【推荐1】胰岛素可用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。下图是新的速效胰岛素的生产过程，回答下列问题。
   
(1)新的胰岛素生产过程属于________工程，该工程的操作步骤为________（用图示序号表示）。
(2)在体外利用PCR技术对人工合成的新的胰岛素基因进行扩增时，需向反应体系中加入热稳定的DNA聚合酶，该酶作用的温度为________℃左右。还需要在反应体系中加入引物，引物的作用是________________。
(3)在大肠杆菌细胞中合成的新的胰岛素，需通过生化制备与重折叠才具备预期的功能，原因是________。

【推荐2】家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药。
(1)进行转基因操作前,需用___酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的__和___之间。
(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg²⁺)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、__________和___________。
(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以___________增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。

【推荐1】科学家将大麦细胞中的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌可产生相应蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒，基本的操作过程如图所示。请据图回答下列问题：

(1)图中所示技术定向改变了酵母菌的性状，所利用的原理是___________________。
(2)本操作中为了将LTPI基因导入酵母菌细胞内，所用的运载体是___________________。
(3)图中a、b过程使用到的酶分别是___________________。
(4)将LTP1基因导入酵母菌细胞并成功表达，这里“成功表达”的含义是___________________。

【推荐2】γ干扰素具有抗病毒活性、参与免疫调节和控制细胞生长等功能。研究人员利用基因工程等相关技术获得了γ干扰素，并制备了γ干扰素单克隆抗体以检测γ干扰素。回答下列问题。
(1)在获得γ干扰素过程中，将γ干扰素基因与载体重组时运用的工具酶_____、_____，研究人员将基因表达载体导入大肠杆菌，不能获得具有活性的干扰素的原因是_____。
(2)在制备γ干扰素单克隆抗体时，给小鼠注射γ干扰素，其目的是_____。促进B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合常用的试剂是_____，用特定的_____培养基对融合后细胞进行筛选，只有_____能够生长。经多次筛选，选出能分泌特定抗体细胞所依据的原理是_____。
(3)将最终获得的细胞在体外培养时，通常给予37℃、5%CO₂等适宜条件并定期更换培养液，其中5%CO₂的主要作用是_____，定期更换培养液的作用是_____。

【推荐3】基础知识填空：
(1)获得纯净培养物的关键是____________________，无菌技术主要包括__________和_________。
(2)基因工程中除质粒外，______________和____________也可以作为载体。基因工程的核心步骤是_____________________________。
(3)植物体细胞杂交技术对于培育作物新品种方面的重大意义在于打破__________________，实现________________育种，该育种过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？________。

【推荐1】绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒（TMV）的基因，可以合成一种抗TMV蛋白，使其叶片对TMV具有抗感染特性。烟草是具有重要经济价值的双子叶植物，TMV的感染会导致烟草大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如图所示。

(1)科学家从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中①过程表示_____。
(2)④过程表示将重组Ti质粒导入烟草体细胞，其常用方法是_____。
(3)由图分析，在③过程构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是_____基因，它的作用是_____。
(4)⑥过程还需要进行的基因工程操作步骤是_____，在个体水平上检验获得的烟草能否抗TMV的方法是_____。

【推荐3】“奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点。请据图回答下列问题：

（1）在基因工程中。如果直接从苏云金芽孢杆菌中获得抗虫基因，需要用到_______酶，该种酶的特点是____________。获得抗虫基因的过程可用图中序号____________表示。
（2）上图中B表示____________。将目的基因导入受体细胞的过程中，在②过程中一般采用____________，受体细胞一般是____________；在③过程中一般采用____________。
（3）检测目的基因是否已经在奶山羊乳腺生物反应器中成功表达，通常采用的检测方法是____________。

【推荐1】某质粒上有SaⅠⅠ、HindⅢ、 BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示，请回答下列问题。

（1）基因工程的核心步骤是_____________ ，此步骤的目的是使目的基因_______________。
（2）上图中的抗氨苄青霉素基因可以作为基因工程的____________基因，其作用是________。
（3）在构建重组质粒时，应选用_____________（填限制酶的名称）对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割，以防止目的基因和质粒自身环化。
（4）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖所必需的成分外，培养基A和培养基B分别含有__________、____________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是_______（填数字）菌落中的细菌。

（5）为了检测抗盐基因是否培育成功，既要用放射性同位素标记的____________作为探针进行DNA杂交检测，又要用_____________方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

【推荐2】回答下列问题：
（1）在基因工程中使用的载体除质粒外，还有________________、________________等。
（2）体外重组的质粒可通过________________处理法导入大肠杆菌细胞；而体外重组的噬菌体DNA通常需与________________组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞。在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是________________。
（3）若想利用牛乳腺生物反应器来生产人的干扰素，需先将干扰素基因导入________________（受精卵或乳腺细胞）中，还要应用到胚胎工程的________________技术。

【推荐3】请回答有关基因工程的问题：
(1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端, 也可能产生 __________末端。
(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其 中启动子的作用是__________。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用处理大肠杆菌，以利于表达载体进入__________。
(3)为了检测胰岛素基因是否转录出了 mRNA，可用标记的__________片段作探针与mRNA杂交。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成蛋白质，常用__________技术。
(4)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌 Ti质粒的__________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的____上。