【推荐1】根据胡萝卜的组织培养实验完成有关问题：
（1）该实验的实验原理是：植物体的根、茎、叶细胞一般都具有______________，在一定的______________条件下，可以______________形成______________，将______________转接到含有不同______________成分的培养基上，就可以诱导其______________生成______________，进而发育成完整的小植株。
（2）在本实验中，切取胡萝卜块时强调要切取含有形成层的部分，原因是____________________，胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）是否也能培育成小植株？____。理由是___________。
（3）胡萝卜组织块接种到诱导培养基上培养过程中，必须控制的环境条件是_____________。

【推荐2】玉米是二倍体植物，某科研人员将BT毒蛋白基因导入玉米细胞，培育转基因抗虫玉米，实验流程图如下，EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ为限制酶（箭头所指为酶切位点）。回答下列问题：

（1）过程①构建重组质粒时，为使BT毒蛋白基因与质粒定向拼接，应选用________（填限制酶名称）切割BT毒蛋白基因与质粒，不选另一种限制酶的原因是______________。图中质粒没有标明的结构是标记基因，该结构的作用是___________。
（2）过程②常用农杆菌转化法将重组质粒导入愈伤组织，该方法能够借助Ti质粒上的________将BT毒蛋白基因整合到愈伤组织的______________。
（3）过程③表示____________；过程④表示_________________，使得玉米苗1中染色体组数目是玉米苗2的一半。

【推荐3】细胞是构成生物体的结构和功能单位，细胞会经历生长、增殖、分化、衰老和死亡等生命进程。下图1是玉米细胞的结构示意图，图2是玉米细胞生长调控的过程。

(1)图1玉米细胞中具有双层膜结构的细胞器是_____（填序号）。
(2)已知玉米体细胞中含有20条染色体，玉米的体细胞经过两次连续的有丝分裂，形成的子细胞内各有染色体_____。

A．10条

B．20条

C．40条

D．80条

(3)下图中a→d表示连续分裂细胞的两个细胞周期。下列叙述不正确的是_____。

A．a和b为一个细胞周期

B．c段结束DNA含量增加一倍

C．遗传物质平分一般发生在d段

D．b和c为一个细胞周期

(4)图2中M表示的是_____；DNA的复制发生在_____。
(5)将玉米的一些组织细胞在一定的外界条件下经过诱导后能长成一株完整的植株，这种技术称为_____。

A．组织培养	B．基因工程
C．营养繁殖	D．细胞分化

(6)人体细胞的有丝分裂过程与玉米细胞的不同之处主要有两个，一是前期纺锤丝由_____形成，二是末期在细胞赤道面的位置没有出现_____。
(7)玉米的叶肉细胞与根尖细胞虽然都是由同一颗种子萌发形成，但两者在形态结构以及生理功能上完全不同，这是因为_____。
(8)细胞的死亡可以分为细胞坏死和细胞凋亡，下列现象中属于细胞凋亡的是_____。

A．噬菌体的侵染导致细菌破裂

B．脑细胞因供氧不足而死亡

C．伤口中溃烂的细胞被手术切除

D．发育过程中蝌蚪尾的消失

细胞的有丝分裂被严格监控，图7显示两个关键的监控检查点。研究发现：①蛋白质X含量在G₁期达到最大，在S期及以后降为0；②蛋白质X与Y的结合使细胞通过（G₁/S检查点；③蛋白质Z含量在G₂期达到最大，在M期及以后降为0，④蛋白质Z与Y的结合使细胞通过（G₂/M检查点。
(9)小明同学查知某药物能特异性阻止蛋白质Z的合成，他建议将此药物施加于根尖，使观察根尖细胞有丝分裂时，能看到更多的细胞处于分裂期，专家认为此建议不可行。请根据材料说出理由：_____。

【推荐1】2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
(1)在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来_______，理由是：_________________________________。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是_____________。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_________________。
(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：_____________（用数字表示）。①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

【推荐2】类黄酮是花粉发育过程中的重要物质，苯基苯乙烯酮合成酶（CAS）是其生物合成的关键酶。科研人员将CAS基因和CaMV35S启动子融合组成反义CAS基因（反义基因是通过原基因反向连接而成的，其转录出的RNA能与原基因转录出的mRNA互补配对），并在矮牵牛花中表达，阻止了花粉的正常发育，得到雄性不育的矮牵牛植株。构建的反义CAS基因的结构如图所示。回答下列问题：

