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题型:非选择题-解答题 难度:0.85 引用次数:184 题号:20583167
某水体中的污染物M具有较强的致癌作用,为了检测水体中化合物M的含量,科研人员将图1中的可被化合物M激活的启动子插入到图2质粒的P区构建重组质粒,并将重组质粒导入大肠杆菌获得能够指示M含量的工程菌。回答下列问题:
   
(1)利用PCR对图1中的启动子进行扩增时需要向缓冲液中加入启动子序列、4种脱氧核苷酸、__________________________和2种引物,加入引物的作用是________________
(2)图1中箭头的方向表示启动子转录的方向,为使启动子正确插入到质粒并驱动SPP基因转录,利用PCR技术扩增启动子时,分别在启动子A端和B端添加限制酶__________________________的酶切位点。
(3)为了检查重组DNA是否构建成功,可使用(2)中的两种限制酶分别对质粒和表达载体进行切割,并对酶切产物进行凝胶电泳。若切割质粒后电泳得到_____________条DNA带、切割基因表达载体后电泳得到_____________条DNA带、则说明表达载体构建成功。
(4)将基因表达载体导入大肠杆菌前,一般先用Ca2+处理大肠杆菌,其目的是___________。若质粒中的SPP基因表达产物可使大肠杆菌等细菌裂解,请写出利用工程菌检测水体是否被化合物M污染的实验思路,并预期实验结果及结论:________________________

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非选择题 | 较易 (0.85)
【推荐1】土壤中含有能分解淀粉的细菌,某生物兴趣小组欲从土壤中分离此细菌并进行计数。请回答:
(1)鉴定淀粉可用________染色。欲把能分解淀粉的细菌从土壤中分离出来,需使用以淀粉为唯一________源的选择培养基。配制好的培养基需用______________法进行灭菌。
(2)用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目________(填“少”或“多”),原因是________________________________________________________________________
(3)获取淀粉分解菌的一段DNA后可采用PCR技术进行扩增。PCR反应中高温解开模板DNA双链的过程称为________,子链延伸需要_____________(填酶的名称)催化。PCR反应中需靠____________________维持酸碱度。
2019-08-25更新 | 70次组卷
非选择题-解答题 | 较易 (0.85)
【推荐2】新冠肺炎目前依旧是我国防疫的一个重点。可以用鼻咽拭子采样进行新冠病毒核酸检测。引起该病的新冠病毒是一种新型RNA冠状病毒。科研人员以病毒表面S蛋白作为主要的病毒抗原,利用基因工程研制疫苗用于接种预防,简要过程如图所示。回答下列问题:

(1)用鼻咽拭子采样进行新冠病毒核酸检测过程中用到了PCR技术,PCR技术是指在生物体外大量扩增____________技术。
(2)利用基因工程研制疫苗过程中,S蛋白基因的表达载体为质粒,这是因为质粒DNA分子上具有复制原点,可以保证质粒在受体细胞中可以_________;质粒上有一个至多个限制酶切割位点,便于____________;质粒上有抗生素标记基因,该标记基因的作用是__________;该表达载体上还含有启动子、终止子,启动子是指___________________
(3)为了验证表达的S蛋白与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性,请设计简单的检测方案并预期检测结果。
方案:____________________
结果:_____________________
2022-01-16更新 | 518次组卷
非选择题-解答题 | 较易 (0.85)
【推荐3】某RNA病毒的核酸检测采用逆转录PCR技术,先将待测样本处理后再将样本RNA逆转录成cDNA,然后以cDNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题:
(1)样本RNA逆转录成cDNA的原料是________________________
(2)逆转录PCR反应中使用DNA聚合酶是从水生栖热菌中分离提取,该菌分离提取的DNA聚合酶优势在于________________________
(3)利用PCR技术扩增目的基因时,所用两种引物的碱基序列不能互补原因是_____________________
(4)如果利用绵羊个体来生产相关疫苗,则接受目的基因的受体细胞是绵羊的____________。为了从乳汁中获取产物,应在目的基因上游连接上____________等调控组件。
(5)如果用细胞培养来生产相关疫苗,则在传代培养时常用____________分散细胞,该过程中不能用胃蛋白酶代替,原因是____________________________________
2020-05-15更新 | 103次组卷
共计 平均难度:一般