【推荐1】人血清白蛋白（HSA）在临床治疗中具有广泛的应用。某生物制药公司为制备大量的HSA，通过基因工程技术获取重组HSA的两条途径如图1所示。图2中，甲为获取的含有目的基因（HSA基因）的DNA片段，EcoRI、BamHI、Sau3AI为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切割位点；乙是三种限制酶的识别序列与切割位点示意图；丙是Ti质粒结构示意图。回答下列问题：
      
(1)基因工程操作的核心步骤是____________。图2丙中Ti质粒的启动子是___________识别和结合的部位。
(2)图1中将目的基因导入大肠杆菌细胞中，首先要用_______处理大肠杆菌细胞，目的是____________。
(3)据图2信息推测，构建基因表达载体时不能选择限制酶Sau3AⅠ切割目的基因，原因是___________，为了防止目的基因与质粒间的任意连接，应选择限制酶Sau3AⅠ、EcoRⅠ切割质粒，选择限制酶________充分切割目的基因。
(4)利用PCR技术扩增HSA基因时，若扩增后得到了32个HSA基因，则该过程共需要________个引物。经PCR后获得的产物一般通过_____________来鉴定。
(5)为了检测水稻胚乳细胞中是否合成了HSA蛋白，可用__________方法。

【推荐3】新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白（S 蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的 ACE2 受体结合，侵入人体引发肺炎。请回答下列相关问题：
（1）B 细胞识别入侵的病毒后，在 T 细胞产生的______作用下，经过细胞的增殖分化形成______细胞。
（2）为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，需用到 PCR 技术，且检测时间较长，此方法是检测病毒的______；采集血液样本主要用于血清学检查，检测______，但该方法不适合对可能处于潜伏期的疑似患者做早期排查，其原因是______。
（3）2021 年 2 月 25 日，由中国工程院院士陈薇团队领衔研发的我国重组新冠疫苗上市注册申请获得批准。现用实验动物检测疫苗接种后机体产生抗体的能力，有若干只健康实验动物、高纯度新冠疫苗、接种物（用于配制各种不同浓度疫苗制剂的溶液）、抗体定量检测仪器等实验材料。请回答下列相关问题：
①对照组具体操作为______。
②根据下表信息，得出接种新冠疫苗的较佳方案为______。

组别（40只）	浓度（VP）	剂量（支）	间隔时间（周）	抗体水平（相对值％）
1	4×105	2	2	94.43
2	5×105	2	2	96.26
3	4×105	2	4	97.56
4	5×105	2	4	98.87

（4）钟南山院士提出，对新冠疑似病人及时检测是切断传染源的重要手段之一。实时荧光 RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）是检测 SARS-CoV-2 有效方法之一，即提取疑似病人组织或细胞中的总 RNA，以其中的 mRNA 作为模板，采用 dT（是一种对 mRNA 特异的方法）或随机引物反转录成 cDNA.再以 cDNA 为模板进行 PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。
①在提取细胞总 RNA 时，由于细胞中物质成分复杂且 RNA 极易被酶解，所以在提取时让其与______等大分子分离和抑制______活性十分重要。
②如从疑似病人咽部获取一段如下图的 mRNA，则此 mRNA 虚线框中含有______个密码子；在翻译时，虚线框后能继续翻译的概率为______。

【推荐1】油菜是世界上重要的油料作物，其生长期常受到病虫害的危害，其中80%是由病原真菌引起。过去对油菜真菌病害的控制主要使用化学杀菌剂；真菌的细胞壁由几丁质组成，现利用外源几丁质酶基因（如下图）注入油菜（本身无几丁质酶基因）中从而提高油菜的抗真菌能力，该过程利用了限制性核酸内切酶（如下图）。请回答下列问题：

（1）据图2写出酶BamHI酶切后形成的DNA片段的末端序列：___________。形成重组DNA分子时，含几丁质酶基因的DNA片段可能自身___________。
（2）将重组DNA导入油菜细胞的常用方法是___________。为了检测油菜细胞是否成功导入几丁质酶基因，可利用___________制成的探针进行检测。
（3）将转基因油菜细胞培养成幼苗，过程中需调节培养基中___________________的配比，幼苗可置于有___________的环境中，检测几丁质酶基因是否成功表达。
（4）采用化学杀虫剂在消灭真菌病害的同时，也污染了__________________（至少2种）等无机环境，更为重要的是使得___________迅速减少。

【推荐2】乳糖不耐受症是机体乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科研工作者利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛，给乳糖不耐受症患者带来了福音。如图为转基因低乳糖奶牛的培育流程。请据图分析回答下列问题：

（1）图中的重组质粒T中除了有目的基因外，还需要有______、______、启动子和终止子等。应选择图中的______（限制酶）处理目的基因和质粒S。一般采用______法将重组质粒T导入牛胎儿成纤维细胞。
（2）目的基因导入胎儿成纤维细胞以后，采用______法检测LCT基因是否表达出LCT。
（3）图中除了采用转基因技术外，至少还有的生物技术有______（答出两种即可）。图中的卵母细胞如果来自卵巢，则需要培养至______才能接受牛胎儿成纤维细胞的细胞核。早期胚胎能移植到代孕母牛的子宫并继续发育，其原因是__________________________________________。

【推荐3】科学家发现人的5号染色体中的PITX1基因能遏制端粒酶发挥作用，将该基因移植到实验鼠的癌细胞中，能抑制癌细胞增殖。请分析回答问题：
（1）在上述转基因过程中用到的工具有____________，PITX1基因称为______。
（2）将该基因移植到实验鼠的癌细胞的过程中，其操作的核心步骤为____________，标记基因的作用是___________。
（3）在配制动物细胞培养液时，通常加入_________等天然成分，提供O₂和CO₂的作用分别是__________和____________。
（4）在培养癌细胞的过程中，___________（填“会”或“不会”）出现接触抑制。

【推荐1】真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）。回答下列问题：
(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是__________。
(2)若用家蚕作为表达基因A的受体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用____________作为载体，其原因是________。
(3)若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比，大肠杆菌具有__________（答出两点即可）等优点。
(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是_____________（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”）。

【推荐2】盐害是导致全球水稻减产的重要原因之一，中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌转化法将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5个耐盐基因导入水稻，获得了一批耐盐转基因植株。请分析回答下列问题：
（1）水稻耐盐性状由__________个基因控制。
（2）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性核酸内切酶作用于左下图中的__________处（填“a”或“b”）。耐盐基因的载体是________________________________。 从个体水平上检测耐盐转基因水稻是否成功可采用什么方法？___________________________________________。

【推荐3】研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草，该过程所用的质粒与含抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性核酸内切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。请回答下列问题。

(1)利用PCR技术扩增干扰素基因时，扩增第n次时，需要________个引物。
(2)用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，应选用限制酶___________切割质粒，选用限制酶___________切割含目的基因的DNA片段。
(3)将上述切开的质粒与目的基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入受体细胞，受体细胞的类型可能包含_________（不考虑基因突变）。

A．抗X、抗Y

B．抗X、不抗Y

C．不抗X、抗Y

D．不抗X、不抗Y

(4)转基因植物所携带的目的基因可能传递给非转基因植物，造成基因污染。如果将目的基因导入叶绿体DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是________________________。