(1)实验室扩增CAS基因的前提，是要有_____，以便合成引物。图示反义CAS基因不能被各种限制酶切割，还要在引物一端添加_____。
(2)可用农杆菌转化法将重组质粒导入矮牵牛植株，构建重组质粒时，要将反义CAS基因插入Ti质粒的_____上。为了提高转化效率，可将矮牵牛花的种子在胚芽处割伤，并加入_____物质，该物质的作用是______。
(3)与正常植株相比，雄性不育植株在作物育种方面的优势是______。实验小组欲在个体水平上检测转基因雄性不育植株是否培育成功，若检测结果为______，则说明转基因植株培育成功。

【推荐3】TALEN技术是一种靶向基因敲除技术，使用的基因敲除工具TALEN由人造TALE蛋白和FokⅠ(核酸内切酶)等组成。图1是TALE蛋白中的二联氨基酸(如NI、NG、NN、HD等，其中字母N、I、G、H、D分别代表一种氨基酸)与恒定识别DNA的四种碱基之间的对应关系，图2是TALEN技术的基本原理示意图，其中FokⅠ形成二聚体后才能切断DNA，导致DNA双链断裂，使基因被敲除。基因敲除基本步骤如下：

步骤1   TALE靶点识别模块构建   TALE的核酸识别单元中二联氨基酸NI识别A，NG识别T，HD识别C，NN识别G。因此设计相应TALE单元串联，使TALEN特异识别某靶点基因。
步骤2 获得完整的TALEN   将构建好的一对TALE靶点识别模块融合其他必要的序列，并与质粒构建基因表达载体(TALEN质粒对)。
步骤3 将TALEN质粒对转入细胞中实现目标基因敲除   将TALEN质粒对转入细胞后，其表达的蛋白可分别找到其DNA上的靶位点并与靶位点特异结合。FokI形成二聚体，发挥内切酶活性，于两个靶位点之间打断目标基因，诱发 DNA 损伤修复机制。由于在此修复过程中总是有一定的错误率存在，在修复中发生错误的个体即形成目标基因敲除突变体。
请回答：
（1）步骤1中，欲使TALEN特异识别靶点基因，需根据____构建一对TALE靶点识别模块。若图2中左侧TALE蛋白识别的基因部分序列为-GTC-，则对应的二联氨基酸序列应为____。
（2）步骤2中需要____的催化，要获得完整的TALEN，构建的基因表达载体中还需要融合____序列。
（3）步骤3中FokI二聚体作用的化学键是____。步骤3完成后可能获得多种DNA，可利用限制酶对相邻靶位点之间的相应片段进行切割，再根据切割后形成的DNA分子大小，运用____(技术)分离筛选出发生目标基因敲除的突变个体。
（4）科研人员使用TALEN技术对水稻光周期敏感蛋白基因P进行靶向敲除，以获得长日照条件下纯合光敏雄性不育新品种。已知水稻光周期敏感蛋白基因P只在花粉细胞中表达，使其能够合成淀粉。不含光周期敏感蛋白的水稻在长日照条件下表现为雄性不育，短日照条件下均为雄性可育。
①将TALEN技术处理得到的亲本水稻植株，种植在____日照条件下自交获得F₁。
②若要鉴定F₁是否为纯合光敏雄性不育新品种，可将F₁植株种植在____日照条件下，然后____，若未出现蓝色，则该植株为所需新品种。

【推荐1】 “白菜—甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长周期短，耐热性强和易储存等优点。下图是“白菜—甘蓝”培育过程示意图，请完成下列有关问题:

(1)由杂种细胞D培育成 “白菜—甘蓝”植株，采用的技术手段是__________。该过程说明植物细胞具有__________。
(2)要制备“白菜—甘蓝”的人工种子，要在d步骤选取具有生根发芽能力的__________(结构)，包裹上人造种皮制得。
(3)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是__________，融合依据的原理是__________。
(4)要获得上图中白菜和甘蓝的原生质体，首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。现提供以下材料和用具:紫色洋葱磷片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片等。请你从中选择合适的材料，完成下面检验是否已除去细胞壁实验的方法步骤，并预测和解释实验结果。
主要实验步骤：
①选取适宜浓度的蔗糖溶液，加入适量纤维素酶和果胶酶配制成细胞壁分解液。其中选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是:适宜浓度的蔗糖溶液______________。
②检验细胞壁分解液除去细胞壁。
第一步：用镊子撕取一小块紫色洋葱鳞片叶放在载玻片中央，滴加适量细胞壁分解液，制成临时装片，得到实验组装片。
第二步：____________________ 。
第三步：______________________ 。
结果预测和解释：______________。

