实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( )
A.RT-PCR技术需要用到逆转录酶和热稳定DNA聚合酶 |
B.PCR过程中需加入两种引物和4种脱氧核苷酸 |
C.引物和探针都需与目的基因进行碱基互补配对 |
D.若检测结果没有荧光发出,说明被检测者感染了病毒 |
更新时间:2022-06-27 08:51:01
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【知识点】 PCR扩增的原理与过程解读
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【推荐1】基因工程可按照人们意愿定向改造生物的性状,下列相关叙述错误的是( )
A.PCR过程中使用的两种引物一般情况下能互补配对 |
B.DNA聚合酶和DNA连接酶能催化形成相同的化学键 |
C.不同的限制酶切割DNA形成的黏性末端可能相同 |
D.启动子和终止子分别位于基因的上游和下游,调控转录过程 |
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适中
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【推荐2】SRY基因为Y染色体上的性别决定基因,可用SRY-PCR法鉴定胚胎性别,其基本程序如下图,相关说法不合理的是 ( )
A.通常提取囊胚期滋养层细胞的DNA作为扩增模板 |
B.PCR反应需要提供含DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸和耐热DNA聚合酶的缓冲溶液 |
C.扩增相同时间,获得DNA的含量与模板DNA及引物的量成正相关 |
D.PCR扩增得到的DNA含有胚胎细胞全部的遗传信息 |
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解题方法
【推荐3】第一代基因测序技术又叫双脱氧链终止法,它以DNA合成反应为基础,反应体系中需加入ddNTP(有ddATP、ddGTP、ddCTP、ddTTP4种)。下图是该技术的测序原理和某待测DNA序列的电泳图谱。下列说法错误的是( )
A.反应体系中加入ddNTP的作用是使DNA复制停止 |
B.待分离DNA片段有可解离的基团,在一定PH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷 |
C.需根据待分离DNA片段的大小用电泳缓冲液配置琼脂糖溶液浓度 |
D.待测DNA的碱基序列是3'-GACTGCCA-5' |
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