【推荐1】Rag2基因缺失的小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失的小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：

请回答下列问题：
(1)上述图解中涉及到的生物技术有_________，_________。（答出两点）
(2)在核移植前，需要对卵母细胞进行“去核”处理，去的“核”其实是_________。用蛋白酶合成抑制剂处理重构胚，其目的是_________。
(3)步骤②培养到_________胚胎阶段，取其中的_________细胞分离培养得到ES细胞。
(4)步骤③中，如获取的Rag2用基因数量较少，需利用PCR技术扩增，从下图中选出_________作为引物，如果以一个目的基因为模板PCR循环4次，共需要_________个引物。

【推荐2】脑缺血会引起局部脑神经缺氧导致轻度受损，甚至造成脑神经细胞死亡而产生不可逆损伤，最终导致患者永久性残疾甚至死亡。骨髓基质细胞（M）是存在于骨髓中具有多种分化潜能的干细胞，它可以诱导生成心肌细胞、成骨细胞和神经细胞等。运用干细胞疗法有可能实现对缺血坏死神经结构与功能的修复和重建，将成为缺血性脑损伤治疗的有效策略。
（1）脑缺血所导致的神经细胞死亡不属于_____________（选填细胞凋亡或细胞坏死）。
（2）干细胞是指动物和人体内少数保留__________________________ 能力的细胞。
（3）研究发现，M的线粒体可转移到缺氧损伤脑神经细胞（N）中，实现细胞供能机制的修复。为进一步探究M的线粒体转移对N的影响，进行了如下实验。

分组	第1组	第2组	第3组
处理方法	用含有M线粒体的培养基对N进行培养	用不含M线粒体的培养基对N进行培养	用不含M线粒体的培养基对 ？ 进行培养

①第3组为正常对照组，请将实验补充完整：________________。
②检测得到各组神经细胞内的ATP水平相对值如图。

由图分析比较可知，第1组神经细胞内ATP水平____________正常水平，第2组在实验中起___________作用。
③综合上述研究资料和实验结果，推测M对脑缺血损伤后恢复的可能作用机制___________________。

【推荐3】克隆技术可应用于器官移植，能解决供体器官不足和排斥反应等问题，下图为克隆组织器官的流程模式图，请回答下列问题：

（1）动物细胞核移植过程中，通常采用卵（母）细胞作为受体细胞，原因可能是___________。用于核移植的供体细胞一般选用传代至10代内的细胞，原因是______________________。
（2）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合的方法外，还可以采用___________。过程①细胞培养时，培养液中除必需的营养物质、抗生素和促生长因子外，还需要加入___________。
（3）胚胎干细胞可由囊胚的___________分离培养获得。为使体外培养的胚胎干细胞分化出不同类型的组织细胞，需要向培养液中加入___________。
（4）将获得的组织器官移植给个体B不会发生免疫排斥反应，原因是___________。图中流程需要用到的生物学技术有___________。

【推荐1】人工种子又称合成种子或体细胞种子，是将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中，在适宜的条件下发芽出苗。下图是人工种子培育过程和人工种子的结构示意图，回答问题：
   
(1)培育人工种子的技术所依据的原理是_____；胚状体形成过程包括_____（填图中的数字）。
(2)某二倍体植物的基因型为AaBb，A对a、B对b完全显性，其自交产生的后代有三种基因型且表型比例为1∶2∶1，利用花药离体培养的方法可培育成“花粉胚”，也可以制成人工种子用于育种，由这种种子萌发形成的的个体称为_____，基因型为_____。
(3)人工胚乳中除含有胚状体发育所需的营养物质外，还可以添加各种附加成分，如大量元素和微量元素、固氮细菌、防病虫农药、除草剂和赤霉素等植物激素，其中加入的赤霉素的作用是_____。
(4)酶是一类极为重要的生物催化剂。植物体细胞杂交去除细胞壁所用的工具酶是_____；动物细胞培养将动物组织块分散成单个的细胞所用的工具酶是_____。

【推荐2】科学家团队成功构建了世界首例人猴嵌合胚胎，即同时具有人和猴细胞来源的胚胎，为解决异种嵌合效率低下等问题提供新思路，也对器官再生研究具有指导意义。嵌合胚胎培育的部分过程如图所示。回答下列问题：

(1)图中①为扩展潜能干细胞（hEPSCs），其功能与胚胎干细胞相似，具有分化为成年动物体内______的潜能。胚胎的滋养层细胞将来发育成______
(2)培养动物细胞和早期胚胎的过程中，定期更换培养液有利于______。实验过程需要获取多枚猴胚胎应用于研究，在母猴数量有限的条件下，获得多个胚胎的思路是______（答出1点）。
(3)图中步骤③表示______。嵌合胚胎能正常进行胚胎发育，经培养得到的嵌合胚胎不能进行胚胎移植，理由是______。

