dMAb技术是一种通过DNA编码产生单克隆抗体的技术,比传统的单克隆抗体制备方法有更多的发展潜力。下图是dMAb技术在埃博拉病毒感染疾病的临床研究中的操作流程。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/7/18/2767109102911488/2767800881545216/STEM/5d865025c67549b18c3c19d2455e3980.png?resizew=637)
(1)通过抗体结构1和结构2的________ 序列,人工合成目的基因1、2,然后利用_________ 方法获得大量目的基因1、2。
(2)如图所示,使用___________ 酶将目的基因1、2与质粒结合,形成表达载体,利用_______ 方法导入患者细胞。
(3)患者体内的_____________ 细胞中表达出单克隆抗体,经___________ 运输与埃博拉病毒结合。
(4)与传统利用杂交瘤细胞产生单克隆抗体的技术相比,dMAb技术在抗体的制备上有何优势_________ 。(请列举两点)
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(1)通过抗体结构1和结构2的
(2)如图所示,使用
(3)患者体内的
(4)与传统利用杂交瘤细胞产生单克隆抗体的技术相比,dMAb技术在抗体的制备上有何优势
更新时间:2021-07-21 22:24:25
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名校
【推荐1】人血清白蛋白(HSA)是由肝脏细胞合成的,具有重要的医用价值,原本只能从血清中提取,现利用基因工程的方法生产HSA.请结合相关知识回答下列问题。
(1)科研人员利用人肝细胞中的_________ 构建出cDNA文库,通过该方法合成的DNA含量较少,可通过PCR进行扩增获取较多的DNA分子,根据该基因的序列(5'-CTAG-GTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG-3'),应选择_________ 作为PCR的引物。
A.引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3',引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
B.引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3',引物Ⅱ是5'-TCTCCAACGATCGG-3'
C.引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3',引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3'
D.引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3',引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
为使HSA基因能与质粒正确连接,根据图甲、乙、丙,应选择限制酶_________ 切割目的基因。
(2)PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测,常采用电泳的方法。电泳一段时间后进行检测,若电泳带有_________ 条,且与DNA Marker对比,产物大小正确,表明PCR扩增成功。
(3)目的基因与质粒连接后可以导入到不同的受体细胞中进行表达。若导入到原核生物大肠杆菌中,可用CaCl2处理大肠杆菌,有利于重组质粒的导入。但由于原核细胞中缺少_________ 等细胞器,不能对表达产物进行加工,可能会影响蛋白质的功能。若将重组质粒导入到真核细胞,如小鼠细胞中,则可避免上述问题的产生。现利用小鼠乳腺作为生物反应器生产该蛋白,可将重组质粒通过_________ 法导入小鼠的_________ 细胞中,然后将转化的细胞进行培养,由于无法进行全体外胚胎培养,成为胚胎工程中获得转基因小鼠的唯一方法。利用_________ 技术检测小鼠乳腺分泌物,可以判断目的基因是否表达。
(1)科研人员利用人肝细胞中的
A.引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3',引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
B.引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3',引物Ⅱ是5'-TCTCCAACGATCGG-3'
C.引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3',引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3'
D.引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3',引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'
为使HSA基因能与质粒正确连接,根据图甲、乙、丙,应选择限制酶
(2)PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测,常采用电泳的方法。电泳一段时间后进行检测,若电泳带有
(3)目的基因与质粒连接后可以导入到不同的受体细胞中进行表达。若导入到原核生物大肠杆菌中,可用CaCl2处理大肠杆菌,有利于重组质粒的导入。但由于原核细胞中缺少
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【推荐2】回答下列(一)、(二)小题:
(一)某科研团队利用植物细胞工程技术,把基因序列已知的抗除草剂(Bar)基因导入原生质体获得抗除草剂大豆。请回答下列相关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2016/10/8/1567110278979584/1567110282338304/STEM/3ab9eb37-f6de-4640-802b-b9bb1d500698.png?resizew=554)
