新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合,侵入人体,引起肺炎。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵,故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。下图为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/17/de557802-016c-43de-b9f1-fa379c05d4fe.png?resizew=291)
(1)在制备抗S蛋白单克隆抗体的过程中,先用纯化的______ 对小鼠进行免疫,并从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。请完善以小鼠的脾脏为材料制备细胞悬液的主要实验步骤:对新鲜脾脏进行处理,__________________ 。
(2)将提取的B淋巴细胞与小鼠的______ 细胞融合,用HAT培养基筛选获得的杂交瘤细胞还需要进行______ 和______ ,经多次筛选,获得分泌抗S蛋白单克隆抗体的细胞。
(3)将能分泌抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或______ 。在体外培养时,除需满足营养条件外,还需要满足的其他条件有__________________ (答出两点即可)。
(4)与从动物血清中分离出的抗体相比,抗S蛋白单克隆抗体的优势体现在:________________________ (答出两点即可)。
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(1)在制备抗S蛋白单克隆抗体的过程中,先用纯化的
(2)将提取的B淋巴细胞与小鼠的
(3)将能分泌抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或
(4)与从动物血清中分离出的抗体相比,抗S蛋白单克隆抗体的优势体现在:
更新时间:2021-07-17 18:24:00
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【推荐1】科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发许多动物细胞的分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下面的问题:
(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体,一般选用的是____________ 和_____________ 融合。
(2)有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/9/27/2558695294582784/2560193428226048/STEM/5578a09ec89f4ca7bbf93d752097188f.png?resizew=355)
①酶A是指________ ,酶B是指_______________ 。
②对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的原因是________________ ;Ⅲ所指的细胞具有特点是__________________ 。
(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体,一般选用的是
(2)有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/9/27/2558695294582784/2560193428226048/STEM/5578a09ec89f4ca7bbf93d752097188f.png?resizew=355)
①酶A是指
②对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的原因是
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名校
【推荐2】人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗 HPV 的单克隆抗体可以准确检测 出 HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以 HPV 衣壳蛋白为抗原制备出单克隆 抗体的过程,请据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/11/22/2339384039661568/2346424466538497/STEM/33247ebb98ec428791e4ed7ef8b77881.png?resizew=358)
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有____________________________ 。
(2)杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是____________________ ,在HAT 培养基上存活的细胞可能包括_______ (填下列序号)。
①无抗体分泌的细胞 ②抗 HPV 抗体的分泌细胞 ③其他无关抗体的分泌细胞
(3)对于抗 HPV 抗体检测呈___ (阴、阳)性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化, 杂交瘤细胞的扩大培养,既可在体外培养,也可注射到小鼠_____ 内培养。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/11/22/2339384039661568/2346424466538497/STEM/33247ebb98ec428791e4ed7ef8b77881.png?resizew=358)
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有
(2)杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是
①无抗体分泌的细胞 ②抗 HPV 抗体的分泌细胞 ③其他无关抗体的分泌细胞
(3)对于抗 HPV 抗体检测呈
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名校
