抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种人体血浆蛋白,临床上作为药物主要用于血液性疾病的治疗。下图为培育转基因绵羊生产抗凝血酶Ⅲ蛋白药物的流程图。请回答:
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(1)在过程①构建的基因表达载体中,为实现抗凝血酶Ⅲ基因能在转基因绵羊的乳腺细胞中表达,应让该基因与___________ 的启动子等调控组件结合在一起,转基因绵羊进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产抗凝血酶Ⅲ蛋白。过程④中采用的最为有效的技术是__________ 。
(2)过程⑤涉及到的动物细胞工程技术是___________ ,应选处于___________ 期的卵母细胞作为受体细胞。且对受体细胞作去核处理,目的是__________ 。
(3)过程⑥早期胚胎培养过程中,培养液成分除了无机盐和有机盐、微生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还需要添加____________ 。过程⑦移植后的胚胎在受体子宫存活的生理学基础是__________ 。
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(1)在过程①构建的基因表达载体中,为实现抗凝血酶Ⅲ基因能在转基因绵羊的乳腺细胞中表达,应让该基因与
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更新时间:2023-03-10 12:57:48
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【推荐1】BMP15蛋白是由卵母细胞分泌的一种转化生长因子,在卵巢发育过程中起着重要的调节作用。为研究兔BMP15基因在兔繁殖机能的调控机制,科学家进行了相关实验,如图1所示。克隆出新西兰白兔BMP15基因,与Myc基因形成融合基因,构建该基因的真核表达载体,并对产生的BMP15蛋白进行分析,以期为深入研究BMP15基因对卵巢发育的调控机制奠定基础。回答下列问题:_______ 组织的RNA,经RT-PCR过程获得大量的BMP15基因。图1中①②③过程用到的酶有__________ 。
(2)PCR步骤为变性—复性—延伸,需要引物参与,引物的作用是_______ 。
(3)重组载体的组成除了图上所示,还应该有_______ 。
(4)在导入大肠杆菌之前,需要先用_______ 处理,使其处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。导入后应将受体菌在16℃环境中过夜处理,以完成转化。转化指的是_________________ 。
(5)④步骤应将转化好的菌涂在含有______________ 的培养基上,获取菌落。可通过抗原—抗体杂交实验,加入Myc蛋白抗体来检测BMP15基因是否表达的机理为______________ 。
(2)PCR步骤为变性—复性—延伸,需要引物参与,引物的作用是
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【推荐2】苹果切开一段时间后会发生褐变,原因是受损细胞中的多酚类物质会在多酚氧化酶(PPO)催化下迅速氧化。研究人员试图通过RNA干扰技术,抑制PPO的合成,从而培育不会褐变的苹果。如图表示RNA干扰技术的原理。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/5/21/2208339466985472/2212012944646144/STEM/6f66b2026a2240559a8f1a7b65981b8b.png?resizew=503)
回答下列问题
(1)RNA干扰技术需要先合成能转录出特殊双链RNA的目的基因,构建______ 后,通常利用______ 法将其导入苹果叶肉细胞并进行表达。图中Dicer酶的作用类似限制酶,其专一性体现在能______ 并将其切割成较小的片段,切割后一段短小RNA参与形成诱导沉默复合体,特异性地引起PPO的转录产物降解。可见,RNA干扰技术通过影响遗传信息的______ 过程抑制蛋白质合成。
(2)利用______ 技术可将成功导入目的基因的苹果叶肉细胞培育成完整植株。这一技术的原理是______ 。要诱导离体的叶肉细胞脱分化形成______ 组织,培养基中应含有______ (成分)。
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回答下列问题
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【推荐3】Ⅰ.利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示,回答下列问题:
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(1)过程①需要______ 酶,过程②需使用______ 技术(必须写中文名)获取大量的目的基因。
(2)过程③最常用的方法是:首先用______ 处理细胞,使其成为感受态细胞,然后将重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合,在一定条件下完成转化过程。
(3)过程④可利用DNA分子杂交技术,其目的是___________________ 。
Ⅱ.人体感染新冠病毒后,机体会产生多种特异性抗体。我国科学家从康复者的浆细胞中克隆出针对病毒表面抗原的抗体基因相关序列,构建表达载体并在相应系统中表达,可制备出全人源单克隆抗体。回答下列问题:
