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题型:非选择题-实验题 难度:0.65 引用次数:189 题号:19957719
猪圆环病毒(PCV)是一种单股环状DNA病毒,它是迄今发现的最小的动物病毒。现已知PCV有三个血清型,其中猪圆环病毒2型(PCV2)为致病性的病毒,是导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原体。为检测某猪场病猪是否感染该病毒,实验人员进行了以下操作:①分析PCR扩增结果;②从病猪组织样本中提取DNA;③利用PCR扩增DNA片段;④采集病猪组织样本。请回答下列问题:
(1)实验人员的正确操作顺序是__________(用数字序号和箭头表示)。
(2)操作②中需要用到预冷的酒精溶液(体积分数为_______%)来初步分离DNA与蛋白质,原理是____________________________。DNA能溶于2mol/L的__________溶液,且在一定温度下,DNA遇__________试剂会呈现蓝色。
(3)操作③中PCR反应中每次循环可分为__________三步。耐高温的DNA聚合酶能够从引物的__________端开始连接脱氧核苷酸。
(4)PCR扩增得到的产物常采用__________的方法来进行鉴定,其鉴定结果如下图:

注:M:DNAmarker;1-4:空白对照、阴性对照、阳性对照、样品
据图分析,阴性对照组2表示健康仔猪的DNA,阳性对照组3表示__________

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(1)这项研究中的目的基因是_____,目前常用PCR获取和扩增目的基因,PCR反应的原理是_____,利用PCR技术扩增目的基因的体系中需加入_____酶。
(2)科学家在培育过程中构建了质粒载体pSYN12424,此基因表达载体除目的基因、标记基因外,它还必须有_____等;pSYN12424质粒中有pmi基因(该基因编码的蛋白质可使细胞在特殊培养基上生长),pmi基因上一般不能含有该实验使用的限制酶的识别序列,原因是_____
(3) “黄金大米”这一实例说明基因与性状的关系是_____
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(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,该过程需要将卵母细胞去核,目前普遍使用的去核方法是____________法。已知胎猴和母猴的体细胞染色体数均为42条,则克隆小猴的体细胞的染色体数目是_____________条。
(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,体细胞核移植获得克隆动物的难度更高,其原因是_____________。研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前,用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中,灭活的仙台病毒所起的作用是____________
(3)科学家将Kdm4d的mRNA注入重构胚,同时用TSA处理重构胚,请推测这样做目的是_____________。经Kdm4d的mRNA和TSA处理后的基因碱基序列_____________(填“会”或“不会”)发生改变。胚胎移植前,还需对代孕母猴进行____________处理,以保证胚胎能够继续发育。
(4)为检测克隆猴体内某基因是否正常转录,可采用RT-PCR(反转录PCR)技术,原理是先在目标组织细胞中提取全部的_____________,将它们反转录为DNA片段,进行PCR扩增,这样如果能扩增出该基因,则说明该基因正常转录。PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行,需要提供DNA模板,分别与两条模板链结合的2种_____________,4种_____________和耐高温的____________。PCR每次循环可以分为____________三步。若要检测该基因的翻译产物,可用____________技术。
2023-07-03更新 | 120次组卷
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回答下列问题:
(1)巢式PCR对目标产物进行扩增时,除提供DNA模板、引物,还需要_______(答出2点即可)等基本条件。PCR的每次循环可以分为三步,依次是___________
(2)据图可知,巢式PCR技术原理是利用两套PCR引物进行两轮PCR扩增,利用外引物对目的基因所在DNA进行扩增;第二轮扩增以第一轮扩增产物为模板,利用内引物进行扩增。常规PCR可能产生错误的目标产物,而巢式PCR获得错误目标产物概率更低,原因是_______
(3)PCR扩增得到的产物常采用_______的方法来进行鉴定。研究人员以林间随机抽选的4份疑似被皱赤壳菌感染样本和2份健康南洋楹组织样本进行DNA检验,图示其鉴定结果:

阳性对照组1和2表示的是_______DNA。据图分析,4份疑似样本的鉴定结论为_______
2023-12-06更新 | 248次组卷
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