【推荐1】普通番茄细胞中含多聚半乳糖醛酸酶基因（用 A 表示），控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄易软化，不耐储藏。抗多聚半乳糖醛酸酶基因可以使番茄不再产生多聚半乳糖醛酸酶，从而使番茄长时间抗软化，容易储存和运输。下图是通过基因工程培育抗软化耐储藏番茄的过程及原理。请分析回答下列问题：

(1)普通番茄（AA）也可以通过________________ 育种的方法，最终获得基因型为aa（不能合成多聚半乳糖醛酸酶）的抗软化、耐储存的番茄。
(2)利用基因工程将目的基因导入植物细胞，目前采用最多的方法是________________，该方法中用到的目的基因载体是________________，目的基因需插入到该基因载体的________________ 上。
(3)将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞所需要的工具酶有________________。
(4)图 1 中获得导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因的番茄细胞，需要经过________________ 技术获得转基因番茄，这个过程需要在________________ 条件下进行，细胞先经脱分化形成________________，再形成丛芽和根。
(5)根据图 2 分析抗多聚半乳糖醛酸酶基因能使番茄抗软化的原理是两个基因分别转录出的 mRNA   ________________，从而阻断了________________ 过程。

【推荐2】【生物——选修3：现代生物技术专题】苏云金芽孢杆菌产生的Bt毒蛋白在害虫的消化道内能被降解成有毒的多肽，最终造成害虫死亡，因此Bt基因广泛用于培育转基因抗虫植物。
(1)培育转基因抗虫棉所需的目的基因来自________的基因组，再通过PCR技术扩增。PCR反应中温度呈现周期性变化，其中加热到90～95℃的目的是______， 然后冷却到55—60℃使引物与互补DNA链结合，继续加热到70～75℃，目的是___________。
(2)限制酶主要是从_______中获得，其特点是能够识别DNA分子某种________，并在特定位点切割DNA。
(3)科研人员培育某品种转基因抗虫棉的过程中，发现植株并未表现抗虫性状。可能的原因是________。（至少答两点）
(4)在基因表达载体中，目的基因的首端和尾端必须含有_______这样目的基因才能准确表达。

【推荐3】CRISPR/Cas9基因编辑技术的实质是用特殊的引导序列（sgRNA）将Cas9酶—基因剪刀精确定位到所需切割的基因上，然后进行编辑。对该研究有突出贡献的科学家被授予2020年诺贝尔化学奖。科学家正设想利用基因编辑技术将猪基因中“敲入”某种调节因子，抑制抗原基因的表达，培育出没有免疫排斥反应的猪器官，解决人类移植器官短缺的难题。请回答下列问题：
(1)动物细胞中没有编码Cas9酶的基因，可通过构建______________，用___________技术将其导入受体细胞，最终表达出Cas9酶。
(2)CRISPR/Cas9基因编辑技术中，sgRNA是根据靶基因设计的引导RNA，准确引导Cas9切割与sgRNA配对的靶基因DNA序列，限制酶Cas9切割的是DNA中的______键。
(3)欲获得大量的调节因子，可以利用PCR技术进行扩增，在PCR反应体系中需加入模板DNA、dNTP、Taq酶、Mg²⁺和足量的引物（循环次数越多，引物加入量越大）等，需要足量引物的原因是____。
(4)将含有调节因子的猪细胞在体外培养时，会出现细胞贴壁现象。为了使细胞更好地贴壁生长，要求培育瓶内表面_______。为了确认含有调节因子的猪细胞中抗原决定基因是否表达出蛋白质，常用的检测方法是_______。
(5)为了获得没有免疫排斥反应的转基因猪，需要将调节因子已经发挥作用的猪细胞的细胞核移入________________，用物理或化学方法激活受体细胞，使得完成_____________，再进行胚胎移植获得转基因克隆猪。

【推荐1】1979年，科学家将鼠体内的能够产生胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中发现了胰岛素的前体物质胰岛素原。如下图所示，请根据下图回答：

（1）图中2、5、3、7表示通过从供体细胞的DNA中直接分离基因，获得_____的过程。
（2）图中3代表_____，在它的作用下将目的基因和质粒切成黏性末端。
（3）经9_____的作用将7、6“缝合”形成8重组DNA分子。8往往含有_____基因，以便将来检测。
（4）图中10表示将重组DNA分子导入_____的过程。
（5）如在大肠杆菌细胞内发现了胰岛素原，说明成功导入了_____，并使之完成了表达过程。

【推荐2】下图是我国南方开始尝试的农业生态系统的结构模式图，其中利用植物秸秆中的原料生产的燃料乙醇，是一种“绿色能源”，可减少对石油资源的依赖。请据图回答：

(1)生态系统的主要功能是物质循环和能量流动，从生态学角度分析，人们建立图示的农业生态系统的主要目的是_________________________________。建立该生态工程所遵循的基本原理主要是_________________等。
(2)植物秸秆经预处理后，应该利用微生物A所产生的纤维素酶进行水解，使之转化成发酵所需的葡萄糖。若从土壤中分离获取微生物A，应采用具有选择功能的培养基，培养基中的碳源为__________。
(3)为了提高植物秸秆的利用率，可以利用基因工程对微生物A进行改造，其基本方法是：先用_____________同时切割___________和____________，然后用DNA连接酶将上述切割产物连接，构成______________并将其导入到受体菌中。