(1)对于已获得的Bar基因可以用________ 技术进行扩增。图中的a过程通常使用相同的________ 酶和DNA连接酶,使目的基因与载体连接形成重组DNA。
(2)在b过程中,获得原生质体除了需要纤维素酶和果胶酶,还需要用到的试剂是__________ 。
(3)成功导入重组DNA的原生质体经脱分化形成Ⅰ____________ ,进而生长发育成植株。
下列不属于Ⅰ细胞应具有的特征是________ 。
A.薄壁细胞 B.细胞质丰富 C.液泡小 D.细胞核小
(4)若要判断转基因抗除草剂大豆是否成功,比较简便的检测方法是_______________ 。
(二)下图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程,请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2016/10/8/1567110278979584/1567110282338304/STEM/5c5d3081-fc7d-4052-9a50-45a79ff7ee6e.png?resizew=554)
(5)该实验培养基不能含有_______ 。
A.尿素 B.氯化钠 C.葡萄糖 D.琼脂
(6)尿素溶液可用____________ 使之无菌。若要检查B过程灭菌是否彻底,可以采用的方法是________ 。
(7)图中步骤C为____ 。相对于划线分离法,过程D涂布分离法的优点是___ 。
(8)如果菌落周围出现___________ 色环带,说明该菌落能分泌脲酶。
(一)某科研团队利用植物细胞工程技术,把基因序列已知的抗除草剂(Bar)基因导入原生质体获得抗除草剂大豆。请回答下列相关问题:
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(1)对于已获得的Bar基因可以用
(2)在b过程中,获得原生质体除了需要纤维素酶和果胶酶,还需要用到的试剂是
(3)成功导入重组DNA的原生质体经脱分化形成Ⅰ
下列不属于Ⅰ细胞应具有的特征是
A.薄壁细胞 B.细胞质丰富 C.液泡小 D.细胞核小
(4)若要判断转基因抗除草剂大豆是否成功,比较简便的检测方法是
(二)下图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程,请回答下列问题:
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(5)该实验培养基不能含有
A.尿素 B.氯化钠 C.葡萄糖 D.琼脂
(6)尿素溶液可用
(7)图中步骤C为
(8)如果菌落周围出现
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名校
【推荐3】新冠病毒的抗原性与感染性与其表面的S蛋白(刺突糖蛋白)密切相关,现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建S蛋白基因表达载体的过程,图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。请回答下列问题。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/26/2c757b9d-c31d-4b15-be7f-1cd64c4054b3.png?resizew=523)
(1)①过程所使用的酶为_______ ,为保证PCR技术扩增S蛋白基因正常进行,该反应体系的主要成分有______ 。PCR技术中低温复性的目的是_______ 。
(2)通过PCR技术可在cDNA分子中专一性扩增出S蛋白基因,其原因是______ 。PCR过程经过4次循环,需要的引物的数量是______ 个。
(3)构建好的重组质粒长度共2000bp,用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分别对重组质粒进行切割并电泳,结果如图乙所示,可推测BamHⅠ在重组质粒上有_______ 个酶切位点。
(4)腺病毒疫苗进入人体后,S蛋白基因利用人体细胞的蛋白质表达系统指导S蛋白的合成,其过程是____ (用文字和箭头表示)。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/2/26/2c757b9d-c31d-4b15-be7f-1cd64c4054b3.png?resizew=523)
(1)①过程所使用的酶为
(2)通过PCR技术可在cDNA分子中专一性扩增出S蛋白基因,其原因是
(3)构建好的重组质粒长度共2000bp,用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分别对重组质粒进行切割并电泳,结果如图乙所示,可推测BamHⅠ在重组质粒上有
(4)腺病毒疫苗进入人体后,S蛋白基因利用人体细胞的蛋白质表达系统指导S蛋白的合成,其过程是
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【推荐1】用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶,其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/7/11/3020261295497216/3021047789412352/STEM/04280a51ed594d6aba53e7846c84fd1c.png?resizew=328)
回答下列问题:
(1)常用的DNA连接酶有E. coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。上图中__________ 酶切割后的DNA片段可以用E. coli DNA连接酶连接。上图中___________ 酶切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。
(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是____________ 。
