下列关于DNA片段的扩增(PCR技术)及电泳鉴定步骤的说法,错误的是( )
A.凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合,用于分离后DNA片段的检测 |
B.PCR既可以获取目的基因也可以扩增目的基因 |
C.双链DNA分子片段长度越大,在琼脂糖中的移动速率就越大 |
D.为避免外源DNA等因素的污染,PCR 实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水等在使用前须进行高压灭菌处理 |
更新时间:2023/05/06 08:40:02
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【知识点】 PCR扩增的原理与过程解读
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解题方法
【推荐1】RT-PCR是将mRNA逆转录(过程Ⅰ)和cDNA(mRNA逆转录产生的互补DNA)聚合酶链式反应(过程Ⅱ)相结合的技术,具体过程如图所示,下列有关说法错误的是( )
A.过程Ⅰ和过程Ⅱ的反应体系中主要用到工具酶分别是逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶 |
B.过程Ⅱ中拟对m个单链cDNA进行n次循环的扩增,理论上至少需要m×2n个引物B |
C.引物A和B的长度越长、G和C比例越高,则过程Ⅱ内循环步骤中的复性温度就越高 |
D.利用RT-PCR技术获取的真核生物的目的基因通过转基因技术可以在原核细胞中表达 |
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【推荐2】科学工作者经研究,发现了数种快速检验禽流感病原体的方法,以正确诊断禽流感,下列与禽流感病原体研究、诊断有关的说法中错误的是( )
A.镜检法:在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液,以发现病原体 |
B.PCR:体外基因复制技术,可在几十分钟内把病原体的基因扩展到数百万倍 |
C.抗原抗体法:用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的抗体特异性结合,发现病原体 |
D.DNA探针技术:利用DNA分子杂交原理来检测病原体 |
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解题方法
【推荐3】巢式PCR是一种使用两对引物扩增完整的片段的PCR。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对为内部引物结合在第一次PCR产物内部,使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增,其过程如下图所示。下列说法错误的是( )
A.两轮扩增所需引物不同,原料和酶相同 |
B.DNA的合成总是从子链的5'端向3'延伸与TaqDNA聚合酶的作用有关 |
C.用内引物进行PCR时,扩增n次后理论上需要2n个引物 |
D.巢式PCR可增强扩增的特异性 |
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