【推荐3】中国T2DM（胰岛β细胞功能衰退型糖尿病）的发病率由1979年的1. 00%上升到2019年的4. 37%，补充胰岛素是控制和缓解病情的重要途径。胰岛素（由α、β两条多肽链组成）的生产由提取动物胰岛素发展到了利用基因工程生产重组人胰岛素。
(1)构建完成的表达载体除了目的基因、标记基因以外，还必须有_________等调控组件。


(2)利用大肠杆菌生产重组人胰岛素时，构建表达载体的目的基因应从_________文库中获取，重组大肠杆菌合成的人胰岛素原没有活性，需用_________酶将其加工成含α、β两条多肽链的胰岛素。
(3)利用奶牛设计乳腺生物反应器生产人胰岛素，为使人胰岛素基因在奶牛乳腺中特异表达，构建表达载体时应将目的基因与_________的启动子等调控组件重组在一起，并选用_________为受体细胞.
(4)重组人胰岛素分子容易发生聚合而影响作用效果，可将胰岛素分子的氨基酸序列及结构进行局部调整，形成胰岛素类似物加以避免。请根据上述设想，补充完善其基本研发流程：预期蛋白质功能→设计预期蛋白质的空间结构→推测氨基酸序列→__________________→构建表达载体，转基因获得胰岛素类似物.

【推荐2】如图表示利用细菌中抗虫基因培育抗虫玉米的过程，其中①~⑧表示操作步骤，a、b表示相关分子，c~e表示培养过程，其中d过程表示细菌与玉米细胞混合培养。回答下列问题：

(1)图中目的基因的“运输车”是_____（填字母），作为载体需要具备的条件有_____（答出2条即可）。
(2)将b通过过程④导入的细菌是_____，将目的基因导入玉米细胞的方法是_____、
(3)将抗虫基因导入玉米体细胞后，可以通过_____技术培养成植株，这体现了植物细胞有_____。个体水平检测抗虫玉米培育是否成功的方法是_____。

【推荐3】基因工程技术已在农业生产实践中有广泛的应用，如人们利用苏云金芽孢杆菌中的BT毒蛋白基因，已成功培育出转基因抗虫棉。回答下列问题：
（l）若要快速获得大量的BT毒蛋白基因，可采用PCR技术扩增，此过程中需要____的催化作用；该技术中每次循环可为____三步。
（2）获取BT毒蛋白基因的下一步操作是___ ，这也是基因工程操作的核心环节。将BT毒蛋白基因导入棉花细胞的常用方法是 ___。
（3）BT毒蛋白基因能否在棉花受体细胞内稳定遗传的关键是 ________。从个体水平检测BT毒蛋白基因是否成功表达的方法是 ___。苏云金芽孢杆菌的BT毒蛋白基因能在棉花细胞内表达的原因是 _____ 。
（4）与其他育种方法相比，利用基因工程技术培育抗虫棉具有的突出优点是 ________ 。

【推荐1】2020年3月16日，中国科学家陈薇院士团队研制的重组新冠疫苗通过临床研究注册审评，获批进入临床试验。重组新冠疫苗的制备流程如图。

回答下列问题。
（1）步骤②需要___________作为原料。步骤②需要的工具酶是_____________。
（2）被用作载体的Ad5应具有的特点是________________（答出1点即可）
（3）步骤④是___________________。
（4）重组疫苗注入志愿者体内后，S蛋白基因指导合成的S蛋白作为___________，刺激机体产生能与之相结合的抗体。
（5）基因工程和蛋白质工程相比较，基因工程在原则上只能生产_________________的蛋白质。而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过_____________，对____________进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求。

【推荐2】下图表示基因导入中的土壤农杆菌转化法等内容（其中，图中数字表示该方法的操作步骤，字母表示途中的结构）。据图解答下列问题。

(1)指出a-e所示结构的名称。
a是_____； b是_____ c是_____；d是_____； e是_____。
(2)①代表的操作步骤是_____；④过程用到的现代生物技术是_____。
(3)若用上述方法将一个c导入二倍体细胞f，则g自交产生的子代中，表现出c中基因控制的性状的个体为_____%。若用DNA探针技术检测含有c片段的g的花粉，其百分比为_____% 。若g为转基因抗虫棉，这种棉花推广对环保方面所起的积极作用是_____。

【推荐3】新冠肺炎是由新冠病毒（SARS-CoV-2）感染引起的呼吸道传染病，研究表明新冠病毒侵染的关键是病毒表面的S蛋白与人体细胞表面ACE2特异结合。请回答下列问题：
（1）为及时确诊，科学家研制了基因检测试剂盒，其机理为：分离待测个体细胞的总RNA，在_______酶的作用下得到相应的DNA，再利用__________技术扩增将样本中微量的病毒信息放大，最后以荧光的方式读取信号。
（2）预防新冠肺炎（COVID--19）的有效措施是接种疫苗，核酸疫苗已成为疫苗研发的新领域。与DNA疫苗（通过抗原蛋白基因在动物细胞中表达引起机体免疫应答）相比，mRNA疫苗的安全性更有优势。这是因为mRNA不需要进入细胞核，无__________的风险，且易被__________水解，不会遗传给子细胞。
（3）研制S蛋白的单克隆抗体可能成为治疗新冠肺炎的途径，请利用小鼠作实验材料，简要写出制备S蛋白的单克隆抗体的实验过程：____________________。
（4）构建乳腺生物反应器可生产相应的药物蛋白，用来治疗冠肺炎。构建的方法有多种，一是通过转基因技术将重组基因导入到受精卵中，使其生长发育成转基因动物：二是通过转基因体细胞核移植技术生产克隆动物作为生物反应器。两种方法获得的胚胎都要借助技术__________和__________技术才能获得转基因动物个体。