菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志,也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对送检样品进行卫生学评估提供证据。下图是某样品培养简化流程图,请分析回答下列问题:
(1)该营养琼脂培养基配制过程中,其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、___________________ 法灭菌等。
(2)实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10 000 r·min-1处理1 min,其目的是___________ 。
样品稀释时取1mL原液加入__________ 中,稀释10倍。涂布器一般是在酒精中浸泡,然后酒精火焰上引燃灭菌,不用灼烧灭菌的原因_________________________________________ 。
(3)本实验用菌落计数的原理是基于______________________ ,运用这种方法统计的结果往往较实际值偏________ ,原因是________________________________________________ 。
通常对获得的纯菌种可以依据菌落的_____________________ 等菌落特征对微生物进行初步鉴定(或分类)。
(4)用菌落计数的具体培养结果如下表。选取菌落数30~300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释梯度的平均菌落数符合此范围,以该培养皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个梯度菌落值在30~300之间,报告结果由二者菌落数比值决定,若比值不大于2,则取平均数;若比值大于2,则报告稀释度较低(稀释次数越多,稀释度越高)的培养皿菌落数。请填写例次2、3中“?”处的菌落总数分别为_____________ 、_____________ 。
(1)该营养琼脂培养基配制过程中,其基本步骤包括按照培养基配方准确计算、称量、溶化、调节pH、
(2)实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10 000 r·min-1处理1 min,其目的是
样品稀释时取1mL原液加入
(3)本实验用菌落计数的原理是基于
通常对获得的纯菌种可以依据菌落的
(4)用菌落计数的具体培养结果如下表。选取菌落数30~300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释梯度的平均菌落数符合此范围,以该培养皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个梯度菌落值在30~300之间,报告结果由二者菌落数比值决定,若比值不大于2,则取平均数;若比值大于2,则报告稀释度较低(稀释次数越多,稀释度越高)的培养皿菌落数。请填写例次2、3中“?”处的菌落总数分别为
例次 | 不同稀释度平均菌落数 | 两稀释度菌 落数之比 | 菌落总数 /\[CFU/mL(g)\] | ||
10-1 | 10-2 | 10-3 | |||
1 | 1 365 | 164 | 20 | — | 16 400 |
2 | 2 760 | 295 | 46 | 1.6 | ? |
3 | 2 890 | 271 | 60 | 2.2 | ? |
更新时间:2021-01-21 18:37:06
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【推荐1】分析有关科学探究资料,回答下列问题
I.土壤中生活着肉眼看不见的细菌、丝状真菌和呈放射状的放线菌,这些微生物的种类和数量极其繁多,其中绝大多数以土壤中的有机物作为营养物质。某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤为实验材料,研究土壤微生物的分解作用,进行了如下实验(见表):
1.该实验对照组是实验组合__________ 。
2.预计本实验可得出的结论是:
①_________________________________ ;
②_______
3.生态系统中微生物的分解作用不能等同于微生物的细胞呼吸,其理由是:_____________________________________________________________________
II.为了进一步研究土壤微生物对淀粉的分解作用,请利用下列实验材料和用具,设计实验并预期实验结果。实验材料和用具:土壤浸出液、蒸馏水、淀粉糊、恒温箱、酒精灯、烧杯若干、试管若干、碘液、班氏试剂等。
4.作出假设:
______________________________________________________________________________ 。
5.主要实验步骤:
①取两个大小相同的烧杯,编号为A、B,放入___________________ 。在A烧杯中加入适量的土壤浸出液;B烧杯中加入_________________________________ 。
②在室温(20℃左右)下放置7d后,分别取A、B烧杯中的溶液20 mL,各加入两支试管中,分别编号为A1、A2,B1、B2。
③在A1、B1试管中加入________________________ ;在A2、B2试管中加入________________ ,并在酒精灯上加热至沸。
