产抗体的方案中使用的技术手段有__________ ,其中步骤②中获得的杂交瘤细胞具有__________ 等特点;步骤③中为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害,应采取的措施是__________ 。
(1)RT-PCR是指以病毒的RNA为模板通过
(2)利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行检测时,除借助上述RT-PCR技术外,还需要有特异性探针。制作该探针的依据是
(3)除核酸检测外,研究人员还研发了基于病毒蛋白的检测技术,该项技术的关键是生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产该种抗体的大致方案如下:
①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白;
②分离免疫小鼠的B淋巴细胞,并与小鼠的骨髓瘤细胞融合,多次筛选、检测,最终获得所需杂交瘤细胞;
③将获得的杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养,获得大量的特异性抗体。
上述生产抗体的方案中使用的技术手段有
更新时间:2020-07-02 21:35:56
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【推荐1】(一)草莓汁酸甜适口,深受大众喜爱,加工草莓汁时,草莓中的果胶易导致果汁浑浊,影响品质,为探究制作果汁的最佳条件,研究人员进行了实验,结果如下表所示。
请回答下列问题:
(1)草莓细胞中,去掉果胶,会使植物组织变得松散,这是因为果胶具有____________________ 的作用。果胶酶通过__________ 作用促进果胶的水解反应,使草莓细胞彼此容易分开。
(2)生产过程中,既可获得澄清度高的草莓汁,又可减少酶的用量,降低成本的条件组合是第__________ 组。为测定该组条件下处理后的草莓汁中是否还有果胶,可取一定量的草莓汁与等量的__________ 混合。
(3)果胶酶可从某些微生物如________ 中提取,为提高生产效率,可将此酶固定在适宜介质上制成________ 。
(4)在合适条件下,将果胶酶与海藻酸钠混合后,滴加到一定浓度的钙离子溶液中,使液滴形成凝胶固体小球。该过程是对酶进行________ 。
A.吸附 B.包埋 C.装柱 D.洗涤
(二)噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随噬菌体外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白或多肽随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。利用该技术可以获得单克隆抗体(最新技术)。请回答下列问题:
(1)传统单克隆抗体的获得需先对小鼠进行________________________________________ 处理,整个过程中涉及的现代科学技术有________________________________________ 。
(2)外源DNA片段含________ 个游离的磷酸。
(3)噬菌体展示技术获得的抗体还可用于定量检测抗原,如双抗体夹心法,具体原理如下图所示:
分析上图可知,固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合这是由于不同抗体可与同一抗原表面的________ 结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是________________________ ,可通过测定产物量来推测抗原量。
(4)试说出噬菌体展示技术可能的局限性:________________ 。
组别 | 果胶酶用量(mL/kg) | pH | 温度(℃) | 草莓汁透光率(%) |
1 | 0.025 | 2.5 | 35 | 24.55 |
2 | 0.035 | 4.5 | 35 | 96.47 |
3 | 0.035 | 2.5 | 45 | 22.70 |
4 | 0.045 | 3.5 | 35 | 96.47 |
5 | 0.045 | 2.5 | 55 | 13.12 |
请回答下列问题:
(1)草莓细胞中,去掉果胶,会使植物组织变得松散,这是因为果胶具有
(2)生产过程中,既可获得澄清度高的草莓汁,又可减少酶的用量,降低成本的条件组合是第
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(4)在合适条件下,将果胶酶与海藻酸钠混合后,滴加到一定浓度的钙离子溶液中,使液滴形成凝胶固体小球。该过程是对酶进行
A.吸附 B.包埋 C.装柱 D.洗涤
(二)噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随噬菌体外壳蛋白的表达而表达,同时,外源蛋白或多肽随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。利用该技术可以获得单克隆抗体(最新技术)。请回答下列问题:
(1)传统单克隆抗体的获得需先对小鼠进行
(2)外源DNA片段含
(3)噬菌体展示技术获得的抗体还可用于定量检测抗原,如双抗体夹心法,具体原理如下图所示:
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【推荐2】为研制抗病毒A的单克隆抗体,某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A,该处理的目的是诱导小鼠甲产生____ 。
(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤;取小鼠脾脏组织剪碎→用____ 酶处理一段时间→加入培养液制成细胞悬液。
(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞,需要进行筛选,图中筛选1所采用的培养基属于____ (按功能),使用该培养基进行细胞培养的目的是____ 。
(4)筛选2中对于抗体检测呈____ 性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化培养。要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖,可在体外培养或____ 。
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【推荐3】(一)回答与制作果酒和果借有关的问题
(1)欲纯化野生酵母,最简单的分离方法是_________ ,若用果汁酿造果酒,可在果汁中加入果胶酶和果胶甲酯酶将果胶分解成_________ ,从而提高果汁的出汁率。影响果酒风味的主要因素,除了温度、pH、氧气等环境因素外,还有_________ (答出2点即可)。
