猪圆环病毒(PCV)是一种单股环状DNA病毒,它是迄今发现的最小的动物病毒。现已知PCV有三个血清型,其中猪圆环病毒2型(PCV2)为致病性的病毒,是导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原体。为检测某猪场病猪是否感染该病毒,实验人员进行了以下操作:①分析PCR扩增结果;②从病猪组织样本中提取DNA;③利用PCR扩增DNA片段;④采集病猪组织样本。请回答下列问题:
(1)实验人员的正确操作顺序是__________ (用数字序号和箭头表示)。
(2)操作②中需要用到预冷的酒精溶液(体积分数为_______ %)来初步分离DNA与蛋白质,原理是____________________________ 。DNA能溶于2mol/L的__________ 溶液,且在一定温度下,DNA遇__________ 试剂会呈现蓝色。
(3)操作③中PCR反应中每次循环可分为__________ 三步。耐高温的DNA聚合酶能够从引物的__________ 端开始连接脱氧核苷酸。
(4)PCR扩增得到的产物常采用__________ 的方法来进行鉴定,其鉴定结果如下图:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/8/23/3309142333530112/3310644282736640/STEM/4251418760484a2dbbdd84686e27ee96.png?resizew=225)
注:M:DNAmarker;1-4:空白对照、阴性对照、阳性对照、样品
据图分析,阴性对照组2表示健康仔猪的DNA,阳性对照组3表示__________ 。
(1)实验人员的正确操作顺序是
(2)操作②中需要用到预冷的酒精溶液(体积分数为
(3)操作③中PCR反应中每次循环可分为
(4)PCR扩增得到的产物常采用
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2023/8/23/3309142333530112/3310644282736640/STEM/4251418760484a2dbbdd84686e27ee96.png?resizew=225)
注:M:DNAmarker;1-4:空白对照、阴性对照、阳性对照、样品
据图分析,阴性对照组2表示健康仔猪的DNA,阳性对照组3表示
更新时间:2023-08-25 20:25:56
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【推荐1】第一代“黄金大米”源自科学家的人道计划,可防止发展中贫困人群维生素A缺乏的现状。在普通大米中转入两个合成β-胡萝卜素所需的外源基因,来自水仙花中的八氢番茄红素合酶基因(psy基因)和细菌的胡萝卜素脱饱和酶基因(crtI基因),使水稻胚乳中富含β-胡萝卜素。回答下列问题:
(1)这项研究中的目的基因是_____ ,目前常用PCR获取和扩增目的基因,PCR反应的原理是_____ ,利用PCR技术扩增目的基因的体系中需加入_____ 酶。
(2)科学家在培育过程中构建了质粒载体pSYN12424,此基因表达载体除目的基因、标记基因外,它还必须有_____ 等;pSYN12424质粒中有pmi基因(该基因编码的蛋白质可使细胞在特殊培养基上生长),pmi基因上一般不能含有该实验使用的限制酶的识别序列,原因是_____ 。
(3) “黄金大米”这一实例说明基因与性状的关系是_____ 。
(1)这项研究中的目的基因是
(2)科学家在培育过程中构建了质粒载体pSYN12424,此基因表达载体除目的基因、标记基因外,它还必须有
(3) “黄金大米”这一实例说明基因与性状的关系是
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【推荐2】中国科学家经过反复试验,攻克了导致体细胞克隆猴失败的障碍,在全世界率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆,获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。培育流程如下图,回答相关问题:
(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,该过程需要将卵母细胞去核,目前普遍使用的去核方法是____________ 法。已知胎猴和母猴的体细胞染色体数均为42条,则克隆小猴的体细胞的染色体数目是_____________ 条。
(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,体细胞核移植获得克隆动物的难度更高,其原因是_____________ 。研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前,用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中,灭活的仙台病毒所起的作用是____________ 。
(3)科学家将Kdm4d的mRNA注入重构胚,同时用TSA处理重构胚,请推测这样做目的是_____________ 。经Kdm4d的mRNA和TSA处理后的基因碱基序列_____________ (填“会”或“不会”)发生改变。胚胎移植前,还需对代孕母猴进行____________ 处理,以保证胚胎能够继续发育。
(4)为检测克隆猴体内某基因是否正常转录,可采用RT-PCR(反转录PCR)技术,原理是先在目标组织细胞中提取全部的_____________ ,将它们反转录为DNA片段,进行PCR扩增,这样如果能扩增出该基因,则说明该基因正常转录。PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行,需要提供DNA模板,分别与两条模板链结合的2种_____________ ,4种_____________ 和耐高温的____________ 。PCR每次循环可以分为____________ 三步。若要检测该基因的翻译产物,可用____________ 技术。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/7/3/bb212ac9-f780-412b-9b1c-33bb354f3b45.jpg?resizew=544)
(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,该过程需要将卵母细胞去核,目前普遍使用的去核方法是
(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,体细胞核移植获得克隆动物的难度更高,其原因是
(3)科学家将Kdm4d的mRNA注入重构胚,同时用TSA处理重构胚,请推测这样做目的是
(4)为检测克隆猴体内某基因是否正常转录,可采用RT-PCR(反转录PCR)技术,原理是先在目标组织细胞中提取全部的
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解题方法
【推荐3】南洋楹是华南地区常见的绿化树种,也是家具、造纸等工业的优良材料。由皱赤壳菌引起的枝枯病是南洋楹生产中的新病害。实验人员利用巢式PCR技术对林间疑似枝枯病的病样进行检测,如图示其原理。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/12/6/42c69a64-6e25-4acc-8dae-170ca4c5147a.png?resizew=426)
回答下列问题:
(1)巢式PCR对目标产物进行扩增时,除提供DNA模板、引物,还需要_______ (答出2点即可)等基本条件。PCR的每次循环可以分为三步,依次是___________ 。
(2)据图可知,巢式PCR技术原理是利用两套PCR引物进行两轮PCR扩增,利用外引物对目的基因所在DNA进行扩增;第二轮扩增以第一轮扩增产物为模板,利用内引物进行扩增。常规PCR可能产生错误的目标产物,而巢式PCR获得错误目标产物概率更低,原因是_______ 。
(3)PCR扩增得到的产物常采用_______ 的方法来进行鉴定。研究人员以林间随机抽选的4份疑似被皱赤壳菌感染样本和2份健康南洋楹组织样本进行DNA检验,图示其鉴定结果:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/12/6/7b85344a-f04e-4021-939f-a719989bea4e.png?resizew=570)
