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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:263 题号:15480144
角蛋白酶(KerA)是降解角蛋白的酶类,在饲料工业中具有较大的应用前景,但天然菌株产酶量低限制了其推广应用。为了获得高效表达的KerA工程菌,研究者分别构建了大肠杆菌和毕赤酵母工程菌,并实现了异源表达。下图1为含KerA基因的外源DNA、质粒的有关信息,EcoR1、BamH1、Sal1、Xho1均为限制酶,Kanr、Tcr分别为卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因。请回答下列相关问题:
(1)为了获取KerA基因,从天然菌株中提取相应的DNA片段,再通过PCR技术大量扩增,PCR技术的原理_____,前提是_____

(2)为了形成合适的重组质粒,应该选用__________限制酶切割外源DNA和质粒DNA.
(3)重组质粒导入受体细胞的成功率很低,需经筛选才能获得导入成功的受体细胞。结合图1所获得的重组质粒分析,应选择具有_____特点的细胞作为受体细胞,才有利于后续的筛选。
(4)将目的基因导入大肠杆菌时,常出现三种情况:未转化的细菌、含空载体(普通质粒)的细菌、含重组质粒的细菌。下图是KerA基因重组质粒的“工程菌”的筛选示意图:
下图2中的__________(选用“A/B/C/D/E”字母作答)菌落为含有目的基因的“工程菌”。

(5)KerA基因在大肠杆菌和毕赤酵母工程菌是否能实现异源表达,需要用_____技术检测,若在二者细胞中都能实现表达,从分子水平上分析原因是_____,并且它们体内转录和翻译的过程或机制相同。但经研究发现,只有毕赤酵母工程菌表达合成的KerA可直接投入使用,分析其原因是_____
(6)KerA在60℃以上时热稳定性差,限制了该酶的应用范围,研究人员在KerA的末端插入半胱氨酸,这不仅对酶活性影响小,且大大提高了其热稳定性。其运用到的这种现代生物技术为_____

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【推荐1】利用基因工程的方法可以生产大量的胰岛素,下图是利用这一方法生产胰岛素的过程。请回答下列问题:

(1)胰岛素mRNA只能从胰岛细胞中获得,而不能从其他细胞中获得,这是因为_______________________________________________________
(2)完成过程②所需的酶是______。过程③所利用的技术是______
(3)过程④是____________,所用的工具酶有____________
(4)将A导入大肠杆菌之前需要使用____处理大肠杆菌,目的是使大肠杆菌处于______态。
(5)检测目的基因是否成功导入大肠杆菌,可以采用______的方法检测。
2019-03-17更新 | 257次组卷
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(2)简述将生长速度较快的奇努克三文鱼生长激素基因转入大西洋三文鱼基因组中,生产出转基因三文鱼的基本过程。___________________________   
(3)分析(2)中获得转基因三文鱼对生态环境可能造成的影响。____________
2019-09-25更新 | 258次组卷
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【推荐3】质粒能成功转入植物细胞,并将质粒上的一部分外源DNA整合到植物细胞的DNA中。如图表示利用质粒进行转化获得抗除草剂大豆的过程。请据图分析回答:

(1)过程②将目的基因导入质粒后,需要经过_______________使质粒与目的基因切口黏合。
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(3)过程③可以采用的方法是______________________________
(4)过程④运用了细胞工程中的_________________技术,该技术的理论依据是_______________;在该技术应用的过程中,关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行_____________________
(5)为了检测通过④过程获得的幼苗是否具有抗除草剂的特性,可采用的方法是_______________
2020-09-10更新 | 300次组卷
共计 平均难度:一般