如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养),请据图回答下面的问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/9/15/2808500018585600/2809243299356672/STEM/3f7fefbe39274930b89559a4eb677fd0.png?resizew=163)
(1)OA段的培养称为________ 培养,AB段可能发生了___________ 现象,需要用________ 酶处理,以使组织细胞分散开来。
(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,动植物细胞都要进行___________ ,不同的是植物细胞还要进行________________________ 。
(3)为制备单克隆抗体,需将________ 注射到小鼠体内,以此获取能产生特定抗体的B细胞,同时可选取图中________ 点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞,为筛选出能够产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,可用________ 培养基达到目的。
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(1)OA段的培养称为
(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中,就细胞增殖、分化来说,动植物细胞都要进行
(3)为制备单克隆抗体,需将
更新时间:2021-09-17 10:53:08
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【推荐1】I如图为细胞融合的简略过程,请据图回答:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/9/23/c336ca5a-46e6-479e-8cce-d1c292e83e9e.png?resizew=325)
(1)若A、B是动物细胞,通常用________ 处理获得分散的单个细胞。A、B到C的过程中,常用的不同于植物细胞融合的手段
是_____________________ 。
(2)若该图是生产抗甲型流感病毒的单克隆抗体的制备过程。A为从小鼠体内获取的_______________________ ,在获得此细胞之前,小鼠需注射________________________________________ ,图中B细胞是小鼠骨髓瘤细胞,符合要求的D细胞具有的特点是 _____________________________ 。
(3)若A、B是植物细胞,则之前已用________________ 去除了细胞壁。常用来诱导细胞融合的化学试剂是________ 。
(4)若A是番茄原生质体,B为马铃薯原生质体,D要再生出_______________ 。通过植物组织培养技术把D培养成杂种植株,D个体____________ (填“可育”或“不育”)。这种育种方式的优点是______________________ 。
利用上图原理育种工作者还可以进行_________________________________ 育种。
II.依据生态学原理对农村家庭生活用燃料、厨余垃圾和庭院养殖进行整体设计,构建的庭院生态系统如下图。请回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2017/7/11/1727883114053632/1729055094022144/STEM/39ae821d9ce749689f597206d6ae3b7a.png?resizew=357)
(1)该生态工程设计将猪圈养在温室内的目的是:农作物在生长过程中能为猪提供____________________ ;温室给猪的生长提供了适宜的________ 环境。
(2)该生态系统中的人畜粪便、秸秆、厨余垃圾都可以作为沼气池中发酵的原料。经过发酵产生的沼渣、沼液可以作为肥(饲)料,沼气池中菌群属于该生态系统成分中的__________________ 。
(3)该生态工程设计的优点是____________________________________________ 。
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(1)若A、B是动物细胞,通常用
是
(2)若该图是生产抗甲型流感病毒的单克隆抗体的制备过程。A为从小鼠体内获取的
(3)若A、B是植物细胞,则之前已用
(4)若A是番茄原生质体,B为马铃薯原生质体,D要再生出
利用上图原理育种工作者还可以进行
II.依据生态学原理对农村家庭生活用燃料、厨余垃圾和庭院养殖进行整体设计,构建的庭院生态系统如下图。请回答下列问题:
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(1)该生态工程设计将猪圈养在温室内的目的是:农作物在生长过程中能为猪提供