【推荐3】早期,科学工作者从被HIV感染后自愈者的体内获取相应免疫细胞,使之与骨髓瘤细胞结合,生产HIV的抗体,具体过程见下图1:_______________ ;要获得单克隆抗体,上图1过程最关键的操作要点是:首先筛选出_________________ ;再进一步筛选出____________________ 。
(2)随后,图2所示的技术被运用到了HIV疫苗的研制工作中,科学家用该方法产生的疫苗进行预防接种,该技术的核心步骤为[ ]______ ([ ]中填图2 中序号,__上填步骤名称),图中①过程需要_________ 酶的参与,②过程需要的工具酶为________ ,该过程提取疫苗的化学本质为____ 。与上述图1方法相比,其关键的优势是_____________________ 。
(3)为获取图2中的DNA片段(目的基因),科学家需要根据_______________ 设计引物,若有a条起始的RNA片段,经过图2的①过程,再进行PCR循环30次,理论上需要引
物___________ 个。
(4)HIV能通过细胞表面的CD4(一种受体蛋白)识别T细胞,如果给AIDS患者大量注射用CD4修饰过的红细胞,红细胞也会被HIV识别、入侵。科学家认为红细胞会成为HIV的“陷阱细胞”,可以为治疗AIDS提供新的思路,这种认知的理由是哺乳动物成熟红细胞的特点是_________________ ,这种特点使得入侵的HIV__________ 。
(2)随后,图2所示的技术被运用到了HIV疫苗的研制工作中,科学家用该方法产生的疫苗进行预防接种,该技术的核心步骤为[ ]
(3)为获取图2中的DNA片段(目的基因),科学家需要根据
物
(4)HIV能通过细胞表面的CD4(一种受体蛋白)识别T细胞,如果给AIDS患者大量注射用CD4修饰过的红细胞,红细胞也会被HIV识别、入侵。科学家认为红细胞会成为HIV的“陷阱细胞”,可以为治疗AIDS提供新的思路,这种认知的理由是哺乳动物成熟红细胞的特点是
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解题方法
【推荐1】下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图,有关叙述错误的是( )
A.过程①细胞培养液中通常需要添加血清等物质 |
B.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 |
C.过程③后,胚胎分割获得同卵双胎属于无性繁殖 |
D.过程④胚胎移植前,需对代孕牛进行选择和处理 |
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【推荐2】科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛,如果要加速转基因奶牛的繁育,可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示),请结合图示回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/19/f327ddac-9eca-42c0-a14b-695400d5c5b4.png?resizew=520)
(1)在进行细胞培养之前,要对动物组织用胰蛋白酶进行处理分散成_____ 在对培养过程中通常还要在培养液中添加适量的_____ 以防止培养过程中污染
(2)用于核移植的供体细胞一般都选用传代_____ 代以内的细胞,形成重组细胞时应选用_____ 期的卵母细胞
(3)通过以上过程获得奶牛属于_____ 生殖,其乳汁中会产生人的生长激素,这样的动物被称为_____
(4)图示培养出犊牛的过程被称为细胞工程中的_____ 技术,转基因奶牛的克隆成功,说明了动物_____ 具有全能性
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(1)在进行细胞培养之前,要对动物组织用胰蛋白酶进行处理分散成
(2)用于核移植的供体细胞一般都选用传代
(3)通过以上过程获得奶牛属于
(4)图示培养出犊牛的过程被称为细胞工程中的
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名校
【推荐3】非洲猪瘟是由ASFV(一种双链DNA病毒)感染猪引起的烈性传染病、某研究小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪体细胞中,利用核移植技术培育转基因克隆猪,从而得到自动产生ASFV抗体的个体,其过程如图所示。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/1/5/38f140b9-37d0-4dab-8e1e-7b20d8739e85.png?resizew=714)
(1)图中步骤①采用的技术手段是__________________ ,进行步骤③时,受体C猪子宫对外来胚胎基本上__________________ ,从而为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(2)B猪体细胞在培养瓶中培养时,除必须保证环境是无菌、无毒外,还必须定期____ ,以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后,需要分瓶再继续培养,分瓶后的培养过程称为_________________ .
(3)由于目的基因不能直接导入受体细胞,因此需要构建______________________ ,该过程采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和质粒,其优点是________________________________ 。
(4)利用抗原—抗体杂交技术判断 D 猪是否产生 ASFV 抗体,使用的抗原物质最好是____________________ 。该抗体也可以使用杂交瘤技术来制备,通常情况下,杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和_________________________________ 细胞融合获得的。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/1/5/38f140b9-37d0-4dab-8e1e-7b20d8739e85.png?resizew=714)
(1)图中步骤①采用的技术手段是
(2)B猪体细胞在培养瓶中培养时,除必须保证环境是无菌、无毒外,还必须定期
(3)由于目的基因不能直接导入受体细胞,因此需要构建