(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征,如质粒DNA分子上有复制原点,可以保证质粒在受体细胞中能___________ ;质粒DNA分子上有______________ ,便于外源DNA插入;质粒DNA分子上有标记基因(如某种抗生素抗性基因),利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞,方法是______________ 。
图甲是含有目的基因的外源DNA片段,图乙是用于将目的基因导入受体细胞的质粒(阴影部分表示抗生素抗性基因),相关限制酶作用部位如下,现想培养转基因抗病植株
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/7/11/3020261295497216/3021047789412352/STEM/31756201c31142e9aa335be76d993be4.png?resizew=361)
(4)在基因工程操作中,不宜选用Sma1,原因是其会破坏___________ 和________________
(5)在基因工程操作中,不宜选用EcoRⅠ,原因是用其切割外源DNA片段后,______________
(6)为避免目的基因和质粒的自身环化以及目的基因的反向连接,可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,例如可以选用____________ 和_____________ 这两种酶切割。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/7/11/3020261295497216/3021047789412352/STEM/04280a51ed594d6aba53e7846c84fd1c.png?resizew=328)
回答下列问题:
(1)常用的DNA连接酶有E. coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。上图中
(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是
(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征,如质粒DNA分子上有复制原点,可以保证质粒在受体细胞中能
图甲是含有目的基因的外源DNA片段,图乙是用于将目的基因导入受体细胞的质粒(阴影部分表示抗生素抗性基因),相关限制酶作用部位如下,现想培养转基因抗病植株
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/7/11/3020261295497216/3021047789412352/STEM/31756201c31142e9aa335be76d993be4.png?resizew=361)
(4)在基因工程操作中,不宜选用Sma1,原因是其会破坏
(5)在基因工程操作中,不宜选用EcoRⅠ,原因是用其切割外源DNA片段后,
(6)为避免目的基因和质粒的自身环化以及目的基因的反向连接,可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,例如可以选用
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名校
【推荐2】铝在土壤中常以铝酸盐的形式存在,可造成土壤酸化而影响植物生长。铝能抑制植物根尖细胞的分裂,抑制根生长,破坏根组织。部分植物能通过根部细胞膜上的苹果酸通道蛋白(ALMT)将苹果酸转运到细胞外来缓解铝毒。可将ALMT基因导入植物细胞,来培育转基因耐铝植物,请回答下列问题:
(1)从基因文库中获得目的基因的依据有:_____________________________________ (答出两点即可)。在cDNA的合成过程中,反应体系内加入的物质有_______________ (答出三点即可)。
(2)可将ALMT基因插入农杆菌Ti质粒的______________ 片段中,以便目的基因进入植物细胞。利用该方法导入的目的基因的遗传一般遵循孟德尔遗传定律,原因是______________________________________________________________________ 。
(3)启动子是______________ 特异性识别并结合的位点,能调控目的基因的表达。ALMT基因的启动子有两种类型,其中α启动子能使ALMT基因在酸性土壤的诱导下表达,β启动子能使ALMT基因高效表达而无需酸性诱导。则在获得转ALMT基因耐铝植物时应使用________________ 启动子,不使用另外一种启动子的原因是_______________________ ,导致正常土壤酸化,并影响植物自身的生长。
(1)从基因文库中获得目的基因的依据有:
(2)可将ALMT基因插入农杆菌Ti质粒的
(3)启动子是
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解题方法
【推荐3】生物工程
乙醇是一种绿色、可再生能源。我国研究人员已研究出木糖专用酵母,可以利用非粮食资源的木糖为原料发酵生产乙醇,其合成途径如图。木糖是单糖的一种,属于五碳糖。图中酵母细胞可分别通过木糖/H+协运系统和木糖/葡萄糖扩散系统吸收木糖,前者消耗ATP,后者不消耗ATP。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2024/3/28/3463376467558400/3463460137263104/STEM/9ec7b16bfcc84eebaf734245a095d027.png?resizew=445)
(1)图中进出酵母细胞需要转运蛋白的物质________。
(2)酵母细胞质膜上的转运蛋白从合成到定位,与该过程有关的细胞结构有________ 。(编号选填)
①细胞核 ②溶酶体 ③核糖体 ④内质网 ⑤高尔基体 ⑥中心体
最新研究发现了一种由基因Xyp29表达的特异性木糖转运蛋白,可实现木糖转运率的大幅度提高,进而加快乙醇合成效率,研究者尝试对木糖专用酵母进行改造,以期实现大规模生产,改造过程如图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2024/3/28/3463376467558400/3463460137263104/STEM/dbf44be1880b45b8b678d8c442e6c560.png?resizew=472)