(2)该生态系统中的人畜粪便、秸秆、厨余垃圾都可以作为沼气池中发酵的原料。经过发酵产生的沼渣、沼液可以作为肥(饲)料,沼气池中菌群属于该生态系统成分中的
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【推荐2】新型冠状病毒(RNA病毒)可通过表面的棘突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合,侵入人体,引起肺炎。抗体可阻断病毒的黏附或入侵,故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。下图为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图,序号①~④表示细胞。据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/9/2975862379945984/2994347923161088/STEM/0ab9e854-038f-4469-8e10-95a258f93397.png?resizew=359)
(1)诊断是否感染新型冠状病毒,可通过咽拭子取样,其检测的是病毒的RNA.但由于采集的样品量较少,为了增加检材数量可进行__________ 。
(2)获取小鼠新鲜的骨髓瘤组织,需在37℃下用__________ 处理30-40分钟形成离散细胞,在CO2培养箱中培养,CO2的作用是__________ 。
(3)细胞①、②融合常用的诱导因素有__________ 。
(4)用HAT选择培养基筛选获得的③为____________ ,细胞③至细胞④还要进行____________ ,该细胞④的特点是___________ 。
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(1)诊断是否感染新型冠状病毒,可通过咽拭子取样,其检测的是病毒的RNA.但由于采集的样品量较少,为了增加检材数量可进行
(2)获取小鼠新鲜的骨髓瘤组织,需在37℃下用
(3)细胞①、②融合常用的诱导因素有
(4)用HAT选择培养基筛选获得的③为
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【推荐3】肿瘤细胞可以表达CD47蛋白,并与吞噬细胞表面的信号调节蛋白a(SIRPa)结合,向吞噬细胞发出“别吃我”的信号,以逃脱机体免疫系统的攻击。因此阻断CD47/SIRPa信号,有望恢复吞噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用。下图是利用CD47蛋白制备相应单克隆抗体的过程。请据图回答下列有关问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/7/26/62d93a66-3003-41a1-a6bf-628ace8295d1.png?resizew=629)
(1)单克隆抗体制备过程涉及细胞工程中的_____ 和_____ 技术,涉及的原理是_____ ,在进行动物细胞培养过程中要先用_____ 法或_____ 酶处理动物组织,分散成单个细胞。
(2)图中a操作是要获得已免疫的_____ 。
(3)诱导过程b融合的方法有_____ (至少写两种)。
(4)在单克隆抗体制备的过程中要进行多次筛选,第一次筛选过程中的HAT培养基从用途上看属于_____ 培养基。在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,从而筛选得到杂交瘤细胞。对上述培养的杂交瘤细胞,进行克隆化培养和_____ 检测,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
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(1)单克隆抗体制备过程涉及细胞工程中的
(2)图中a操作是要获得已免疫的
(3)诱导过程b融合的方法有
(4)在单克隆抗体制备的过程中要进行多次筛选,第一次筛选过程中的HAT培养基从用途上看属于
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【推荐1】请回答下列(一)(二)小题:
(一)回答与发酵有关的问题:
(1)在实验室酿制葡萄酒时,用高锰酸钾消毒葡萄的原因是____________________________ 。
(2)水果用来加工制作果汁、果酒和果醋等的过程,制作果汁时,可以使用果胶酶、纤维素酶等提高水果的_____ 和澄清度。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称,包括__________ (答出2种),纤维素酶可以分解植物细胞壁中的纤维素。利用果汁制作果酒、果醋时,利用的微生物分别是__________ ,后者可以使培养液中的醋酸的含量高达__________ 。
(3)产脂肪酶酵母可用于含油废水处理,为了提高酵母菌产酶能力,对分离所得的菌株,采用射线辐照进行_____ 育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以_____ 为唯一碳源的固体培养基上,培养一段时间后,按照菌落直径大小进行初筛,选择直径_____ 的菌落,纯化后获得突变菌株。