(4)传统抗体的制备是向生物体内反复注射某种抗原,使生物体产生抗体,从动物的血清中分离所需抗体,但用这种方法提取的抗体,具有_____________ (至少写出两点)等缺点,现在逐步被单克隆抗体取代。
(5)通过特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞后,还需进行_______________ ,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(6)制备出的全人源单克隆抗体可否直接用于新冠病毒的核酸检测,请说明理由:_______ 。
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(1)过程①需要
(2)过程③最常用的方法是:首先用
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Ⅱ.人体感染新冠病毒后,机体会产生多种特异性抗体。我国科学家从康复者的浆细胞中克隆出针对病毒表面抗原的抗体基因相关序列,构建表达载体并在相应系统中表达,可制备出全人源单克隆抗体。回答下列问题:
(4)传统抗体的制备是向生物体内反复注射某种抗原,使生物体产生抗体,从动物的血清中分离所需抗体,但用这种方法提取的抗体,具有
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【推荐1】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。请回答下列问题:
(1)早期胚胎通常来自转基因、_______ 、_______ 等技术获得的胚胎。
(2)进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力,其原因是供体的主要职能是__________________ ,繁重而漫长的妊娠和育仔任务由受体取代;同时对供体施行__________ 处理并完成受精作用后,可获得多个胚胎。
(3)胚胎移植能否成功,与供体和受体的__________ 有关,由此可知,胚胎移植的实质是______________________________________ 。
(4)早期胚胎形成后,在一定时间内处于________ 状态,这就为胚胎的收集提供了可能;此外,受体对移入子宫的外来胚胎____________________ ,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(1)早期胚胎通常来自转基因、
(2)进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力,其原因是供体的主要职能是
(3)胚胎移植能否成功,与供体和受体的
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【推荐2】杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点,被称为“钻石级”肉用绵羊.科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示,请据图回答问题:______ 时期.采集的精子需要经过______ .才具备受精能力.判断卵细胞是否受精的重要标志是__________________________ 。
(2)在胚胎移植前要对提供胚胎的杜泊羊用______________ 激素进行超数排卵处理,接受胚胎的当地普通绵羊进行___________ 处理。代孕母羊对置入子宫的早期胚胎基本上不发生_______________ ,这就为早期胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。
(3)采用胚胎分割技术能得到“同卵多胞胎”,对囊胚期的胚胎进行分割时,要注意将____ 均等分割,否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。
(4)在繁育过程中,出现了一只体型特别大的良种奶牛,若要快速地大量繁殖出同样大体型的个体,可采用的技术是______________________ 。
(2)在胚胎移植前要对提供胚胎的杜泊羊用
(3)采用胚胎分割技术能得到“同卵多胞胎”,对囊胚期的胚胎进行分割时,要注意将
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【推荐3】如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解,请据图回答:
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(1)图中①所示的结构是_________________ ;②所示的结构是____________________ .
(2)图中③所示的生物工程技术是______________ ;④所示的生物工程技术是___________ .
(3)在图中④所示的生物工程技术中,健康胰岛B细胞基因在进入②之前要构建___________ ,这是基因工程的核心,除含目的基因外,还必须含有启动子、终止子、标记基因.
(4)重组细胞b在一定的细胞分化诱导剂的作用下,可以定向分化形成胰岛B细胞,其根本原因是_______________________________________ .培养重组细胞b的培养液中除加入各种营养物质外,还必须加入______________________________________ .
(5)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是__________________________________ .