【推荐2】请回答细胞工程的有关问题：
I．紫花苜萡是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如下图：（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同）

(1)据图可知，本研究主要利用的生物技术的原理是____________。
(2)在实验前需通过预实验来研究或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，实验的设计思路是：将获取的原生质体分别放置在不同浓度的____________溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况。
(3)步骤②到步骤③需要更换新的培养基，其原因是经过____________过程诱导形成愈伤组织和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的____________不同。
(4)若利用此技术获得单宁，可培养到____________阶段即可。
II．为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图1所示。

(5)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自____________。
(6)步骤（1）的常用方法与诱导植物原生质体融合相比，特有的诱导因素为____________。
(7)步骤②的细胞必须经过步骤③____________和抗体检测才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是____________——杂交瘤细胞可采用注射到小鼠____________培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。
(8)步骤④是将获得的a____________和治疗乳腺癌的药物这2部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC。
(9)研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。

①ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为____________能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于____________反应。
②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的____________可将其水解，释放出的药物最终作用于____________，可导致癌细胞凋亡。

【推荐3】生物工程技术为人们获得需要的生物新品种或新产品提供了便利。请回答：
人的生长激素基因重组DNA―→受精卵转基因牛
抗虫基因―→重组Ti质粒―→细菌M棉花细胞抗虫棉
(1)在培养转入生长激素基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是________________________。②过程中，应对代孕母进行______________处理，以便早期胚胎着床。若在②过程中培养到早期胚胎阶段采用____________技术，可培育出多头相同的转基因牛。
(2)在抗虫棉培育过程中，重组Ti质粒先导入细菌M，细菌M的名称是____________，③过程中的棉花细胞常采用愈伤组织细胞而不采用叶肉细胞，原因是愈伤组织细胞__________，④过程中，愈伤组织细胞可通过____________技术培养成单个胚性细胞，胚性细胞再分化形成的胚状体可发育成植株。

【推荐2】植物细胞工程在苗木生产、作物育种等方面得到普遍应用。请回答下列问题：
（1）为了获得脱毒植株，外植体往往取自植物的花芽、叶芽等处的分生组织，其原因是_______________。
（2）在“番茄—马铃薯”杂种植株的培育过程中，运用的工程技术有________________；为获取杂种细胞，先除去细胞壁以获得___，再用PEG诱导其融合；融合成功的标志是杂种细胞出现____。这项研究最大的突破是________________。
（3）将植物组织培养得到的____________（答出两项即可）等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子，在制备人工种子时可根据需要添加防霉药物，它应加在人工种子结构的_________中。
（4）科学家以成熟的水稻胚作为外植体，在基础培养基上研究人工合成的生长调节剂对诱导愈伤组织的影响，结果如表所示。

注：愈伤组织诱导率（%）=（产生愈伤组织的数目/接种外植体数目）×100%
从表中可以看出，在基础培养基中添加____不利于愈伤组织的形成。

【推荐3】马铃薯是一种分布广泛、适应性强、产量高、营养价值丰富的粮食和经济作物，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是解决马铃薯质量退化和产量下降的有效方法。
（1）马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，茎尖离体培养大致过程如图1 所示，马铃薯茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响如图2所示。请回答问题：

①依图1分析，马铃薯脱毒苗培养依据的主要原理是______________。将微茎尖接种在添加有植物激素的培养基中，经过______________和______________完成组织培养过程，获得试管苗。对脱毒苗进行病毒检测时，可采用_____________________方法检测病毒的基因。
②由图2可知，茎尖越小，__________________________，因此大小为________mm的茎尖外植体适宜马铃薯脱毒苗的培养
（2）研究表明将感染马铃薯的病毒（遗传物质是DNA）的蛋白质外壳基因导入马铃薯体内可以获得抗病毒的植株。
①简述将马铃薯病毒的蛋白质外壳基因转入马铃薯基因组中，获得抗病毒马铃薯的基本过程____________。
②在个体水平鉴定马铃薯植株是否具有抗病毒特性的方法是________________________，观察其生长状况。