(二)回答与基因工程和植物组织培养的相关问题:
(1)已知不同分子量DNA可分开成不同条带,相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶切环状质粒后,出现3条带。表明该质粒上一定至少有_____ 个被该酶切开的位置。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞,最常用的原核生物是_____ 。
(2)科研小组欲将拟南芥的某种抗病基因导入番茄细胞而获得抗病植株,利用PCR技术大量扩增拟南芥抗病基因的原理是_____ ,将抗病基因插入到Ti质粒的_____ 上,通过_____ 的转化作用使抗病基因进入番茄细胞。将含目的基因的DNA探针与转基因番茄提取出来的mRNA进行杂交,显示出杂交带,并不能说明转基因番茄具有抗病特性,理由是_____ 。
(3)植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株,属于_____ 工程。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是_______________ (用流程图表示)。
(一)回答与发酵有关的问题:
(1)在实验室酿制葡萄酒时,用高锰酸钾消毒葡萄的原因是
(2)水果用来加工制作果汁、果酒和果醋等的过程,制作果汁时,可以使用果胶酶、纤维素酶等提高水果的
(3)产脂肪酶酵母可用于含油废水处理,为了提高酵母菌产酶能力,对分离所得的菌株,采用射线辐照进行
(二)回答与基因工程和植物组织培养的相关问题:
(1)已知不同分子量DNA可分开成不同条带,相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶切环状质粒后,出现3条带。表明该质粒上一定至少有
(2)科研小组欲将拟南芥的某种抗病基因导入番茄细胞而获得抗病植株,利用PCR技术大量扩增拟南芥抗病基因的原理是
(3)植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株,属于
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解题方法
【推荐2】紫草是一种重要的药用植物,其根部富含红色的萘醌类次生代谢产物——紫草宁及其衍生物。它们具有抗菌、消炎、活血、诱导癌细胞凋亡等功效,同时也是一种天然染料。科研人员利用紫草新生的营养芽为外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中进行悬浮培养,以获得更多的紫草宁。下图表示获得紫草宁的两种工艺路线。____ 部位作为外植体,原因是____ (答出两点)。
(2)外植体需经____ 处理,常用的试剂有____ (答出两种即可)。
(3)在设计紫草植物组培培养基时,培养基中需要加入蔗糖,蔗糖的作用是____ (答出两点)。
(4)研究人员将培养的愈伤组织分别接种到含有不同比例NAA(生长素类似物)和KT(细胞分裂素类似物)的培养基中培养。实验处理与结果如下表:
依据实验结果,可以得出的结论是:植物生长调节剂(NAA和KT)的比例会影响愈伤组织的分化,具体表现为____ 。
(5)通过高产细胞株提取细胞培养物途径中,紫草细胞的生长曲线如下图所示:____ 处理愈伤组织以获得单细胞。实验结果表明:接种后第3天左右,紫草宁及其衍生物开始形成;对数生长期及直线生长期,紫草宁含量逐步上升;静止期,紫草宁形成速度加快至最高水平。这说明细胞分裂生长缓慢____ (填“有利于”或“不利于”)目的产物的形成。
(2)外植体需经
(3)在设计紫草植物组培培养基时,培养基中需要加入蔗糖,蔗糖的作用是
(4)研究人员将培养的愈伤组织分别接种到含有不同比例NAA(生长素类似物)和KT(细胞分裂素类似物)的培养基中培养。实验处理与结果如下表:
编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | |
含量(mg/L) | NAA | 0 | 0 | 2 | 0.2 | 2 | 0.02 | 2 |
KT | 0 | 2 | 0 | 2 | 0.2 | 2 | 0.02 | |
分化情况 | 不分化 | 分化芽 | 分化根 | 分化芽 | 不分化 | 分化芽 | 分化根 |
(5)通过高产细胞株提取细胞培养物途径中,紫草细胞的生长曲线如下图所示:
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【推荐3】细胞的不对称杂交技术是指将不对等的细胞进行融合,如将二倍体甘蓝体细胞与其配子细胞进行的融合。不对称细胞杂交技术是当前研究的热点。请回答问题:
(1)二倍体甘蓝体细胞与其配子细胞进行融合首先经_______________ 酶的作用去除细胞壁,形成____________ 。细胞融合完成的标志是______________________________ 。
(2)促使细胞融合常用的化学诱导剂为_______________ ,融合后符合育种条件的植物细胞中有________ 个染色体组。
