组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 基因表达载体的构建
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:308 题号:18375894
抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种人体血浆蛋白,临床上作为药物主要用于血液性疾病的治疗。下图为培育转基因绵羊生产抗凝血酶Ⅲ蛋白药物的流程图。请回答:

(1)在过程①构建的基因表达载体中,为实现抗凝血酶Ⅲ基因能在转基因绵羊的乳腺细胞中表达,应让该基因与___________的启动子等调控组件结合在一起,转基因绵羊进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产抗凝血酶Ⅲ蛋白。过程④中采用的最为有效的技术是__________
(2)过程⑤涉及到的动物细胞工程技术是___________,应选处于___________期的卵母细胞作为受体细胞。且对受体细胞作去核处理,目的是__________
(3)过程⑥早期胚胎培养过程中,培养液成分除了无机盐和有机盐、微生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还需要添加____________。过程⑦移植后的胚胎在受体子宫存活的生理学基础是__________

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【推荐1】BMP15蛋白是由卵母细胞分泌的一种转化生长因子,在卵巢发育过程中起着重要的调节作用。为研究兔BMP15基因在兔繁殖机能的调控机制,科学家进行了相关实验,如图1所示。克隆出新西兰白兔BMP15基因,与Myc基因形成融合基因,构建该基因的真核表达载体,并对产生的BMP15蛋白进行分析,以期为深入研究BMP15基因对卵巢发育的调控机制奠定基础。回答下列问题:

(1)获取目的基因:选取幼龄健康的新西兰白免雌兔,对BMP15基因在各组织中的表达情况进行分析,如图2所示:

由结果可知,应采集新西兰白兔_______组织的RNA,经RT-PCR过程获得大量的BMP15基因。图1中①②③过程用到的酶有__________
(2)PCR步骤为变性—复性—延伸,需要引物参与,引物的作用是_______
(3)重组载体的组成除了图上所示,还应该有_______
(4)在导入大肠杆菌之前,需要先用_______处理,使其处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。导入后应将受体菌在16℃环境中过夜处理,以完成转化。转化指的是_________________
(5)④步骤应将转化好的菌涂在含有______________的培养基上,获取菌落。可通过抗原—抗体杂交实验,加入Myc蛋白抗体来检测BMP15基因是否表达的机理为______________
2024-04-13更新 | 10次组卷
非选择题 | 适中 (0.65)
【推荐2】苹果切开一段时间后会发生褐变,原因是受损细胞中的多酚类物质会在多酚氧化酶(PPO)催化下迅速氧化。研究人员试图通过RNA干扰技术,抑制PPO的合成,从而培育不会褐变的苹果。如图表示RNA干扰技术的原理。

回答下列问题
(1)RNA干扰技术需要先合成能转录出特殊双链RNA的目的基因,构建______后,通常利用______法将其导入苹果叶肉细胞并进行表达。图中Dicer酶的作用类似限制酶,其专一性体现在能______并将其切割成较小的片段,切割后一段短小RNA参与形成诱导沉默复合体,特异性地引起PPO的转录产物降解。可见,RNA干扰技术通过影响遗传信息的______过程抑制蛋白质合成。
(2)利用______技术可将成功导入目的基因的苹果叶肉细胞培育成完整植株。这一技术的原理是______。要诱导离体的叶肉细胞脱分化形成______组织,培养基中应含有______(成分)。
2019-05-27更新 | 152次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
名校
【推荐3】Ⅰ.利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示,回答下列问题:

(1)过程①需要______酶,过程②需使用______技术(必须写中文名)获取大量的目的基因。
(2)过程③最常用的方法是:首先用______处理细胞,使其成为感受态细胞,然后将重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合,在一定条件下完成转化过程。
(3)过程④可利用DNA分子杂交技术,其目的是___________________
Ⅱ.人体感染新冠病毒后,机体会产生多种特异性抗体。我国科学家从康复者的浆细胞中克隆出针对病毒表面抗原的抗体基因相关序列,构建表达载体并在相应系统中表达,可制备出全人源单克隆抗体。回答下列问题:
(4)传统抗体的制备是向生物体内反复注射某种抗原,使生物体产生抗体,从动物的血清中分离所需抗体,但用这种方法提取的抗体,具有_____________(至少写出两点)等缺点,现在逐步被单克隆抗体取代。
(5)通过特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞后,还需进行_______________,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(6)制备出的全人源单克隆抗体可否直接用于新冠病毒的核酸检测,请说明理由:_______
2021-11-10更新 | 191次组卷
共计 平均难度:一般