【推荐1】科学家为了提高干扰素的抗病毒活性和储存稳定性，采用重叠延伸PCR技术，将干扰素基因中相应位点的C//G碱基对特定突变为G//C碱基对，从而使干扰素中的第17位氨基酸由半胱氨酸变成丝氨酸。该技术采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来，获得定点突变的干扰素基因，然后导入大肠杆菌生产表达新的干扰素，原理如下图。回答下列问题：

(1)利用重叠延伸PCR技术诱变干扰素基因时，将预期的突变碱基设计在PCR的引物3和引物4中，制备出“PCR体系1”和“PCR体系2”，分别进行PCR扩增。“PCR体系1”中加入的引物是_______。得到图中由c、d链构成的完整DNA分子至少需要“PCR体系2”进行________次循环。
(2)将PCR体系1、2的产物（图中ab和cd）混合后，继续进行下一次PCR反应。在该PCR反应体系中经过高温变性后，当温度下降到55℃，能够互补配对的DNA链相互结合，理论上有_______种结合的可能，其中能进行进一步延伸的有______种。
(3)为便于构建基因表达载体，需要将限制酶EcoRⅠ和SalⅠ的识别序列分别引入诱变干扰素基因的两端，操作思路是________________。

【推荐2】2023年1月，两北农林科技大学某团队利用核移植技术培育了一批克隆高产长寿奶牛，现在“克隆”一词的含义范围较大，包括不同系统层次的“复制”，例如个体水平、细胞水平、分子水平的克隆。请回答下列问题：
(1)高产长寿奶牛个体的克隆成功，说明动物的_______具有全能性，核移植过程中，从牛的卵巢采集的卵母细胞需在体外培养到______期。为提高重构胚的利用率，可采用_____技术，该技术可以看作动物克隆的方法之一。
(2)个体水平的克隆广义上还包括植物组织培养技术和微生物的繁殖等，将外植体培养得到完整植株时，植物激素中______是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向；分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是______。
(3)单克隆抗体是由单一细胞克隆产生大量的单一抗体。美西螈具有很强的再生能力，研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体。在抗CD14单克隆抗体制备时，最先需给小鼠注射_____，其目的是______。单克隆抗体制备过程至少需要两次筛选，第2次筛选时，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是______。
(4)分子水平的克隆如基因的克隆可采用PCR技术，PCR的产物常采用_____来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与_______等有关（至少答出两点）。

【推荐3】人体内天然产生的激素含量都很少，科学家欲用基因工程的方法获取大量的生长激素。回答下列问题：
(1)利用基因工程的方法获取生长激素时，需要构建生长激素基因表达载体，构建基因表达载体的目的是_____（答出一点）；基因表达载体中，启动子的作用是_____。
(2)PCR技术是获得目的基因的方法之一，扩增目的基因需要引物，请在下图中正确标出引物的位置及方向；根据DNA中存在的引物类型，不考虑DNA片段的大小，最终扩增出的DNA片段有_____种；对PCR扩增产物进行电泳鉴定时，发现有许多种相对分子质量比目的基因小的DNA片段，推测原因可能是_____（答出一点）。

   

(3)科学家欲让生长激素基因在哺乳动物的乳腺细胞中表达，制成乳腺生物反应器，请写出大致的设计思路：_____。

【推荐1】2019年底爆发的新型冠状病毒肺炎（COVID-19）是由SARS-CoV-2病毒引起的，能否快速、准确地检测出病原体成为疾病防控的关键。请回答：
（1）下图表示SARS-CoV-2病毒检测的部分流程。科学家以病毒的RNA为模板通过①____________过程合成cDNA，再对cDNA进行PCR扩增，这项技术称为RT-PCR。

（2）进行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要从cDNA中扩增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核壳蛋白基因N关键在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起构成反应体系。
（3）RT-PCR加入Taqman荧光探针可以通过测定荧光强度来检测产物浓度，原理如下：Taqman荧光探针为一段与_____________互补的核苷酸单链，两端分别连接一个荧光基团R和一个淬灭基团Q。探针结构完整时，R发射的荧光被Q吸收；而PCR扩增时结合在模板链上的探针被切断，使R和Q分离，R基团发射的荧光不被淬灭，这样通过对荧光信号强弱的监测就可实现对产物的检测。荧光信号达到设定的阈值时，经历的循环数越少，说明含有病毒的概率越____________。
（4）一次核酸检测历时需16小时，为快速检测可采用抗原-抗体杂交技术，这一技术的关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体.请写出生产这种抗体的思路：__________________。

【推荐2】Ⅰ、神经系统对内分泌功能的调节有甲、乙、丙三种方式如图所示。据图分析：

(1)甲状腺激素分泌量的增加，会导致下丘脑和垂体有关激素分泌量______，此种调节机制称为_____调节。
(2)抗利尿激素的合成和分泌是通过图中_______（甲、乙、丙）模式进行的，使其分泌量增加的适宜刺激是______________。
(3)当血糖含量降低时，一方面可以直接刺激________，引起胰高血糖素分泌增加；另一方面也可以通过图中________（甲、乙、丙）模式调节其分泌量。
Ⅱ、2021年8月18日，世卫组织举行新冠肺炎例行发布会，世卫组织首席科学家苏米娅·斯瓦米纳坦表示，德尔塔变异株的传染性强，但新冠疫苗仍能有效防止德尔塔变异株导致的重症和死亡。回答下列问题：
(4)研究表明，人体某些细胞表面存在ACE2蛋白，德尔塔毒株的棘突蛋白（S蛋白）能特异性地识别ACE2蛋白并与之结合，据此推测德尔塔毒株主要寄生在人体呼吸道与肺部的原因是_________。
(5)多数老年人体内的T细胞数量较少，在感染德尔塔毒株后会很快发展成重症患者甚至死亡，原因是________________________。

【推荐3】新冠病毒进入机体可刺激机体产生IgM和IgG两类抗体，检测血清中的IgM和IgG常作为诊断是否感染的指标之一。图1表示病毒感染及发病流程，图2表示多次免疫应答时机体产生抗体水平。请回答下列问题：

(1)对密切接触者实行一定时间集中医学观察的依据是_____________。接种新冠病毒疫苗者和既往．感染新冠病毒者，原则上不以抗体检测作为诊断依据的原因是____________。
(2)初次免疫应答首先产生______________类抗体，该抗体主要分布在________________中。二次免疫应答时，______________细胞受抗原刺激后增殖分化为浆细胞产生两种抗体。
(3)接种疫苗是预防感染新冠病毒的有效手段，接种第三针（加强针）疫苗的作用是____________.
(4)对某患者的四位密切接触者进行抗体检测，四人均未接种新冠疫苗也无既往新冠病毒感染病史，结果如下表。

密切接触者	甲	乙	丙	丁
IgM	+	-	-	+
IgG	+	-	+	-

注：“-”表示未检出相应抗体；“+”表示检出相应抗体
从检测结果推测，______________已被感染，理由是________________;其中，首先被感染的最可能是____________。不能判断其余人员是否被感染，原因是_______________，需要通过核酸检测来进一步诊断。