【推荐1】酿酒、酿醋、腐乳、泡菜、酱制品等是源于中国的传统发酵技术，为部分地区经济发展做出巨大贡献。请依据相关生物学知识回到下列问题。
（1）泡菜腌制过程中，进行发酵的主要微生物在细胞结构上属于___________生物。不能采用加入抗生素的方法来抑制杂菌的原因是____________________________。
（2）腐乳外部有一层致密的“皮”，是前期发酵时______等生物在豆腐表面上生长的菌丝。
（3）测定亚硝酸盐含量的方法是___________，在泡菜腌制过程中定期测定亚硝酸盐含量的目的是____________________________。
（4）为了保证既无杂菌，又能使发酵菌发挥正常作用，泡菜所用盐水应__________再使用。
（5）某些制作泡菜的某些蔬菜也可用作DNA粗提取与鉴定，沸水浴条件下，提取出的DNA可与_________试剂反应呈_______________色。

【推荐2】微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药—敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题：

(1)已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是______。依照物理性质划分，驯化培养基属于______培养基，其中蛋白胨可提供______，氯化钠和磷酸二氢钾两种无机盐，在培养基中具有______的作用（至少答两点）。
(2)用于筛选的样品应来自______的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为______，该方法不需要梯度稀释也能获得单菌落，原因是______。
(3)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中______，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了4个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、312、253，测得培养基C中活菌数为1.25×10⁷个/mL，则涂布的菌液Y为______mL。
(4)为获得纯培养物的高耐受基因X，实验小组应用纯培养物提取了DNA，检测DNA所用的原理是______。获得PCR产物后，用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行鉴定，影响DNA分子迁移速率的主要因素有______（答出两点即可）。

【推荐3】比较DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同

	溶解规律	2 mol/L NaCl溶液	0.14 mol/L NaCl溶液
DNA		____	____

【推荐1】当前全球新冠疫情形势依然非常严峻，尤其是新冠病毒出现了新变异株——德尔塔、奥密克戎，更是威胁着全人类的生命健康。
(1)实时荧光定量PCR（qPCR）可用于新冠病毒核酸检测，其原理如下图所示：在PCR反应体系中加入含特定核苷酸序列的荧光探针，当子链延伸至探针处时，探针会被DNA聚合酶水解从而表现出荧光。

qPCR前需要先根据新冠病毒基因的特定核苷酸序列合成引物和_____，并提取新冠病毒的RNA，加入到qPCR反应体系中。除此之外，该体系中还要加入_____酶和TaqDNA聚合酶，以及加入_____作为原料并提供能量。反应体系的荧光强度与原有待测基因含量及_____呈正相关。
(2)接种疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。重组腺病毒疫苗生产方法如下：将腺病毒的复制基因敲除；插入以新冠病毒抗原基因为模板合成的DNA片段（目的基因），构建重组腺病毒。将目的基因插入腺病毒DNA所需要用到的酶有限制性内切核酸酶和_____。重组腺病毒注入人体后，腺病毒作为载体，起到将目的基因_____的作用。与灭活新冠病毒疫苗相比，重组腺病毒疫苗的优势之一是可引起_____免疫，增强免疫保护效果。
(3)单克隆抗体有望用于治疗新冠肺炎。单克隆抗体的制备过程是：取经免疫的小鼠B细胞与骨髓瘤细胞混合培养，利用_____诱导其融合，然后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。将筛选出的杂交瘤细胞接种至发酵罐中悬浮培养，培养时进行低速搅拌的目的是_____（写出2点）。最后通过离心方法分离提取抗体。

【推荐2】科学家研究发现，从陆地棉基因文库中获取的酶D基因可与从拟南芥基因文库中获取的转运肽基因连接成融合基因，将该融合基因导入油菜细胞可获得含油量高的转基因油菜品种（如图2）。已知酶D基因和转运肽基因上所含三种限制酶（ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ）的切点如图1所示。回答下列问题：

（1）陆地棉基因组文库中___________（包含/不包含）这种生物的所有基因。
（2）限制酶的作用是______________________________________________________。
图1中用____________（ClaⅠ/SacⅠ/XbaⅠ）限制酶和____________酶处理两个基因后，可得到____________端（填字母）相连的融合基因。
（3）图2中一个“X”的组成除融合基因外，还必须有______________________，④过程是__________，“Y组织块”为_____________。
（4）图2中现代生物技术2在植物繁殖新途径方面的应用有___________________。（至少答出两点）

