【推荐1】为了研究低温诱导对某基因的启动子P活性的影响，科研人员进行了启动子P的PCR提取、特定表达载体的构建和转基因烟草的功能鉴定。该基因及其启动子P的结构及相应限制酶的切割位点如下图所示，图中浅灰色区域碱基序列是已知的，启动子P（图中深灰色区域）及上游碱基序列未知，片段Ⅰ和片段Ⅱ中的字母A~F均表示引物。请回答下列问题。

(1)启动子是_____________识别和结合的部位。不能直接根据片段Ⅰ扩增启动子P的原因是_____________。
(2)为了能扩增正常启动子P，科研人员先用__________酶处理上图中的片段Ⅰ，使片段Ⅰ成为环状DNA；再将环状DNA用酶_____________处理得到了片段Ⅱ，如下图所示。根据片段Ⅱ，用引物_____________组合（用C、D、E、F表示）能扩增出启动子P。

(3)已知卡那霉素可抑制烟草细胞的生长，基因M可在烟草的根部正常表达，其表达产物可将X-Gluc水解生成蓝色物质。将启动子P和基因M结合并与含有卡那霉素抗性基因的Ti-质粒重组构建基因表达载体。将表达载体加入含有烟草细胞的培养基中，筛选出所需的烟草细胞，然后经过培养获得转基因烟草植株。将上述转基因烟草植株分为A、B两组，A组在常温（25℃，对照组）下培养，B组在低温（4℃，实验组）下培养，一段时间后取A、B的幼根，浸入适量_____________溶液中，观察烟草细胞中基因M的表达情况（表达强度越大，细胞表现的蓝色越深）。若A、B组的结果分别为_____________，则说明低温抑制启动子P的功能。

【推荐2】奶牛养殖业中乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽（抗细菌）和人干扰素（抗病毒）的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。
   
(1)构建基因表达载体时要用到的工具酶是__________。图1中新青霉素抗性基因的作用是作为标记基因以便_________。
(2)研究者根据乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因设计引物，对乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞等提取的RNA分子进行PCR，结果如下表：

PCR结果	乳腺细胞	口腔上皮细胞	蹄部细胞
乳铁蛋白肽基因引物	有PCR产物	无PCR产物	无PCR产物
人干扰素基因引物	有PCR产物	有PCR产物	有PCR产物

结果说明：牛乳铁蛋白肽基因只能在转基因奶牛的_________细胞中表达，人干扰素基因则可在转基因奶牛的_________细胞中表达，这与构建表达载体时__________的选择有关。
(3)该技术__________（填需要或不需要）对重组胚胎性别进行鉴定，理由是：__________。

【推荐3】图1中的三个DNA片段上依次标出了EcoR I、BanH I和Sau3A I三种限制性内切核酸酶的识别序列与切割位点;图2为某种基因表达载体的示意图(载体上的EcoR I、Sau3AI的切点是唯一的)。

(1)三种限制性内切核酸酶切割产生的DNA片段末端均为________末端，判断依据是_______________________。
(2)经BanH I酶切后得到的目的基因可以与图2表达载体被____________酶切后的产物连接，理由是________________________。
(3)图2中启动子的作用是_______________________，抗生素抗性基因的作用是__________________。
(4)图3是根据图2制成的三个基因表达载体。甲、乙、丙三个重组DNA分子中，可以在宿主细胞中正常表达目的基因产物的有________，理由是______________。

【推荐1】利用转基因技术使外源DNA片段在组织或器官中特异性表达的转基因生物叫生物反应器。请回答下列问题：
（1）利用转基因动物生产生长激素时，若要使生长激素在动物的乳汁中批量生产，应选择性染色体组成为____________的哺乳动物的____________作为受体细胞。
（2）外源基因在血液中表达的转基因动物叫血液生物反应器，血液生物反应器中的转基因产物应从____________中提取。不宜用血液生物反应器生产动物激素，原因是____________。
（3）叶绿体生物反应器是通过将目的基因导入叶绿体基因组实现的，叶绿体基因组有基因区和基因间隔区，为了保证原有基因的功能不受影响，外源基因应导入_________区。叶绿体基因工程能避免外源基因随花粉扩散，原因是____________。

【推荐2】人外周血单核细胞能合成白细胞介素2（IL﹣2）．该蛋白可增强机体免疫功能，在体内易被降解．研究人员将IL﹣2基因与人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL﹣2生理功能、且不易降解的IL﹣2﹣HSA融合蛋白．其技术流程如图．请回答：

（1）图中②过程的原料是_____，③过程的模板是_____．表达载体1中的位点_____ 应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2．
（2）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL﹣2蛋白对应的碱基序列不能含有_____，才能成功表达出IL﹣2﹣HSA融合蛋白．
（3）在上述基因工程的操作过程中可以遵循碱基互补配对原则的步骤有_____（用序号表示）．
（4）不同种生物之间的基因移植成功，从分子水平分析，进行基因工程的主要理论依据是（至少2点）_____，_____．
（5）培养人外周血单核细胞时，通常需要在合成培养基中加入_____等，此外还需要通入_____ （气体），该气体的作用是_____．
（6）应从重组酵母菌中提取_____，用相应的抗体进行_____，来检测酵母菌是否表达出IL﹣2﹣HSA融合蛋白．
（7）如果基因表达载体2导入的是优质奶牛的受精卵细胞，经胚胎培养后移入受体母牛子宫_____．

【推荐3】内皮素（ET）是一种多肽,主要通过与靶细胞膜上的ET受体（ET_A）结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体，实现ET_A基因在大肠杆菌细胞中的高效表达，其过程如下图所示，