(4)利用抗原—抗体杂交技术判断 D 猪是否产生 ASFV 抗体,使用的抗原物质最好是
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名校
【推荐1】对新型冠状病毒进行核酸检测其实就是对新型冠状病毒的遗传物质RNA进行检测。目前主流方法为实时荧光RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)法。为检测某人是否感染了新型冠状病毒,需要进行以下相关操作:①分析PCR扩增结果;②从组织样本中提取RNA;③RT(逆转录)成cDNA;④采集样本(咽拭子或鼻拭子);⑤利用PCR扩增DNA片段。回答下列问题:
(1)若要得到正确的核酸检测结果,正确的操作顺序应该是_____ (用数字序号表示)。核酸检测样本多采集于咽、鼻,这些部位存在多种微生物,提取物中核酸种类可能有多种,但通过PCR技术可专一地对新型冠状病毒的核酸序列进行扩增,原因是_____ 。
(2)操作⑤中,需设计2种引物,需要提供引物的原因是_____ ;反应体系中加入dATP、dTTP、dCTP和dGTP的作用是_____ ;复性时温度的设定是该步操作成败的关键,而复性的作用是_____ 。
(3)PCR扩增时,在加入引物的同时还需加入一个特异性荧光探针,其两端分别标记一个报告基团和一个淬灭基团,如图所示:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;_____ 在催化子链延伸时,还具有外切酶活性,它可以沿着_____ (填“5'→3'”或“3'→5'”)方向将探针酶切,使报告基团和淬灭基团分离,随着DNA扩增次数的增加,荧光的强度会逐渐增大,从而实现荧光信号的变化与_____ 的形成完全同步。
(4)除了荧光检测法,还可以通过_____ 法分析PCR扩增结果。
(1)若要得到正确的核酸检测结果,正确的操作顺序应该是
(2)操作⑤中,需设计2种引物,需要提供引物的原因是
(3)PCR扩增时,在加入引物的同时还需加入一个特异性荧光探针,其两端分别标记一个报告基团和一个淬灭基团,如图所示:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/5/31/40f3a793-05fe-4909-8fbc-32c1078f2da9.png?resizew=545)
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;
(4)除了荧光检测法,还可以通过
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【推荐2】新冠病毒的S蛋白是其特征性抗原蛋白,含有多个不同的抗原决定簇,可分别刺激机体产生抗体A、抗体B等多种抗体。各种抗体和抗原的结合特性如图1所示,胶体金(红色)可用来作标记物。新冠病毒抗原检测试纸条的构成如图2所示,当待测样品流经硝酸纤维素膜时,胶体金在膜上大量聚集会出现肉眼可见的红色。根据检测线和质检线的颜色变化情况,可判断被检测者是否感染新冠病毒。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/7/28/d8f00d23-5a68-4aaa-a355-81166d90c0b1.png?resizew=621)
(1)新冠病毒抗原检测利用的免疫学原理是____________________ 。制备抗原检测试纸条要以S蛋白作为抗原制备多种单克隆抗体,还需以__________ 为抗原制备单克隆抗体C。在单克隆抗体制备过程中,将已免疫的小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后,先用选择培养基筛选,再通过____________________ ,筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞,扩大培养后制备单克隆抗体。
(2)将某待测者的样本提取液滴加在样品垫上,结果检测线处不出现红色,质检线处出现红色,则特异性结合共发生了__________ 处,该结果说明被检测者____________________ 。
(3)若要制备新冠病毒抗体A检测试纸条,则应在连接垫上放置被胶体金标记的S蛋白,检测线上固定的抗体是__________ ,质检线上固定的抗体是__________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/7/28/d8f00d23-5a68-4aaa-a355-81166d90c0b1.png?resizew=621)
(1)新冠病毒抗原检测利用的免疫学原理是
(2)将某待测者的样本提取液滴加在样品垫上,结果检测线处不出现红色,质检线处出现红色,则特异性结合共发生了
(3)若要制备新冠病毒抗体A检测试纸条,则应在连接垫上放置被胶体金标记的S蛋白,检测线上固定的抗体是
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(0.65)
【推荐3】接种疫苗是预防新冠肺炎最有效的措施,几种不同新冠疫苗生产的途径及原理如下图所示,回答下列问题∶
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/17/2960312516460544/2961309983178752/STEM/1d8289eb-0e91-4545-b578-3d87be186415.png?resizew=471)
(1)传统疫苗生产通常采用_____ 体外培养病毒使其增殖。接种加强针可明显增加相应_____ 的浓度和_____ 的数量,达到预防新冠病毒感染的效果。
(2)我国提出序贯免疫加强接种方案,如人们接种两剂灭活疫苗满六个月后,第三针加强针可接种腺病毒载体疫苗进行加强,序贯免疫的优点有_____ 。(答出两点即可)
(3)感染过腺病毒的人接种腺病毒载体疫苗效果较差,原因可能是_____ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/4/17/2960312516460544/2961309983178752/STEM/1d8289eb-0e91-4545-b578-3d87be186415.png?resizew=471)
(1)传统疫苗生产通常采用
(2)我国提出序贯免疫加强接种方案,如人们接种两剂灭活疫苗满六个月后,第三针加强针可接种腺病毒载体疫苗进行加强,序贯免疫的优点有
(3)感染过腺病毒的人接种腺病毒载体疫苗效果较差,原因可能是
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