④观察试管中溶液的颜色变化,记录实验结果。
6.实验现象及结论预测:
①如果假设成立,则实验现象是:____________________________________________
②如果假设不成立,则实验现象是:___________________________________________
I.土壤中生活着肉眼看不见的细菌、丝状真菌和呈放射状的放线菌,这些微生物的种类和数量极其繁多,其中绝大多数以土壤中的有机物作为营养物质。某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤为实验材料,研究土壤微生物的分解作用,进行了如下实验(见表):
1.该实验对照组是实验组合
2.预计本实验可得出的结论是:
①
②
3.生态系统中微生物的分解作用不能等同于微生物的细胞呼吸,其理由是:
II.为了进一步研究土壤微生物对淀粉的分解作用,请利用下列实验材料和用具,设计实验并预期实验结果。实验材料和用具:土壤浸出液、蒸馏水、淀粉糊、恒温箱、酒精灯、烧杯若干、试管若干、碘液、班氏试剂等。
4.作出假设:
5.主要实验步骤:
①取两个大小相同的烧杯,编号为A、B,放入
②在室温(20℃左右)下放置7d后,分别取A、B烧杯中的溶液20 mL,各加入两支试管中,分别编号为A1、A2,B1、B2。
③在A1、B1试管中加入
④观察试管中溶液的颜色变化,记录实验结果。
6.实验现象及结论预测:
①如果假设成立,则实验现象是:
②如果假设不成立,则实验现象是:
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非选择题-实验题
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(0.4)
名校
【推荐2】酿酒就是让糖类通过发酵形成酒精的过程,糖类是怎样形成酒精的呢?十九世纪中叶,微生物学家巴士德认为,糖类变成酒精是完整酵母菌细胞代谢活动的结果;而化学家李比希则认为,糖类变成酒精是一种化学反应,与完整酵母菌活动无关,仅仅需要酵母菌细胞中的某些物质的参与即可。为了研究这个问题,请用所提供的实验材料与用具,写出实验假设,并在给出的实验步骤的基础上,继续完成实验步骤的设计和预测可能的实验结果,得出相应的结论。
实验材料:活酵母菌细胞,葡萄糖溶液,蒸馏水,专用的酒精测试仪,研钵,漏斗,试管,量筒等必要材料。
实验假设:______ 。
实验步骤:
第一步:将部分活酵母细胞进行研磨,过滤得到提取液;
第二步:取两支试管,标号为A、B,分别在各试管中加入_________________ ;
第三步:在A试管中加入___________________________________________ ,
在B试管中加入___________________________________________ ;
第四步:在_______ 的条件下,其他条件适宜且相同,培养一段时间后,用专用的酒精测试仪检测两试管内是否有酒精生成。
实验结果预测及相应结论:
①A试管中能检测到酒精,B试管中不能检测到酒精,说明________________ 。
②A、B试管中都能检测到酒精,说明____________________________ 。
实验材料:活酵母菌细胞,葡萄糖溶液,蒸馏水,专用的酒精测试仪,研钵,漏斗,试管,量筒等必要材料。
实验假设:
实验步骤:
第一步:将部分活酵母细胞进行研磨,过滤得到提取液;
第二步:取两支试管,标号为A、B,分别在各试管中加入
第三步:在A试管中加入
在B试管中加入
第四步:在
实验结果预测及相应结论:
①A试管中能检测到酒精,B试管中不能检测到酒精,说明
②A、B试管中都能检测到酒精,说明
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非选择题-解答题
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(0.4)
【推荐3】回答下列(一)(二)小题:
(一)在农村,泡菜的制作方法是:先对新鲜的蔬菜进行整理、清洁,然后放入彻底清洗并用白酒擦过的泡菜坛中,再向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处,适宜环境温度为28~30 ℃。请回答:
(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是________ 。
(2)此过程中起主要作用的微生物是________ (A.乳酸菌+假丝酵母 B.乳酸菌+醋化醋杆菌 C.酵母菌+霉菌 D.酵母菌+醋化醋杆菌),这些微生物利用蔬菜中的糖类和其他物质进行发酵,产物有____________ 等,其中也包括亚硝酸。
(3)某同学想测定制作的泡菜中亚硝酸盐的含量,需要先用亚硝酸钠标准溶液绘制______________ ,再通过测定泡菜匀浆的______________ 进行计算。
(4)若要获得优良乳酸菌菌种,纯化菌种时,更易分离得到单菌落的接种方法是________________ ,培养时还需提供________ 条件。
(二)干扰素是抗病毒的特效药,干扰素基因缺失的个体,免疫力严重下降。科学家设计了以下流程,利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。请回答:
(1)上图中进行的是________ (填“体内”或“体外”)基因治疗,①过程中利用的生物工程技术手段称为________ 。若导入的干扰素基因序列为已知,则可通过________ 获取。