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(1)图中①所示的结构是
(2)图中③所示的生物工程技术是
(3)在图中④所示的生物工程技术中,健康胰岛B细胞基因在进入②之前要构建
(4)重组细胞b在一定的细胞分化诱导剂的作用下,可以定向分化形成胰岛B细胞,其根本原因是
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解题方法
【推荐1】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况。其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是黄牛。回答下列问题:_____ 期,并通过_________ 去除卵母细胞中的细胞核,用物理或化学方法激活重构胚,使其细胞分裂和发育进程,形成重组胚胎,完成最终克隆动物的遗传物质来自________ 。
(2)应用2,为获得试管牛的过程,在______________________ 之前,需要对采集的优良公牛的精子用_________________ 法进行获能处理。刚移植在子宫内的胚胎,其发育程度一般为_________ ,胚胎移植是胚胎工程的最后一道“工序”,胚胎能够在受体内存活的生理基础是_________ 。
(3)应用3中的细胞C取自牛胎儿的_________________ 。应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题;对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将______________ 均等分割,原因是若不均等分割___________________________ 。应用4在获得二分胚①和②的同时,需要取样囊胚的___________________ 细胞做DNA分析性别鉴定。
(2)应用2,为获得试管牛的过程,在
(3)应用3中的细胞C取自牛胎儿的
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【推荐2】通过胚胎工程建立的转基因动物模型,常用于基因表达调控的研究、良种动物的筛选以及基因药物的产生等。制备转基因鼠的流程如图所示,请回答下列有关问题:
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(1)体外受精时,人工采集的动物精子必须经过________ 处理才能完成图示中的①过程。
(2)在哺乳动物胚胎发育过程中,囊胚的上一阶段是________ 胚。小鼠胚胎干细胞可由囊胚的_____________ 分离培养获得。
(3)图示中甲为处于________________ 期的去核卵母细胞。以成熟体细胞为供体进行⑤过程成功率很低,而以胚胎干细胞为供体成功率会显著提高,原因是___________________ 。
(4)图中重组细胞需要利用______________ 技术培养到适宜时期才能移入另一只经____________ 处理、未经配种的代孕母鼠体内。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/5/11/2718672744341504/2741475150921728/STEM/4bafd82ab70c4877ba0f6dda2584aee0.png?resizew=568)
(1)体外受精时,人工采集的动物精子必须经过
(2)在哺乳动物胚胎发育过程中,囊胚的上一阶段是
(3)图示中甲为处于
(4)图中重组细胞需要利用
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【推荐3】奶牛养殖业中乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)和人干扰素(抗病毒)的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体,图2为培育流程。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/1/19/1863955497607168/1866451424624640/STEM/88d1eaff6f724a93b6cd4d4f3aeacfb4.png?resizew=534)
(1)构建基因表达载体时要用到的工具酶是_______ 。图1中新霉素抗性基因的作用是_________ 。
(2)研究者利用含有乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因的DNA片段分别制成探针,与乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞等提取的RNA进行杂交:结果如下表:
说明:牛乳铁蛋白肽基因只能在转基因奶牛的___ 细胞中表达,人干扰素基因则可在转基因奶牛的_______ 细胞中表达,这与构建表达载体时__________ 的选择有关。
(3)图2中④是处于______________________________ (时期)的卵母细胞,而③一般选传代10代以内的细胞,理由是:________________________________________ 。
(4)不需要对重组胚胎性别进行鉴定,理由是:________________________________ 。
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(1)构建基因表达载体时要用到的工具酶是
(2)研究者利用含有乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因的DNA片段分别制成探针,与乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞等提取的RNA进行杂交:结果如下表:
探针结果 | 乳腺细胞 | 口腔上皮细胞 | 蹄部细胞 |
乳铁蛋白肽基因探针 | 出现杂交带 | 未出现杂交带 | 未出现杂交带 |
人干扰素基因探针 | 出现杂交带 | 出现杂交带 | 出现杂交带 |
说明:牛乳铁蛋白肽基因只能在转基因奶牛的
(3)图2中④是处于
(4)不需要对重组胚胎性别进行鉴定,理由是:
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