【推荐1】科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株。如图表示获得番茄—马铃薯杂种植株技术流程图。回答下列问题。
   
(1)过程①制备原生质体过程中，通常利用_______去除细胞壁，利用发红色荧光物质和发绿色荧光物质分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质的目的是筛选融合的原生质体，在显微镜下观察到_______，说明番茄原生质体和马铃薯原生质体融合成功。
(2)诱导原生质体融合是植物体细胞杂交技术关键环节，诱导方法基本分为物理法和化学法，化学法一般是用_______作为诱导剂。原生质体融合利用的原理是_______。
(3)辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图所示。回答下列问题：
   
图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的_________过程，其中需要光照的是过程___________（①或②），要获得脱毒苗，外植体的取材部位通常是茎尖，理由是___________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值___________(填“高”、“低”或“相等”)时，有利于芽的分化。细胞产物工厂化生产是植物组织培养的重要应用。高产细胞系须在___________(固体/液体)培养基培养至___________，再从中提取辣椒素。

【推荐2】矮牵牛花色丰富，是世界上销量最大的花卉之一。其中含有的CHS基因，是一类直接编码花色素代谢的生物合成酶基因。科研人员拟对矮牵牛进行花色改良，可以用CHS的反义基因使花色素合成被打断，而使花色变淡，甚至变成白色或者粉色。

(1)据图分析推测，反义CHS基因引起矮牵牛花色改变是因为阻止CHS基因的________（转录/翻译）过程，从而改变牵牛花的花色。
(2)用此反义基因克隆出成百上千的反义CHS基因，最常用的方法 ______________。
(3)用农杆菌转化法将反义CHS基因导入矮牵牛细胞，需要将此基因插入农杆菌Ti质粒的____上，这一步在基因工程中称为_________________________________。
(4)为确定矮牵牛的DNA上是否插入了反义CHS基因，可用 ______________技术进行检测，该技术所用的“探针”是指 ______________________________________。
(5)将筛选出已成功导入CHS基因的细胞利用__________________技术培育获得转基因的矮牵牛植株，该技术的原理是___________________________

【推荐3】I。杂种优势是指两个遗传组成不同的亲本杂交产生的F₁在生活力、抗逆性、产量和品质等方面都优于双亲的现象，显性假说和超显性假说都可以解释杂种优势。
(1)显性假说认为杂种优势是由于双亲的各种显性基因全部聚集在F₁引起的互补作用。例如，豌豆有两个纯种（AAbb和aaBB），前者节多且节短，后者节少且节长，二者的株高均为1．5～1．8米，杂种F₁的基因型为_____，表现型为_____。
(2)超显性假说则认为等位基因的作用优于相同基因，例如：豌豆染色体某一位点上的两个等位基因（A₁、A₂）各抗一种锈病。两个只抗一种锈病的纯合亲本，杂交后代抗两种锈病。请利用遗传图解和必要文字解释其原因。
(3)假设豌豆高产与低产由两对同源染色体上的等位基因A与a和B与b控制，且A和B控制高产。现有高产与低产两个纯系杂交的F₁，F₁自交得F₂，F₂表现型及比例为：高产：中高产：中产：中低产：低产=1：4：6：4：1。
①F₂里，高产的基因型为_____；该育种结果支持_____假说。
②F₂里中产的基因型有_____；现在欲利用中产植株培育出高产后代，培育方法最简便为_____。
③若对F₂里的中高产豌豆进行测交，后代的表现型和比例为_____。
Ⅱ。请回答下列有关现代生物技术的问题。

如上图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程：
(4)请写出图中涉及的现代生物技术中的2项_____。
(5)研究人员根据已知的胰岛素基因序列，采用_____方法获得了胰岛素基因。
(6)图中A培育至具有凤梨风味的绿草莓幼苗的过程，_____（是、否）体现植物细胞的全能性。
(7)转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用，但是，胚胎工程只是指对动物的_____所进行的多种显微操作和处理技术。

【推荐1】人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为DNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且菌苗生产和抗体制备的流程之一如下，据图回答：

（1）过程①构建A基因的重组DNA时，必须使用__________、_________两种工具酶和_____________。
（2）过程②采用的动物细胞工程技术是_____________，获得的是_______________。
（3）对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离病毒，用已知病毒的被__________标记的DNA进行杂交，其原理是__________；或用图中的_________________与之进行特异性结合检测，其原理是_______________________。

