组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 目的基因的获取
题型:非选择题-解答题 难度:0.4 引用次数:610 题号:13278175
新型冠状病毒是一种RNA病毒,病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原。为预防病毒的传播,研究人员努力做好疫苗的研发及检测工作。请问答下列问题:
(1)研究人员研发DNA疫苗过程的主要操作步骤如图所示。

①阶段1表示目的基因的构建,这种获取目的基因的方法是________。若备选质粒被某限制酶切割后产生的单链末端是AGCT-,切割位点在A与A之间,则该限制酶的识别序列最可能是________
②图中筛选含目的基因的质粒及受体细胞的阶段分别是________
(2)有人说利用新冠病毒S蛋白的mRNA制备的mRNA疫苗,注射人体后可以通过逆转录,将病毒的基因嵌入人体染色体中。请判断这种说法是否正确并简述理由。________
(3)腺病毒载体疫苗是高效的重组病毒表达系统,可在哺乳动物细胞中高水平表达目的蛋白。该疫苗使用的是有遗传缺陷(不会整合到宿主细胞染色体的DNA上)的腺病毒,这种重组腺病毒疫苗的必需具备的条件是________(至少写出两点)。
(4)血清抗体检测可以作为核酸检测的补充或协同。常用的血清抗体检测方法的原理如下图所示,待检血样加到试纸条一端的样本垫,通过毛细作用向前移动,金标垫上吸附有胶体金(聚集后呈红色)标记的特异性抗原I,若样本中含有病毒特异性抗体,则二者相互作用形成金标记抗原I-抗体复合物,然后继续向前移动,与固定在检测线(T线)的抗原II结合而被截留,聚集在检测线上,产生红色条带。游离的金标记抗原I则继续向前到达质量控制区(C线),与此处固定的特异性抗原I的抗体(图中简称抗抗体)结合,从而使C线发生颜色变化。
在对新型冠状病毒抗体进行检测时,将血样与稀释剂混合后,直接添加到样本垫等待15min左右,就可以通过T线与C线的颜色来判断结果。T线与C线都变红色,则为阳性,说明血样中含有新型冠状病毒特异性抗体。

①检测新冠病毒抗体时,采用的抗原I和II为同种抗原,可选________作为抗原。
②血清抗体检测方法的灵敏度高,是因为检测过程中反复进行了________的特异性结合。根据文中叙述,若检测结果为阳性,则这种结合有________次。若待测血样中无新型冠状病毒特异性抗体,则为阴性,显色结果应为________

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【推荐1】CRM1是一种核转运蛋白,由CRM1基因控制产生,转运含有NES序列的货物蛋白。科学研究发现,肿瘤细胞中CRM1基因过度表达,含有NES序列的肿瘤抑制因子被过量地转运至细胞质,使得它们无法在细胞核内发挥正常功能,会促进肿瘤的发生及生长。为探究CRM1的运输机制及肿瘤的治疗,科学家进行了相关研究。请回答下列问题:
(1)研究人员利用PCR技术大量扩增CRM1基因,需要根据______设计两种引物,引物的作用是_______
(2)CRM1C528S是CRM1突变体,不具有运输能力,GST-NES为某种肿瘤抑制因子,RanGTP蛋白可能与货物蛋白的转运有关,研究人员利用上述物质设计实验进行跨膜模拟,结果发现只有③组实现了对GST-NES的跨膜转运,据此可推断________
   
(3)科学家利用计算机成功筛选出了与货物蛋白结构相似的小分子KPT,并将其制备成抑制肿瘤细胞药物,推测KPT的作用机理是________。请设计实验验证上述推论,写出实验思路和预期结果。(材料:肿瘤小鼠模型若干只、正常小鼠模型若干只、小分子KPT。注:药物处理方法与肿瘤的具体检测方法不做要求)实验思路:__________。预期结果:__________
2024-03-14更新 | 69次组卷
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【推荐2】新冠病毒是一种新发现的病毒,主要攻击人体的呼吸道和肺部细胞,这是因为病毒囊膜表面棘突蛋白S能与呼吸道或肺部细胞的细胞膜表面的特异性受体(ACE2)结合,囊膜与细胞膜融合,病毒核酸和相关的酶进入细胞,过程如图一所示。新冠肺炎爆发后,各国科学家都在争分夺秒地加紧研制疫苗。我国科学家研制的新冠病毒灭活疫苗已经开始免费为防疫一线人员进行接种。下图二是新冠病毒灭活疫苗制剂引发人体免疫效应的部分示意图,图中①~⑤代表细胞。请回答下列问题:

(1)新冠病毒囊膜的主要化学成分是_______。病毒核酸侵入细胞的过程依赖于细胞膜的_______性。有些细胞的膜表面没有能与病毒棘突蛋白S结合的受体,体现了细胞分化的根本原因是_______
(2)新冠病毒中的核酸是单股正链RNA分子,进行核酸检测时,为了获得更多的样本,需要采用PCR技术。与普通PCR相比,首先需要进行_______,然后通过PCR进行扩增。扩增后,再采用_______方法进行检测。
(3)灭活疫苗的制备需要经过细胞培养、病毒培养、灭活、纯化等步骤,细胞培养的目的是_______。细胞培养需要在二氧化碳培养箱中进行,二氧化碳的作用是_______
(4)图二中物质A是_______,细胞④是_______
(5)灭活疫苗一般要接种两次,在距第一次接种半个月到一个月再接种第二次,接种第二次之后体内产生的抗体比第一次要多得多。这是因为第一次接种后,体内产生了_______,在第二次接种后,在抗原的刺激下,该细胞大量增殖分化为_______,从而产生更多的抗体。在接种疫苗时,医生要求观察半小时后方可离开,这是为了防止发生_______
2021-03-03更新 | 1169次组卷
非选择题-解答题 | 较难 (0.4)
名校
【推荐3】中国T2DM(胰岛β细胞功能衰退型糖尿病)的发病率由1979年的1.00%上升2019年的4.37%,补充胰岛素是控制和缓解病情的重要途径。胰岛素(由 α、β两条多肽链组成)的生产由提取动物胰岛素发展到了利用基因工程生产重组人胰岛素。

(1)构建重组质粒时(如图所示),为避免目的基因 任意连接和运载体的自身环化应选用_____酶切处理目的基因和运载体。构建完 成的表达载体除了目的基因、标记基因以外,还必须有_____等组件。
(2)利用大肠杆菌生产重组人胰岛素时,构建表达载体的目的基因应从_____文库中获取,重组大肠杆菌合成的人胰岛素原没有活性,需用_____酶将其加工成含α、β两条多肽链的胰岛素。
(3)利用奶牛设计乳腺生物反应器生产人胰岛素,为使人胰岛素基因在奶牛乳腺中特异表达,构建表 达载体时应将目的基因与_____的启动子等调控组件重组在一起,并选用_____为受体细胞。
(4)重组人胰岛素分子容易聚合而影响作用效果,可将胰岛素分子的氨基酸序列及结构进行局部调整 形成胰岛素类似物加以避免,请根据上述设想,补充完善其基本研发流程:预期蛋白质功能→设计预期蛋白质的空间结构→推测氨基酸序列→_____→构建表达载体,转基因获得胰岛素类似物。
2019-12-27更新 | 322次组卷
共计 平均难度:一般