阳性对照组1和2表示的是_______ DNA。据图分析,4份疑似样本的鉴定结论为_______ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/12/6/42c69a64-6e25-4acc-8dae-170ca4c5147a.png?resizew=426)
回答下列问题:
(1)巢式PCR对目标产物进行扩增时,除提供DNA模板、引物,还需要
(2)据图可知,巢式PCR技术原理是利用两套PCR引物进行两轮PCR扩增,利用外引物对目的基因所在DNA进行扩增;第二轮扩增以第一轮扩增产物为模板,利用内引物进行扩增。常规PCR可能产生错误的目标产物,而巢式PCR获得错误目标产物概率更低,原因是
(3)PCR扩增得到的产物常采用
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/12/6/7b85344a-f04e-4021-939f-a719989bea4e.png?resizew=570)
阳性对照组1和2表示的是
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名校
解题方法
【推荐1】某小组开展了DNA的粗提取与鉴定实验,选择了不同温度(20℃、-20℃)条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料,部分实验步骤如图1所示。回答下列问题:______ (填酶的名称)。
(2)图1中,将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中,然后进行离心处理,再取______ (填“上清液”或“沉淀物”)放入烧杯中。加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA,这样做的原理是______ 。
(3)将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中,加入______ 试剂,在______ 条件下进行鉴定。
(4)DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析,相同温度条件下,______ 的DNA粗提取含量最高。同种实验材料在______ ℃条件下DNA粗提取含量更高,其原因可能是______ (从酶的角度作答)。
(2)图1中,将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中,然后进行离心处理,再取
(3)将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中,加入
(4)DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析,相同温度条件下,
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名校
【推荐2】PCR技术成为分子生物学实验室的一种常规手段,其原理是DNA半保留复制。
在试管中进行DNA的人工复制(如下图),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/12/8/ca499a29-22d2-4d0e-b102-e02feef6cf09.png?resizew=474)
(1)PCR的全中文名是______________ ,是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
(2)若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制4次以后,若继续循环,该DNA片段共经过30次循环后需要________ 个引物。
(3)某样品DNA分子中共含5 000个碱基对,碱基数量满足:A+T/G+C=2/3,若经4次循环,至少需要向试管中加入________ 个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)
下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/12/8/e0ff36c6-4ca3-4571-866e-de16a32e1f3e.png?resizew=401)
(4)图中实验材料A为洋葱。研磨前加入的B为洗涤剂和食盐,加入洗涤剂的目的是________________ ;加入食盐的目的是________________ 。
(5)通过上述所示步骤得到滤液C后,再向滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液,再过滤得到滤液D,向滤液D中加入蒸馏水的目的是________________ 。
在试管中进行DNA的人工复制(如下图),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/12/8/ca499a29-22d2-4d0e-b102-e02feef6cf09.png?resizew=474)
(1)PCR的全中文名是
(2)若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制4次以后,若继续循环,该DNA片段共经过30次循环后需要
(3)某样品DNA分子中共含5 000个碱基对,碱基数量满足:A+T/G+C=2/3,若经4次循环,至少需要向试管中加入
下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/12/8/e0ff36c6-4ca3-4571-866e-de16a32e1f3e.png?resizew=401)
(4)图中实验材料A为洋葱。研磨前加入的B为洗涤剂和食盐,加入洗涤剂的目的是
(5)通过上述所示步骤得到滤液C后,再向滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液,再过滤得到滤液D,向滤液D中加入蒸馏水的目的是
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非选择题-解答题
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适中
(0.65)
名校
【推荐3】DNA的粗提取与鉴定的实验(如图):
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/20/37a154c0-4f49-4cb8-92ce-1ffd59169493.png?resizew=448)
(1)本实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡的全血,主要原因是鸡血细胞液中______________ 含量较高,另外本实验不适合用哺乳动物的血细胞液,原因是___________________ 。
(2)图中A所示加入蒸馏水的目的是___________________________ 。
(3)通过图中B所示步骤取得滤液后,再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是_____________________ 。
(4)图中C所示加入蒸馏水的目的是____________ 。
(5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可用______________ 试剂进行检验,在沸水浴条件下,冷却后可以看到颜色反应为________________ 色。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2022/8/20/37a154c0-4f49-4cb8-92ce-1ffd59169493.png?resizew=448)
(1)本实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡的全血,主要原因是鸡血细胞液中
(2)图中A所示加入蒸馏水的目的是
(3)通过图中B所示步骤取得滤液后,再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是
(4)图中C所示加入蒸馏水的目的是
(5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可用
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