注:Ampr为氨苄青霉素抗性基因,Terr为四环素素抗性基因,氨苄青霉素和四环素均可抑制细菌的生长,对真核生物生长无影响。LacZ’为某种酶蛋白基因,其表达产物可将一种无色化合物(X-gal)水解成蓝色物质,该基因在原核、真核细胞中均可表达。限制性内切核酸酶切割位点如图所示。
(3)为保证最终能获得高产菌种,切割质粒pBR322的限制酶可选取_______。
(4)已知目的基因Xyp29的一端已有相应的限制酶序列,通过PCR技术大量扩增Xyp29时需要在另一端添加特定的限制酶序列,预期经过____轮复制可得到目标产物。
(5)为获得大量重组质粒,培养过程Ⅰ应该为____________。
①将大肠杆菌接种到含有四环素的液体培养基中培养
②将大肠杆菌接种到含有青霉素的液体培养基中培养
③将大肠杆菌接种到含有四环素的固体培养基中培养
④将大肠杆菌接种到含有青霉素的固体培养基中培养
⑤将大肠杆菌接种到含有无色化合物(X-gal)固体培养基中培养
⑥将大肠杆菌从固体培养基上转接至液体培养进行扩大培养
若对目的基因Xyp29采用PCR技术扩增时随机改变反应条件,创建一系列新基因序列,导入受体细胞后筛选得到了高亲和性的Xyp29转运蛋白,发现其第4个氨基酸由甘氨酸替换为丙氨酸。
(6)此改造过程属于蛋白质工程操作策略中基因的__________ (定向进化/定点突变)。
(7)将改造后的酵母加入发酵罐进行发酵生产乙醇,其过程需要___________。
(8)工作人员监测发酵罐中酵母的活力,发现酵母出现细胞自噬现象。酵母细胞自噬作用是一种“应急”机制,如图。细胞自噬过程是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2024/3/28/3463376467558400/3463460137263104/STEM/1fdd3047804a4857923caff9b5d6e940.png?resizew=185)
乙醇是一种绿色、可再生能源。我国研究人员已研究出木糖专用酵母,可以利用非粮食资源的木糖为原料发酵生产乙醇,其合成途径如图。木糖是单糖的一种,属于五碳糖。图中酵母细胞可分别通过木糖/H+协运系统和木糖/葡萄糖扩散系统吸收木糖,前者消耗ATP,后者不消耗ATP。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2024/3/28/3463376467558400/3463460137263104/STEM/9ec7b16bfcc84eebaf734245a095d027.png?resizew=445)
(1)图中进出酵母细胞需要转运蛋白的物质________。
A.木糖 | B.葡萄糖 | C.乙醇 | D.H+ |
①细胞核 ②溶酶体 ③核糖体 ④内质网 ⑤高尔基体 ⑥中心体
最新研究发现了一种由基因Xyp29表达的特异性木糖转运蛋白,可实现木糖转运率的大幅度提高,进而加快乙醇合成效率,研究者尝试对木糖专用酵母进行改造,以期实现大规模生产,改造过程如图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2024/3/28/3463376467558400/3463460137263104/STEM/dbf44be1880b45b8b678d8c442e6c560.png?resizew=472)
注:Ampr为氨苄青霉素抗性基因,Terr为四环素素抗性基因,氨苄青霉素和四环素均可抑制细菌的生长,对真核生物生长无影响。LacZ’为某种酶蛋白基因,其表达产物可将一种无色化合物(X-gal)水解成蓝色物质,该基因在原核、真核细胞中均可表达。限制性内切核酸酶切割位点如图所示。
(3)为保证最终能获得高产菌种,切割质粒pBR322的限制酶可选取_______。
A.XhoI和Sau3AI | B.XhoI和SacI | C.XhoI和BamHI | D.BamHI和SacI |
A.1 | B.2 | C.3 | D.4 |
①将大肠杆菌接种到含有四环素的液体培养基中培养
②将大肠杆菌接种到含有青霉素的液体培养基中培养
③将大肠杆菌接种到含有四环素的固体培养基中培养
④将大肠杆菌接种到含有青霉素的固体培养基中培养
⑤将大肠杆菌接种到含有无色化合物(X-gal)固体培养基中培养
⑥将大肠杆菌从固体培养基上转接至液体培养进行扩大培养
A.①→③→④→⑥ | B.②→④→③→⑥ | C.①→③→⑤→⑥ | D.②→④→⑤→⑥ |
若对目的基因Xyp29采用PCR技术扩增时随机改变反应条件,创建一系列新基因序列,导入受体细胞后筛选得到了高亲和性的Xyp29转运蛋白,发现其第4个氨基酸由甘氨酸替换为丙氨酸。
(6)此改造过程属于蛋白质工程操作策略中基因的
(7)将改造后的酵母加入发酵罐进行发酵生产乙醇,其过程需要___________。
A.对培养基进行灭菌 | B.定时收集发酵液 | C.全程通入无菌空气 | D.定时补充菌种和培养基 |
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2024/3/28/3463376467558400/3463460137263104/STEM/1fdd3047804a4857923caff9b5d6e940.png?resizew=185)
A.细胞坏死 | B.细胞凋亡 | C.主动死亡 | D.被动死亡 |
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(0.65)
【推荐1】CRISPR/Cas9是一种高效的基因编辑技术,Cas9基因表达的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”,在单链向导RNA(SgRNA)引导下,切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因编辑技术的工作原理如图所示。回答相关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/4/28/c2f6e8da-b538-49bc-b3c2-5d31020f5a9b.png?resizew=502)