【推荐2】DDX5基因在细胞周期调控、肿瘤发生等方面发挥重要作用。研究人员运用CRISPR-Cas9基因编辑技术对口蹄疫病毒易感的PK-15细胞株中的DDX5基因进行敲除，为后续研究DDX5基因在病毒感染中的作用提供基础。请据图回答下列问题。

(1)图1中，Ori是_______（酶）首先结合的核苷酸序列。构建CRISPR-Cas9表达载体时使用的工具酶主要有______。 结合对图2中CRISPR-Cas9技术原理的理解，图1表达载体中需要插入两种sgRNA基因，原因是_____。
(2)研究中先将CRISPR-Cas9表达载体导入大肠杆菌DH5a，再将菌液利用________法接种到加有________的细菌培养基上，待菌落长成后，直接挑取菌落加入到PCR反应系统中进行基因鉴定。PCR过程中不需要先提取细菌DNA的原因是______。
(3)研究中采用培养转化的大肠杆菌对CRISPR-Cas9表达载体进行扩增。与PCR相比，利用大肠杆菌进行目的基因扩增的优点有________、____________。

【推荐3】某科研所将菊花的花色基因C导入牡丹叶肉细胞来培育具有新型花色的牡丹，流程如图所示，其中Pst I、 EcoR I、Sma I是三种限制酶，图中箭头所指部位为各自的酶切位点。回答下列相关问题。
   
(1)限制酶Sma I___________（填“可以”或“不可以”）被选择用于切割花色基因C所在的DNA片段和质粒。基因工程中，目的基因和载体通常用相同的限制酶进行切割，其原因是___________________。
(2)图中①过程利用了农杆菌转化法，当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量___________吸引农杆菌向这些细胞移动。构建基因表达载体时，需要将花色基因C插入Ti质粒的T-DNA中，T-DNA可将花色基因C转移至___________。检测构建的基因表达载体是否导入叶肉细胞，需在培养叶肉细胞的培养基中加入___________。
(3)②过程为___________，其目的是让已经分化的细胞失去其特有的结构与功能而转变成未分化细胞。③过程主要是将②过程得到的愈伤组织转接到分化培养基上进行培养，诱导产生甲。若甲可以作为制造人工种子的材料，则甲可表示____________________（答出两点即可）。和常规种子相比，人工种子具有的优点有___________________（答出两点即可）。

【推荐1】为解除柑橘黄龙病对柑橘产业的严重影响，美国科学家近日从菠菜中获得了一种能抵抗柑橘黄龙病的蛋白质的基因，并已经成功地进行了一系列培育转基因植株的研究。其过程大致如下，请分析后作答。

（1）有两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从菠菜基因组DNA上切下目的基因并取代Ti质粒（4．0 kb）上相应的EF区域（0．2 kb）形成重组质粒，该过程还必须用到的酶是_____，形成的重组质粒_____填“能”或“不能”）被E酶切割。
（2）若图中Ti质粒上限制酶G切割位点与E的切割位点距离0．9 kb，限制酶H切割位点距F切割位点0．5 kb，分别用限制酶G和限制酶H酶切两份重组质粒样品，结果如下表。据此可判断目的基因的大小为_____kb;并将目的基因内部的限制酶H切割位点标注在下图中____。

G	H
1．8 kb 3．2 kb	1．3 kb 3．7 kb

（3）在上述培育过程中两次用到农杆菌，它与柑橘细胞相比较，在结构上最主要的区别是_____，导入重组质粒后的农杆菌的作用是_____。

【推荐2】科学家利用基因工程技术，将人的生长激素抑制素（生长抑素）的基因拼接到大肠杆菌的DNA分子中，然后通过大肠杆菌的繁殖，生产出了人的生长抑素，操作过程如图所示：