(2)在果醋发酵过程中,可将醋化杆菌培养物和适量的酒一一水混合物(果酒和蒸馏水按________ 比例混合)混匀后,调pH至______ 再与_______ 的锯末等吸附物混匀,进行发酵。
(3)下列有关果酒和果醋制作过程中,叙述正确的是________ 。
A.若利用果酒进行果醋发酵,需将气体出口开放以排除发酵产生的CO2
B.果酒和果醋发酵过程中,充气口处均需通入无菌空气
C.在使用高产醋化醋杆菌生产果醋时,可以直接加入果汁
D.若果酒发酵结束后进行果醋发酵,需升高发温度
(二)回答与基因工程和克隆技术有关的问题:
(1)目前将目的基因导入植物细胞常用的方法是土壤农杆菌转化法,该方法的基本过程是农杆菌感染植物时,_______ 转移到受体细胞,并将其插入到受体细胞基因组中。若受体细胞是叶肉细胞,则再通过_______ 技术获得转基因植株。
(2)为解决人类治疗时出现如被人体免疫系统识别而产生人抗鼠抗体等问题,科学家们通过构建人免疫蛋白(Ig)转基因小鼠来生产单克隆抗体。构建人免疫蛋白转基因小鼠时,选择自身g基因缺陷的小鼠的受精卵作为受体细胞,导入重组载体,将经筛选好的受体细胞进行________ 培养,________ ,经代孕母鼠分娩后培育、筛选获得人免疫蛋白(g)转基因小鼠。为了获得更多这样的转基因小鼠,采用_______ 技术,该技术用显微操作去掉卵细胞的_______ ;制备单克隆抗体时,用_________ 的方法筛选能够产生特定抗体的杂交细胞。
(1)欲纯化野生酵母,最简单的分离方法是
(2)在果醋发酵过程中,可将醋化杆菌培养物和适量的酒一一水混合物(果酒和蒸馏水按
(3)下列有关果酒和果醋制作过程中,叙述正确的是
A.若利用果酒进行果醋发酵,需将气体出口开放以排除发酵产生的CO2
B.果酒和果醋发酵过程中,充气口处均需通入无菌空气
C.在使用高产醋化醋杆菌生产果醋时,可以直接加入果汁
D.若果酒发酵结束后进行果醋发酵,需升高发温度
(二)回答与基因工程和克隆技术有关的问题:
(1)目前将目的基因导入植物细胞常用的方法是土壤农杆菌转化法,该方法的基本过程是农杆菌感染植物时,
(2)为解决人类治疗时出现如被人体免疫系统识别而产生人抗鼠抗体等问题,科学家们通过构建人免疫蛋白(Ig)转基因小鼠来生产单克隆抗体。构建人免疫蛋白转基因小鼠时,选择自身g基因缺陷的小鼠的受精卵作为受体细胞,导入重组载体,将经筛选好的受体细胞进行
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【推荐1】下图所示为农杆菌转化法示意图。据图请回答下列问题:
(1)基因工程的基本原理是____ 。要获得图中的重组质粒过程用到的3种工具的本质是____ (填“都是蛋白质”或“蛋白质或核酸”或“都是核酸”)。
(2)图中外源基因的黏性末端的形成与___ 酶的作用有关,基因工程中所用的目的基因可以是____ ,也可以从____ 中获得。
(3)为使外源基因在此植物细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的外源基因片段正确插入表达载体的____ 之间。
(4)图中表示基因工程最核心步骤的是____ (写数字);在基因表达载体中,标记基因的作用是_____ 。
(1)基因工程的基本原理是
(2)图中外源基因的黏性末端的形成与
(3)为使外源基因在此植物细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的外源基因片段正确插入表达载体的
(4)图中表示基因工程最核心步骤的是
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【推荐2】科学家借用慢病毒将正常的血红蛋白基因导入患者的造血干细胞,再将“纠正”基因后的造血干细胞回输至患者体内,使其体内部分造血干细胞能长期合成正常的血红蛋白,达到治疗镰刀型细胞贫血症的目的。请回答下列问题:
(1)镰刀型细胞贫血症是血红蛋白基因的某一处序列CCTGAGG突变为CCTGTGG而导致的一种疾病。MstⅡ酶能识别并切割序列CCTGAGG,用MstⅡ酶处理异常的血红蛋白基因可得到3个DNA片段,那么用MstⅡ酶处理正常的血红蛋白基因会得到________ 个DNA片段,可见该酶________ (填“能”或“不能”)用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断。
(2)要利用逆转录的方法合成血红蛋白基因,应从早幼红细胞中提取_________ ,在__________ 酶的作用下合成cDNA;与细胞中的血红蛋白基因相比,合成的cDNA没有__________ 、__________ 和内含子等。
(3)在构建能导入造血干细胞的含血红蛋白基因的表达载体过程中,以____________ 作为工具酶,以__________ 作为载体。
(4)题干所述的基因治疗方法属于___________ (填“体内”或“体外”)基因治疗。
(1)镰刀型细胞贫血症是血红蛋白基因的某一处序列CCTGAGG突变为CCTGTGG而导致的一种疾病。MstⅡ酶能识别并切割序列CCTGAGG,用MstⅡ酶处理异常的血红蛋白基因可得到3个DNA片段,那么用MstⅡ酶处理正常的血红蛋白基因会得到
(2)要利用逆转录的方法合成血红蛋白基因,应从早幼红细胞中提取
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(4)题干所述的基因治疗方法属于
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【推荐3】某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5′末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题:
(1)该团队在将甲插入质粒P0时,使用了_________ 和_________ 酶,质粒P0作为_____ 起作用。
(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________ 和_________ 过程。
(3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的_________ 移入牛的____________ 中、体外培养、胚胎移植等。
(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的____________ (填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。
回答下列问题:
(1)该团队在将甲插入质粒P0时,使用了
(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了
(3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的
(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的
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