(2)ES细胞是由囊胚中的____________ 分离出来的一类细胞,具有____________ 性,可以将其培养成人体各种组织器官。在培养过程中常被用作饲养层细胞的一般是________________________ 。
(3)下列关于上述操作中的叙述,正确的是________ 。
A.①②操作体现了上皮细胞具有全能性
B.③过程可以用农杆菌转化法进行基因导入
C.完成基因导入的细胞就具有了合成并分泌干扰素的能力
D.基因治疗依据的变异原理是基因重组
(一)在农村,泡菜的制作方法是:先对新鲜的蔬菜进行整理、清洁,然后放入彻底清洗并用白酒擦过的泡菜坛中,再向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处,适宜环境温度为28~30 ℃。请回答:
(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是
(2)此过程中起主要作用的微生物是
(3)某同学想测定制作的泡菜中亚硝酸盐的含量,需要先用亚硝酸钠标准溶液绘制
(4)若要获得优良乳酸菌菌种,纯化菌种时,更易分离得到单菌落的接种方法是
(二)干扰素是抗病毒的特效药,干扰素基因缺失的个体,免疫力严重下降。科学家设计了以下流程,利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。请回答:
(1)上图中进行的是
(2)ES细胞是由囊胚中的
(3)下列关于上述操作中的叙述,正确的是
A.①②操作体现了上皮细胞具有全能性
B.③过程可以用农杆菌转化法进行基因导入
C.完成基因导入的细胞就具有了合成并分泌干扰素的能力
D.基因治疗依据的变异原理是基因重组
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【推荐1】为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。
(1)配制好的培养基灭菌通常可以使用_________ 法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是_______________________________ 。
(2)同学甲进行过程④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是___________ ;推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是________________ ;在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是____________________ 。
(3)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作:将1mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为________________ 。
(4)步骤⑤需要振荡培养其目的是提高培养液溶氧量,同时使__________ ,提高营养物质利用率。
(5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是____________________ 。
(1)配制好的培养基灭菌通常可以使用
(2)同学甲进行过程④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是
(3)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作:将1mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为
(4)步骤⑤需要振荡培养其目的是提高培养液溶氧量,同时使
(5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是
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(0.4)
【推荐2】研究发现,感染毛霉能诱导脐橙产生具有抗病活性的红色物质(CPRE)。为探究CPRE能否替代化学杀菌剂保护采收后的脐橙,科研人员进行了研究。
(1)据右表配方配制培养基,溶解后分装到锥形瓶中,用______ 法灭菌后冷却至50℃左右。分别加入浓度为25、50、100、200μg/mL的CPRE无菌溶液,摇匀备用。以无菌水作为对照。本培养基的氮源来自于______ 。
(2)将含不同浓度CPRE的培养基分别涂于载玻片上凝固后,接种20μL指状青霉孢子悬浮液,在适宜条件下培养一段时间后,用显微镜观察孢子萌发情况。各组萌发率的计算公式为:视野内萌发孢子数/视野内孢子总数×100%;根据萌发率计算实验组的萌发抑制率,计算公式为______ 。统计结果表明CPRE能抑制指状青霉孢子萌发,且随浓度的增加抑制效果增强。
(3)将直径0.5cm的指状青霉菌饼反贴在含不同浓度CPRE的培养基上,每个培养皿贴3块,适宜条件下培养,每24h测量菌饼直径(单位:cm),计算平均值。结果见下表。
实验结果说明______ 。
(4)为进一步研究CPRE抑制指状青霉的机理,研究者进行了如下检测。
①检测不同浓度CPRE处理,菌丝几丁质(真菌细胞壁的主要成分)含量和胞外AKP酶活性,结果如图。
注:AKP酶(碱性磷酸酶)由细胞合成后分泌到细胞壁与细胞膜的间隙。
图1和图2的结果表明,CPRE改变了细胞壁的结构和功能,判断依据是__________ 。
