【推荐3】1965年9月17日，中国在世界上首次人工合成蛋白质——具有生物活性的结晶牛胰岛素，为人类揭开生命奥秘、解决医学难题迈出重要一步。是中国人攀登世界科技高峰征程上的一座丰碑。
胰岛素是人和哺乳动物体内的一种蛋白质。1921年，加拿大班廷等首次提取到胰岛素，并成功地应用于治疗糖尿病；从1945年到1955年，英国桑格经10年努力，破解了牛胰岛素的化学结构。我国科学家在此基础上，分三步开展了人工合成胰岛素的研究：
a．把天然牛胰岛素的A、B两条链拆开，尝试把A、B两条链再重新组合成为牛胰岛素并获得成功（新组合后仍有活性）；
b．分别合成牛胰岛素的A、B两条链，并用人工合成的B链同天然的A链结合生成半合成的牛胰岛素；
c．人工合成的A链与B链相结合后形成胰岛素。并通过小鼠惊厥实验证明了其具有和天然牛胰岛素相同的活性。
(1)上述每一过程都包含无数次的化学反应，而完成每一反应都经过了无数次的尝试。如下图中只是两种氨基酸（R₁和R₂）仅仅合成二肽时，脱水缩合就可能形成____________种二肽化合物。

每条肽链的一端有1个游离的氨基（肽链N端），另一端有1个游离羧基（肽链C端）。假设一个R₁分子与一个R₂分子合成一个二肽，拟定R₁成为二肽的N端，需要先对R₁的____________（“氨基”/“羧基”）进行保护，再让R₁与R₂进行反应。
(2)人和动物体内天然胰岛素的生物学活性（即功能）是促进全身组织细胞从血液中____________、____________葡萄糖，促进肝脏和骨骼肌合成糖原以储存葡萄糖，从而使血糖水平降低。胰岛素是人体内唯一能够降低血糖的激素，如果人体内胰岛素减少，则血糖过高，会患1型糖尿病。
(3)胰岛素是治疗1型糖尿病的特效药，人胰岛素在细胞内（合成）加工的过程如下图所示。

目前人类主要利用基因工程方法生产药用人胰岛素。早期的基因工程都是大肠杆菌原核细胞为受体。所以，只能先按照人胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列合成两个基因，让大肠杆菌用这两个基因分别合成人胰岛素的A、B两条肽链。从大肠杆菌细胞中分别分离提纯肽链A和B后，再在细胞外将肽链A和B合成人胰岛素。从大肠杆菌细胞中分别分离提纯肽链A和B的主要步骤流程如下：____________→沉淀→过滤去除碎片等杂质→干燥结晶→层析提纯如果用真核生物酵母菌作为受体细胞生产胰岛素，则可尝试直接从转基因酵母菌中分离到胰岛素，而无需先分别生产A、B两条肽链。结合上图和已有知识分析原因： _________________。
(4)我国科学家人工合成胰岛素之后，选取了适量健康小鼠，随机分为A、B、C三组，A组注射适量的天然胰岛素，B组注射等量的人工合成的胰岛素，C组注射等量的生理盐水。20分钟后，A、B组小鼠逐渐出现四肢无力、活动减少，甚至昏迷等低血糖症状。C组小鼠的活动状况无变化。对A、B组小鼠，注射葡萄糖溶液后，上述症状得到缓解。本实验证明了：①胰岛素具有________的生物活性，②__________________。