图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为，限制酶XhoⅠ的识别序列为。请据图分析回答：
（1）进行过程①时，需要加入缓冲液、引物、dNTP和___________酶等。完成过程①②③的目的是
___________。
（2）过程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使___________键断开，形成的黏性末端是___________。
（3）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子是___________的部位，进而可驱动基因的转录。除图中已标出的结构外，基因表达载体还应具有的结构是___________。
（4）过程⑥要用CaCl₂预先处理大肠杆菌，使其成为容易吸收外界DNA的___________细胞。
（5）将SNAP基因与ET_A基因结合构成融合基因，其目的是有利于检测___________。

【推荐1】[生物——选修3:现代生物科技专题]水稻是我国重要的粮食作物，植物组织培养技术在水稻育种和繁殖中有重要作用。请回答：
（1）以水稻的花药作外植体，经脱分化后可形成愈伤组织。与外植体相比，愈伤组织细胞的特点是___________________。比较脱分化培养基和再分化培养基，二者的基本成分相同，但用于诱导细胞分化的___________不完全相同。
（2）水稻的单倍体育种过程包括___________和___________，与杂交育种相比单倍体育种的优点是______________________。
（3）杂种优良稻所结籽粒不宜做种子，故人们常用人工种子解决此类水稻的繁殖问题：以植物组织培养得到的为____________________材料，外面包上人工种皮。人工种皮的成分中除有积碳、无机盐外，还可添加___________等物质，用以促进人工种子的牛长发育、提高抵抗病菌的能力。与天然种子相比，人工种子的优点是___________。

【推荐2】习近平总书记在参加十四届全国人大一次会议江苏代表团审议时强调，“农业强国是社会主义现代化强国的根基，推进农业现代化是实现高质量发展的必然要求”。目前，资源要素投入对粮食产量提升的驱动力明显减弱，亟须转基因等前沿技术新突破为保障粮食安全注入新动能。2023年，我国转基因大豆、转基因玉米的产业化试点已进一步扩大。如图所示是转抗草甘膦基因——cp4-epsps大豆培育时利用的质粒和目的基因。回答下列问题：
       
(1)用PCR获取抗除草剂基因时，连续扩增循环4次，需要的引物数为_____个，在引物中加入限制酶识别的碱基序列时，应加在引物的_____端。
(2)已知限制性内切核酸酶BamHI、BclI、Sau3AI、HindⅢ识别的碱基序列分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT，质粒与含抗除草剂基因的DNA片段中限制酶的切割位点如图所示，处理质粒和目的基因时选用的限制酶为_____。若质粒中无位于左侧的HindIII切割位点，则对限制酶的最佳选择为_____。双酶切处理的优势是_____。
(3)若转化方法为农杆菌转化法，所用载体与图1最大的不同是农杆菌的Ti质粒中一定含有_____片段，并且用于切割Ti质粒的限制酶切位点应该位于该片段内。筛选出转化成功的细胞后进行植物组织培养时，在不同时期使用的培养基存在差异，不同培养基最大的区别是_____。

【推荐3】如图是获取番茄一马铃薯杂种植株的过程示意图，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。请据图回答下列问题：

(1)科学家尝试将番茄和马铃薯采用有性杂交的方法很难得到杂种后代，因为他们之间存在着天然的___。
(2)培育番茄一马铃薯杂种植株依据的生物学原理有2个，分别是___。
(3)过程①常用的酶是___，细胞融合完成的标志是___。
(4)和植物原生质体融合方法相比，动物细胞融合特有的方法是___，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到___种不同的原生质体（只考虑细胞两两融合的情况），当观察到融合细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。
(5)过程③和过程④依次为___和___，所用培养基常采用___法灭菌处理。培养基中常添加的植物激素是___。
(6)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含___条染色体。

【推荐1】据调查，我国13亿人口中有9亿生活在农村，为解决人多地少的矛盾，实现物质的多级循环利用，应建立农村综合发展型生态工程。如下图为某农业生态系统的示意图。

回答下列问题。
(1)生态工程的目的就是遵循自然界______规律，充分发挥资源的生产潜力，防止______，达到经济效益的同步发展。
(2)该生态工程设计突出体现了______的原理。在发展种植业时，若连年种植单一品种易造成虫害增加，主要是因为违背了生态工程的______原理，导致该生态系统的降低。
(3)该系统中，人畜粪便、枯枝败叶等可以转变为有机肥料，这个过程离不开生态系统成分中的______，施用有机肥料的优点是______；______；______（答出3点即可）。
(4)请构建该农村综合发展型生态工程的食物网：______。

【推荐3】某城市在建设过程中，更加注重生态文明的建设。如利用人工建立的湿地公园对生活污水进行净化处理，形成藻菌共生的污水净化系统，还可以利用藻类蛋白养鱼、养鸭等获得良好的经济效益。下面是利用人工湿地净化生活污水的原理简图。请据图回答问题。

(1)输入该湿地生态系统的能量为____________。
(2)该人工湿地中的芦苇、藻类等植物生长迅速，其主要原因是_________________________________，芦苇（挺水植物）的存在一般可以缓解或防止“水华”的发生，原因是__________________。
(3)对城市环境的治理要把整个城市作为一个巨大的生态系统来考虑，首先在城市规划和布局方面要进行_______；其次是减少污染的产出，同时采用各种手段治理污染，进行废弃物的资源化利用，这体现了生态工程的_________原理。
(4)发展生态工程，必须对发展的含义有全面的理解，坚持________才能从根本上解决环境污染问题。