②取指状青霉菌丝用碘化丙啶(与DNA结合产生红色荧光的染料)进行染色。结果为____________ ,证明CPRE破坏了细胞膜的完整性。
(5)请结合以上研究分析说明CPRE抵御指状青霉感染的作用机制,并阐述脐橙受到“伤害”时才会启动防御机制的意义_________ 。
(1)据右表配方配制培养基,溶解后分装到锥形瓶中,用
马铃薯培养基配方 | |
成分 | 含量 |
马铃薯 | 200g |
葡萄糖 | 20g |
琼脂 | 15-20g |
蒸馏水 | 定容至1000mL |
(3)将直径0.5cm的指状青霉菌饼反贴在含不同浓度CPRE的培养基上,每个培养皿贴3块,适宜条件下培养,每24h测量菌饼直径(单位:cm),计算平均值。结果见下表。
浓度(μg/ml) 时间 | 0 | 25 | 50 | 100 | 200 |
第1天 | 1.1 | 0.8 | 0.7 | 0.51 | 0.51 |
第2天 | 1.9 | 1.3 | 0.7 | 0.68 | 0.51 |
第3天 | 2.2 | 1.7 | 0.9 | 0.68 | 0.52 |
(4)为进一步研究CPRE抑制指状青霉的机理,研究者进行了如下检测。
①检测不同浓度CPRE处理,菌丝几丁质(真菌细胞壁的主要成分)含量和胞外AKP酶活性,结果如图。
注:AKP酶(碱性磷酸酶)由细胞合成后分泌到细胞壁与细胞膜的间隙。
图1和图2的结果表明,CPRE改变了细胞壁的结构和功能,判断依据是
②取指状青霉菌丝用碘化丙啶(与DNA结合产生红色荧光的染料)进行染色。结果为
(5)请结合以上研究分析说明CPRE抵御指状青霉感染的作用机制,并阐述脐橙受到“伤害”时才会启动防御机制的意义
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(0.4)
【推荐3】西番莲果皮含有丰富的膳食纤维、果胶、多酚类等对人有益的活性成分。用西番莲果皮作发酵原料,研究酵母菌、复合乳杆菌二步发酵工艺,生产酵母菌和复合乳杆菌活菌数高、总酚保留好、风味醇和的果皮浆。
(1)酵母菌和复合乳杆菌单独发酵时的有关曲线见下图。
①实验中,可以通过_____________ 方法来推测样品中酵母菌和复合乳杆菌的活菌数,该方法得到的数值往往比实际活菌数低,其原因是_________________ 。
②在单独培养条件下,生长曲线更接近S型的是_____________ 菌。
③分析左图相关曲线,下列叙述正确的是_______________ 。
A.在T时,酵母菌的呼吸类型开始由有氧呼吸向无氧呼吸转变
B.T时后,酵母菌的无氧呼吸产生ATP的速率始终稳定
C.在0时和T时分别测定培养液的温度,后者要高于前者
D.在0时和T时分别抽样,滴加酸性重铬酸钾溶液,后者橙色更深
(2)依据上述试验结果,采用二步法发酵。第一步:在西番莲果皮中加入酵母菌密封发酵8h:第二步:随后加入复合乳杆菌密封发酵24h,发酵结束时测定发酵物的相关指标,结果如下表。下列叙述正确的是(多选)_____________________ 。
A.二步法发酵复合乳杆菌生长曲线的K值与单独培养时相同
B.第一步酵母菌发酵为复合乳杆菌创造了杂菌少、氧含量低等良好条件
C.第一步和第二步发酵液的pH均会下降的原因由同一反应产物引起
D.二步法可生产酵母菌和复合乳杆菌活菌数高、总酚保留好的果皮浆
(3)将酵母菌和复合乳杆菌同时加入西番莲果皮中进行封闭发酵为一步法发酵。分析一步法和二步法的发酵过程,下列叙述正确的是(多选)_______________ 。
A.一步法起始阶段酵母菌和复合乳杆菌可同时快速增殖
B.一步法末期酵母菌和复合乳杆菌都进行有丝分裂
C.二步法可以优先确保酵母菌的大量增殖
D.二步法可以兼顾酵母菌和复合乳杆菌的生长条件
(1)酵母菌和复合乳杆菌单独发酵时的有关曲线见下图。
①实验中,可以通过
②在单独培养条件下,生长曲线更接近S型的是
③分析左图相关曲线,下列叙述正确的是
A.在T时,酵母菌的呼吸类型开始由有氧呼吸向无氧呼吸转变
B.T时后,酵母菌的无氧呼吸产生ATP的速率始终稳定
C.在0时和T时分别测定培养液的温度,后者要高于前者
D.在0时和T时分别抽样,滴加酸性重铬酸钾溶液,后者橙色更深
(2)依据上述试验结果,采用二步法发酵。第一步:在西番莲果皮中加入酵母菌密封发酵8h:第二步:随后加入复合乳杆菌密封发酵24h,发酵结束时测定发酵物的相关指标,结果如下表。下列叙述正确的是(多选)
指标 组别 | 酵母菌发酵时间/h | 总发酵时间h | 酵母菌活菌数lgcfu/mL | 复合乳杆菌活菌数Igcfu/mL | 总糖量mg/mL | 总酚量 |
对照组 | 0 | 0 | 0 | 0 | 70.92 | 20.36 |
二步法发酵组 | 8 | 32 | 7.48 | 8.85 | 15.17 | 24.25 |
A.二步法发酵复合乳杆菌生长曲线的K值与单独培养时相同
B.第一步酵母菌发酵为复合乳杆菌创造了杂菌少、氧含量低等良好条件
C.第一步和第二步发酵液的pH均会下降的原因由同一反应产物引起
D.二步法可生产酵母菌和复合乳杆菌活菌数高、总酚保留好的果皮浆
(3)将酵母菌和复合乳杆菌同时加入西番莲果皮中进行封闭发酵为一步法发酵。分析一步法和二步法的发酵过程,下列叙述正确的是(多选)
A.一步法起始阶段酵母菌和复合乳杆菌可同时快速增殖
B.一步法末期酵母菌和复合乳杆菌都进行有丝分裂
C.二步法可以优先确保酵母菌的大量增殖
D.二步法可以兼顾酵母菌和复合乳杆菌的生长条件
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