【推荐3】2023年1月，由西北农林科技大学奶牛种业创新团队培育的首批优质克隆奶牛在宁夏灵武市出生，培育克隆奶牛的流程如图所示。回答下列问题：

(1)体外培养甲牛的体细胞时需给予一定量的O₂和CO₂，其中CO₂的主要作用是_____。若需获得大量卵母细胞，可用_____激素使乙牛超数排卵。卵母细胞去核前，需将其在体外培养至_____期。
(2)过程②表示_____，进行该过程前需对代孕丙牛进行_____处理。
(3)奶生丁的绝大部分性状和_____（填“甲”“乙”或“丙”）生的性状一致，理由是_____。
(4)与体细胞核移植技术相比，胚胎细胞核移植技术的成功率更高，原因是_____。

【推荐1】2006年，科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了诱导多能干细胞（iPS细胞）。这之后对iPS细胞的研究和应用如火如荼地开展。回答相关问题。
I．科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得iPS细胞，继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：

(1)iPS细胞与小鼠内细胞团一样，具有_____________，因而有望诱导入类iPS细胞进行定向__________后用于疾病的细胞治疗。
(2)克隆鼠X的体色为_________，上述技术流程中可以是雄鼠的是_____________。
(3)若要利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，不考虑环境因素的影响，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状_____________（是/不是）完全相同，理由是____________。
Ⅱ．研究人员利用与癌细胞在某些方面具有相似性的iPS细胞，进行了抗肿瘤的免疫学研究。
(4)体内出现癌细胞时，由于癌细胞的_________发生改变，可以激发机体的免疫系统发挥清除作用。
(5)研究人员进行的有关实验如下：
预实验：建立模型小鼠
免疫组小鼠：每周注射1次含失去增殖活性的iPS细胞悬液，连续4周；
空白组小鼠：每周注射1次不含失去增殖活性的iPS细胞的缓冲液，连续4周。
实验操作：给免疫组和空白组小鼠皮下注射DB7（一种癌细胞），一周后皮下形成肿瘤。随后空白组小鼠肿瘤体积逐渐增大，免疫组小鼠肿瘤体积逐渐缩小。由此推测：iPSC能刺激机体产生特异性抗肿瘤的_____________免疫。
(6)研究人员另取小鼠进行实验，验证了上述推测。下图为实验组的实验过程及结果示意图。请在下图
中选择A或B填入④处，从C～F中选择字母填入①～③处。①__________；②_________；③_________；④____________。

【推荐2】人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛，以便通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如图所示：
回答下列问题：

(1)如图所示，获得转基因母牛过程中涉及多个现代生物技术，包括核移植技术，核移植指______________；供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是______________。
(2)SRY－PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段，然后对扩增产物进行检测。上述流程中，选取的牛胎儿成纤维细胞SRY－PCR性别鉴定应为________(“阴性”或“阳性”)，原因是______________________________。
(3)PCR反应体系中添加的引物应选用图中的________(填图中字母)。若将1个含目标片段的DNA分子经PCR反应循环n次后，共需要消耗引物的数量为_____。

(4)早期胚胎分离得到的胚胎干细胞在形态上表现为______________________。

【推荐3】回答下列关于细胞工程的相关知识：
I.中国科学家成功培育出全球首例体细胞克隆猴“中中”和“华华”。体细胞克隆猴的培育过程如图所示。请分析回答问题：

(1)据图可知，克隆猴培育过程用到了__________、________和胚胎移植等技术。体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植技术，原因是____________。
(2)上述实验核移植的受体一般选用A猴处于减数分裂Ⅱ中期的__________，原因是该细胞体积大、易操作、营养物质丰富且含有促进__________表达的物质。
(3)目前核移植技术中普遍使用的去核方法是_________。
(4)克隆猴的成功培育为阿尔茨海默病、自闭症等脑疾病以及免疫缺陷病、肿瘤等疾病的机理研究、干预、诊治带来前所未有的光明前景。与以往用普通猴子做实验相比，克隆猴作为实验动物模型的优势是_______________（答出一点即可）。
Ⅱ. 人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC)，其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：

(5)细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，可采用________________的方法。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是__________，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是___________。
(6)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是______，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得_______。
(7)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：
  
据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的____________结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是____________，可通过测定产物量来判断待测抗原量。
Ⅲ. 人体的抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆蛋白。我国首先利用乳腺生物反应器生产这种抗凝血酶Ⅲ蛋白，作为药物治疗某种血液疾病。如图为利用乳腺生物反应器生产抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程示意图。回答下列问题：

(8)过程①构建基因表达载体需要使用的工具酶是______________，抗凝血酶Ⅲ蛋白基因与______________的启动子等调控组件结合在一起，其目的是抗凝血酶Ⅲ蛋白基因能够在转基因绵羊乳腺细胞中_______。
(9)在进行过程⑤之前，用灭活的仙台病毒对整合有目的基因的成纤维细胞进行短暂的处理，在此处理过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是_________，目前对卵母细胞去核普遍使用的方法是____________。
(10)过程⑥中重组细胞的培养需要满足的条件是_______、_________、适宜的温度、pH、渗透压和气体环境。
(11)过程⑦中代孕母羊的主要职能是_________。