（1）为尽量减少工作量和盲目性，获取真核细胞的目的基因应尽可能采用____________的方法。目前该方法主要有两条途径：其一是利用mRNA为模板合成所需基因，完成这一过程需要_________酶和DNA聚合酶等；其二是根据已知的蛋白质的____________，推测出目的基因结构中________的核苷酸序列，再通过化学方法合成目的基因。
（2）利用上述化学方法合成的DNA片段（用D表示）与人的生长抑素基因（用G表示）相比，二者的核苷酸数目是_______（选D＜G，D＝G，D＞G）。在上述基因操作中，由①→⑤所需要的工具酶有___________、___________。
（3）被称为“工程菌”的是含有___________的大肠杆菌，如图中的____________；
（4）重组质粒是否导入了受体细胞，必须对受体细胞进行检测，通常可以根据质粒中存在的基因，利用特定的_______________对受体细胞进行培养，根据其生长情况做出判断。

【推荐3】研究人员发现，从锥形蜗牛体内提取出的毒液有望帮助人类开发出超级速效的胰岛素。他们研究表明锥形蜗牛毒蛋白(Con-Ins GI)能加速受体细胞信号转换，比人类胰岛素更加快速的发挥作用。因此制造这类“速效胰岛素”以及利用转基因技术实现批量生产成为I型糖尿病治疗的新思路。请回答下列问题：
(1)利用基因工程制造这种速效胰岛素过程中，构建基因表达的载体一般包括目的基因、启动子、____________、____________和复制原点，标记基因的作用是__________________。
(2)为了获得目的基因可以通过提取分析毒蛋白中的__________序列推知毒蛋白基因的核苷酸序列，再用DAA合成仪直接大量合成。基因工程中需要DNA连接酶，根据酶的来源不同分为_______________和T₄DNA连接酶两类。
(3)将人工合成的目的基因导入大肠杆菌体内，一般先用药物处理大肠杆菌使之成为__________细胞，再将重组DNA溶于________________中与该类细胞融合，在一定温度下促进细胞吸收重组DNA分子完成转化过程。
(4)经过目的基因的检测和表达，获得的Con-Ins GI毒蛋白活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性，导致这种差异的原因可能是___________________________________________。

【推荐1】分别以某种植物的绿色叶片和茎尖为材料，利用植物组织培养技术可以快速大量繁殖该植物。回答下列有关植物细胞工程的问题：
(1)以该植物的绿色叶片和茎尖作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，上述技术依据的原理是_____。绿色叶片和茎尖相比，利用_____进行组织培养更容易获得试管苗，原因是_____。
(2)在诱导愈伤组织所用的培养基中需加入一定量的蔗糖，加入蔗糖的作用是_____。培养基中除需要加入各种营养物质外，还需要加入一定量的_____。
(3)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

①过程①所需的酶是_____。过程②后，在显微镜下观察到杂种细胞成功融合的标志是_____。
②若要从杂种植株中筛选出具有高抗性的植株，需要对杂种植株进行_____接种实验。

【推荐2】细胞融合技术有着广泛应用。下图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：

(1)若a、b分别是基因型为Rr和m两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。这两个品种的花粉可用化学诱导剂____________诱导融合，共可产生____________种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合），若将d培育成植株，还需利用____________技术，依据的生物学原理____________。
(2)植物细胞工程有一项应用是培育“脱毒苗”，培育脱毒马铃薯时，外植体宜选用____________。
(3)已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后细胞需经过筛选，筛选后的所需细胞群应具备的特点是____________。获得的单克隆抗体最终可以从_____________中提取。
(4)为抗击新冠疫情，各国科学家分别利用不同的技术手段制备单克隆抗体，我国科学家已经利用先进技术制作出人源新冠单克隆抗体，单克隆抗体与传统的血清抗体比较优点体现在____________。

【推荐3】请回答下列利用生物技术培育抗病品种有关的问题
(1)通过抗病性强的植株获取抗病目的基因有多种方法。现已获得纯度高的抗病蛋白（可作为抗原），可通过_________________技术获得特异性探针，并将_____________中所有基因进行表达，然后利用该探针，找出能与探针特异性结合的表达产物，进而获得与之对应的目的基因。
(2)植物细胞在培养过程中往往会发生__________，可利用这一特性筛选抗致病真菌能力强的细胞。筛选时在培养基中加入_____________________，并将存活的细胞进一步培养至再生植株。若利用_________培养建立的细胞系用于筛选，则可快速获得稳定遗传的抗病植株。
(3)用抗病品种与高产品种进行杂交育种过程中，有时会遇到因胚发育中止而得不到可育种子的情况。若要使该胚继续发育获得植株，可采用的方法是__________________。