【推荐3】 番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如图，请回答：

1．过程①需要的工具酶有_______________________________。
2．在构建基因表达载体时，重组DNA中除插入目的基因外，还需要有________、终止子以及__________。
3．在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做_____________。
4．从图中可见，mRNAl和mRNA2的结合直接导致了_______________无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。多聚半乳糖醛酸酶基因与抗多聚半乳糖醛酸酶基因是否为等位基因？__________________。

【推荐1】农杆菌是一种需氧型细菌，能够进行生物固氮，其广泛分布于富含有机质的土壤中。农杆菌能够侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力，常用作基因工程的受体细胞。图1表示从土壤中分离农杆菌的过程。回答下列问题：

(1)从土壤中获取农杆菌时应取表层土壤，原因是____，筛选农杆菌时需要用____（填“不含氮源”或“富含氮源”）的培养基。
(2)北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。图2表示将抗冻基因导入番茄细胞中以获取转基因抗冻番茄植株的过程。
①农杆菌的Ti质粒上具有一段T-DNA，该DNA的特点是____。通过基因工程技术获取抗冻番茄植株，该技术的核心步骤是____。
②将导入了表达载体的农杆菌与取自番茄的细胞共同培养，通过农杆菌的____，就可使目的基因进入番茄的叶肉细胞，再通过____技术将细胞培养成完整的植株，与常规的种子繁殖方法相比，利用该技术培育抗冻番茄植株的特点是____、____。

【推荐2】新型冠状病毒肺炎是由一种新型冠状病毒（2019－nCoV，简称新冠病毒）引起的。根据相关材料回答下列问题：

材料一：由于疫情发展迅速，新冠病毒核酸检测可以快速有效的对病人及疑似患者的诊断提供直接证据。新冠病毒核酸检测采用荧光定量PCR仪，通过检测荧光信号的累积（以Ct值表示）来确定样本中是否有病毒核酸。新冠病毒的遗传物质为RNA，科学家先将病毒RNA逆转录，再将得到的cDNA进行扩增得到了大量DNA片段。
（1）过程①中，需要使用_______________酶。
（2）过程③中，需要设计________种引物，且设计时要避免引物之间__________，而造成引物自连。
（3）采集新冠肺炎疑似患者的咽部细胞样本提取核酸进行上述过程，若经逆转录获得了1 个cDNA，则在过程③中经 10次循环后，得到的DNA数量为________个。每一个扩增出来的DNA序列，都可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的靶基因越多，观察到的Ct值就越________。
材料二：应对不断蔓延的新冠肺炎，目前最好的方式仍然是接种疫苗。新冠病毒表面布满像皇冠一样的棘突蛋白（由S基因控制合成）。针对新冠病毒的疫苗可以通过模仿这些棘突蛋白，从而触发人体免疫系统的响应。下图表示疫苗的制作原理。

（4）如果利用基因工程研制新冠病毒疫苗，应选择________作为目的基因，以便用于后续操作。过程②表示构建____________，其组成除了目的基因外，还必须有__________。过程③需要用______处理细胞。

【推荐3】据科学家研究试验，一束由蜘蛛丝组成的绳子比同样粗细的钢筋强度还要大，它能够承受比钢筋还多5倍的重量而不会被折断；蜘蛛丝还非常富有弹性，一条直径只有万分之一毫米的蜘蛛丝，可以伸长两倍以上才会拉断。天然蜘蛛丝主要来源于结网，而且蜘蛛具有同类相食的个性无法像家蚕一样高密度养殖，所以要从蜘蛛中取得天然蛛丝产量很有限。科学家通过基因工程技术创造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白在国防、军事（防弹衣；战斗飞行器、坦克雷达、卫星等装备的防护罩等）、建筑等领域具有广阔应用前景。请回答：
（1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因最好从__________（填“基因组”或“cDNA”）文库中获取。若要获得大量的目的基因片段，可采用__________技术进行扩增，扩增过程需使用__________酶。
（2）基因工程基本操作中的核心步骤是__________，需使用的工具酶有__________，目的基因应与__________基因的启动子等调控组件组合在一起；基因表达载体需通过__________技术导入羊的__________。
（3）若所得到的“蜘蛛羊”乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，应先采用__________技术检测“蜘蛛羊”乳腺细胞中是否含有蛛丝蛋白基因（目的基因），若已确认此步成功，则应该继续检测是否__________。