(1)过程①中,为构建CRISPR/Cas9重组质粒,需用________ 对含有特定SgRNA编码序列的DNA以及质粒进行酶切处理,再用________ 催化进行连接。
(2)构建完成CRISPR/Cas9重组质粒后,需要采用_______ 技术对其进行扩增,其原理是_______ 。
(3)过程②中,若受体细胞是大肠杆菌细胞,则导入前需要用_______ 对其进行处理,使其处于一种_____ 生理状态。
(4)过程③~⑤中,SgRNA与Cas9蛋白形成复合体,该复合体中的SgRNA可识别并与目标DNA序列特异性结合,此过程发生了碱基互补配对,和SgRNA中A、G配对的碱基分别是_______ 。Cas9蛋白切割基因组DNA时,断开的是______ 键。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/4/28/c2f6e8da-b538-49bc-b3c2-5d31020f5a9b.png?resizew=502)
(1)过程①中,为构建CRISPR/Cas9重组质粒,需用
(2)构建完成CRISPR/Cas9重组质粒后,需要采用
(3)过程②中,若受体细胞是大肠杆菌细胞,则导入前需要用
(4)过程③~⑤中,SgRNA与Cas9蛋白形成复合体,该复合体中的SgRNA可识别并与目标DNA序列特异性结合,此过程发生了碱基互补配对,和SgRNA中A、G配对的碱基分别是
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适中
(0.65)
【推荐2】乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1),可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/11/24/2599988449181696/2600409773817856/STEM/931e364f-2dfc-4c9e-a1b0-687520e44fb4.png?resizew=573)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/11/24/2599988449181696/2600409773817856/STEM/c311ea9d-c60a-4a94-a4fd-03df049a8cb8.png?resizew=297)
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则2A11应在番茄的______ 中表达。
(2)从番茄成熟果实中提取______ 为模板,利用______ 法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因并扩增。
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶______ 对上述两个基因进行酶切,再利用______ 将其串联成融合基因,相应的Ti质粒应用限制酶______ 进行切割,确保融合基因能够插入载体中。
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因________ (正向/反向)插入在启动子2A11的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有______ 的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,经克隆化培养后,再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,______ (填“能”/“不能”)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段做探针进行检测,理由是______ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/11/24/2599988449181696/2600409773817856/STEM/931e364f-2dfc-4c9e-a1b0-687520e44fb4.png?resizew=573)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/11/24/2599988449181696/2600409773817856/STEM/c311ea9d-c60a-4a94-a4fd-03df049a8cb8.png?resizew=297)
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则2A11应在番茄的
(2)从番茄成熟果实中提取
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,
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非选择题-解答题
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适中
(0.65)
【推荐3】科研人员在大鼠的A基因中引入变异,使得该品系大鼠具备了阿尔慈海默症的表现,作为疾病模型用于后续的研究。回答下列问题。
(1)科研人员在A基因中引入变异的方法如图所示。I为gRNA,能依据_________ 原则与相应的DNA结合,Ⅱ为cas9酶,能与gRNA结合,并催化水解核苷酸之间的_________ 键,切断DNA双链。Ⅲ为除突变位点外,其余序列与A基因相同的DNA片段。在A基因和Ⅲ均被cas9切开后,机体会进行断裂DNA的修复,有可能将Ⅲ代替A基因连入染色体中,实现A基因的突变。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/2/17/2918162734702592/2919954904940544/STEM/48e240f7-5aec-41c7-8585-60e10ec1a14c.png?resizew=345)
(2)为了制备含有A基因突变的大鼠,科研人员进行如下的操作:
