基因表达载体的构建是基因工程的核心。图示为某基因工程中构建基因表达载体(P3)的过程,其中tetr为四环素抗性基因,ampr为氨苄青霉素抗性基因,EcoRV为限制酶。下列有关基因表达载体(P3)的叙述,错误的是( )
A.构建过程需要限制性内切核酸酶、DNA连接酶等 |
B.还应具有启动子、终止子、复制原点等组成部分 |
C.可采用PCR和电泳技术进行进一步的鉴定与验证 |
D.可在含氨苄青霉素的选择培养基上大量复制并表达 |
更新时间:2023-08-11 11:44:52
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【推荐1】植株在干旱、低温等逆境中,脱水素(具有一定抗干旱胁迫和耐冷冻能力的蛋白质)被诱导表达,脱水素基因编码区共含678个碱基对。科学家利用如图所示PBI121质粒,以及XbaⅠ和SacⅠ两种限制酶,运用农杆菌转化法,将脱水素基因导入草莓试管苗叶片细胞,再经植物组织培养获得脱水素基因过量表达的转基因草莓植株。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/5/11/2718641985478656/2719606326837248/STEM/088c3195-aca9-407e-90ef-0001572c11ad.png?resizew=603)
下列相关叙述,错误的是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2021/5/11/2718641985478656/2719606326837248/STEM/088c3195-aca9-407e-90ef-0001572c11ad.png?resizew=603)
下列相关叙述,错误的是( )
A.重组质粒利用SacⅠ和HindⅢ切割后能得到1500bp片段,则表明目的基因正确插入质粒 |
B.组织培养过程中,培养基需添加卡那霉素和新霉素以便筛选转基因植株 |
C.可以利用PCR技术鉴定目的基因是否整合到草莓染色体的DNA上 |
D.转基因草莓植株批量生产前需进行抗干旱、耐冷冻实验 |
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【推荐2】目的基因与载体结合所需的条件是
①限制酶 ②具有标记基因的质粒 ③DNA聚合酶 ④目的基因 ⑤DNA连接酶 ⑥四种脱氧核苷酸
①限制酶 ②具有标记基因的质粒 ③DNA聚合酶 ④目的基因 ⑤DNA连接酶 ⑥四种脱氧核苷酸
A.①②③④⑤ | B.②④⑤⑥ | C.②③④⑥ | D.①②④⑤ |
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解题方法
【推荐3】在构建基因表达载体时,传统方法常受限于限制酶识别序列。科研人员研发了新的DNA重组方法: In-Fusion技术。该技术关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA序列(即同源序列),然后用In-Fusion酶处理,使同源序列形成黏性末端,最终形成的重组质粒会在受体细胞内形成完整的重组序列。主要操作过程如图示。下列叙述错误的是( )
A.推测In-Fusion酶的作用是识别同源序列、形成黏性末端、连接磷酸二酯键 |
B.载体A端和B端的序列不同,可防止目的基因与质粒反向连接及自身环化 |
C.形成重组质粒时,如果温度远高于50℃,黏性末端的碱基不容易互补配对 |
D.该技术无需识别特定切割位点,需识别目的基因与线性质粒任意同源序列 |
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【推荐1】苏云金芽孢杆菌中存在一种BT基因,该基因编码合成一种毒性很强的蛋白质晶体,能使棉铃虫等目害虫瘫痪致死。1993年我国科学家将BT基因成功导入棉花作物,培育出了抗虫棉,下列有关叙述合理的是( )
A.基因工程的工具酶包括限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体 |
B.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒 |
C.新品种抗虫棉只能抵抗棉铃虫一种害虫 |
D.把BT基因转入棉花细胞核DNA中可以防止基因污染 |
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【推荐2】“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列说法错误的是( )
A.培育转基因抗虫棉时,需要从分子水平及个体水平进行筛选 |
B.制备单克隆抗体时,需要从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 |
C.单倍体育种时,需要对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养 |
D.胚胎移植前,需要对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选 |
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