(3)融合形成的杂种细胞经过______________ 过程形成植株,该过程的生物学原理是_________________ 。
(1)二倍体甘蓝体细胞与其配子细胞进行融合首先经
(2)促使细胞融合常用的化学诱导剂为
(3)融合形成的杂种细胞经过
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【推荐1】秀丽隐杆线虫的fat-1基因,编码ω-3PUFAs脱氢酶,能将ω-6PUFAs转化为ω-3PUFAs。人类食物中的ω-3PUFAs是极度缺乏的,若提升食物中的ω-3PUFAs比例,对健康更有利。本研究试图通过转基因技术将fat-1基因转入绵羊的基因组,再用动物克隆技术创造能产生ω-3PUFAs的转基因绵羊,生产具有保健功能的羊肉,技术流程如图所示。回答下列问题:
(1)选取绵羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞的原因是____________ ,应用____________ 法将fat-1基因导入绵羊胎儿成纤维细胞。
(2)在培养绵羊胎儿成纤维细胞时,通过____________ 的方法,为细胞提供无毒的环境,并将细胞置于含有____________ 的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
(3)将绵羊的卵母细胞置于体视显微镜下,挑选有____________ 且形态良好的卵母细胞进行去核处理,再将供体细胞注入去核的卵母细胞中,通过____________ 法使两细胞融合,形成重构胚。
(4)在胚胎移植前,需要对受体母羊进行____________ 处理,可通过____________ 技术检测fat-1基因是否成功表达。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/7/10/4902ad0c-cae3-4284-b5df-b4f47c96fedb.png?resizew=675)
(1)选取绵羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞的原因是
(2)在培养绵羊胎儿成纤维细胞时,通过
(3)将绵羊的卵母细胞置于体视显微镜下,挑选有
(4)在胚胎移植前,需要对受体母羊进行
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【推荐2】CHO(中国仓鼠卵巢细胞)细胞是从中国仓鼠卵巢细胞中分离出来的可以无限增殖的细胞。CHO细胞系生产乙肝疫苗的大致操作步骤为:①将得到的乙肝病毒表面抗原(HBsAg)基因扩增后插入表达载体;②将此重组质粒与带有小鼠二氢叶酸还原酶(dhfr)基因的质粒共转染缺乏二氢叶酸还原酶的CHO细胞;③通过氨甲喋呤加压筛选得到目标细胞株;④在生物反应器中大规模连续培养目标细胞株,每2天收集培养液一次,离心去细胞后纯化蛋白质,使其纯度达到95%以上,经福尔马林处理后,加入氢氧化铝等佐剂制成乙肝疫苗。回答下列问题:
(1)需要通过______ 技术扩增HBsAg基因,该技术的原理是______ 。常采用______ 技术来鉴定PCR的产物。
(2)构建重组质粒时所需的工具酶有______ 。缺乏dhfr的CHO细胞在培养基上不能正常生长,因此在筛选高效表达HBsAg的细胞株时,dhfr基因起______ 的作用。
(3)dhfr可被氨甲喋呤抑制,在步骤③中,通过不断提高氨甲喋呤的浓度,绝大多数CHO细胞死亡,但会导致存活下来的细胞中与dhfr基因串联在一起的HBsAg基因高水平表达,从而抵消了氨甲喋呤的抑制效应。由此可知通过氨甲喋呤加压筛选的目的是______ 。
(4)在生物反应器中大规模连续培养目标细胞株时,通过______ 的方法,为培养的细胞株营造无毒的环境。在生物反应器中要通入______ 和5%CO2的混合气体,其中CO2的主要作用是______ 。
(1)需要通过
(2)构建重组质粒时所需的工具酶有
(3)dhfr可被氨甲喋呤抑制,在步骤③中,通过不断提高氨甲喋呤的浓度,绝大多数CHO细胞死亡,但会导致存活下来的细胞中与dhfr基因串联在一起的HBsAg基因高水平表达,从而抵消了氨甲喋呤的抑制效应。由此可知通过氨甲喋呤加压筛选的目的是
(4)在生物反应器中大规模连续培养目标细胞株时,通过
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【推荐3】下图为三亲婴儿的培育过程,请据图回答下列问题:____ 、____ 。
(2)在核移植中受体应选用处于____ 期的卵母细胞。重组细胞体外培养所需的气体主要是氧气和二氧化碳,二氧化碳的主要作用是____ 。
(3)去核的卵母细胞作为受体细胞是因为它的体积大、易操作、营养物质丰富,还因为它____ 。
(4)三亲婴儿培育技术____ (填“不能”或“能”)避免母亲线粒体遗传病基因传递给后代。捐献者携带的红绿色盲基因____ (填“不能”或“能”)遗传给三亲婴儿,原因是____ 。
(2)在核移植中受体应选用处于
(3)去核的卵母细胞作为受体细胞是因为它的体积大、易操作、营养物质丰富,还因为它
(4)三亲婴儿培育技术
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