①第一步制备gRNA,其方法为;将编码gRNA的DNA片段上连接上_________ 序列,在体系中加入RNA聚合酶和核糖核苷酸,转录获得gRNA。
②第二步制备重组质粒;过程是将Ⅲ片段作为_________ 连入质粒X中构建重组载体,根据图中Ⅲ的序列,质粒X需要具备_________ 和复制原点。
③第三步将gRNA、cas9酶和重组质粒共同注射进大鼠的_________ 中,在40只大鼠仅鉴定筛选到了一只A基因家变的杂合子
④为了获得A基因突变纯合子,作为阿尔慈海默症的疾病模形,培育方法是_________ 。
(3)该技术能对基因实现定点的编制。从技术的原理角度进行推测,在实际应用过程中可能会出现的风险是_________ (答出一条即可)
(1)科研人员在A基因中引入变异的方法如图所示。I为gRNA,能依据
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(2)为了制备含有A基因突变的大鼠,科研人员进行如下的操作:
①第一步制备gRNA,其方法为;将编码gRNA的DNA片段上连接上
②第二步制备重组质粒;过程是将Ⅲ片段作为
③第三步将gRNA、cas9酶和重组质粒共同注射进大鼠的
④为了获得A基因突变纯合子,作为阿尔慈海默症的疾病模形,培育方法是
(3)该技术能对基因实现定点的编制。从技术的原理角度进行推测,在实际应用过程中可能会出现的风险是
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适中
(0.65)
名校
【推荐1】人们预防与诊疗传染性疾病经常使用疫苗和抗体,已知禽流感传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,相应疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/5/7/1940105356001280/1947325850910720/STEM/c080fb8047554026a40ad333d1c9c356.png?resizew=513)
(1)过程②代表基因工程操作步骤中的_____________ , ;基因工程的核心步骤是____ (填序号),该过程所需的工具酶有___________ 。
(2)过程⑦利用的生物学原理是_____________ ,获得的X称为______________ 。
(3)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的_________ 制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒,与已知病毒进行________ 比较,或用图中的________________ 进行特异性结合检测。
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(1)过程②代表基因工程操作步骤中的
(2)过程⑦利用的生物学原理是
(3)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的
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适中
(0.65)
名校
【推荐2】如表表示高等动植物亲代个体产生新个体的3种不同途径,请据表分析并回答问题:
(1)甲、乙、丙途径中属于有性生殖的是______ (填“甲”“乙”或“丙”)。
(2)乙途径获取愈伤组织时,选取外植体,70%乙醇消毒后,立即用无菌水冲洗,再用______ 处理,接种在培养基中,通过______ 和细胞增殖,获得愈伤组织。用该方法生产紫草宁时,需用酶解法将愈伤组织分离成单细胞,常用的工具酶是______ 。高产细胞系需要在________ (填理化性质)培养基中培养,再从中提取紫草宁。
(3)丙途径中,早期胚胎→新个体的流程中需要采用的生物工程技术是____ 。该途径获得的新个体与供核的亲代个体性状不完全相同的原因是____ 。
生物 | 途径 | 主要流程 |
动植物 | 甲 | 亲代个体→受精卵→新个体 |
植物 | 乙 | 亲代个体→体细胞→试管苗→新个体 |
动物 | 丙 | 亲代个体→核移植细胞→早期胚胎→新个体 |
(2)乙途径获取愈伤组织时,选取外植体,70%乙醇消毒后,立即用无菌水冲洗,再用
(3)丙途径中,早期胚胎→新个体的流程中需要采用的生物工程技术是
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适中
(0.65)
名校
【推荐3】科学家研发出抗HPV的单克隆抗体可高效准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生。回答下列问题:
(l)单克隆抗体具有的主要优点是______ 。单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有______ (答出两点)。
(2)将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合时,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外(只考虑两两融合),可能还有______ ,出现多种类型细胞的原因是______ ,诱导动物细胞融合时,常用的诱导因素有______ (答出三点)等。
(3)据报道,科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。请据此设计两种制备单克隆抗体的新思路:①______ ;②______ 。
(l)单克隆抗体具有的主要优点是
(2)将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合时,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外(只考虑两两融合),可能还有
(3)据报道,科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。请据此设计两种制备单克隆抗体的新思路:①
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