组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 基因表达载体的构建
题型:非选择题-解答题 难度:0.4 引用次数:293 题号:22175359
华南农业大学科研团队首次利用转基因猪的唾液腺作为生物反应器,高效合成一种对人的神经性疾病具有良好治疗作用的蛋白质——人神经生长因子(hNGF),为生产高活性的人类药用蛋白提供了一种高效的新技术,拓展了畜牧动物在人类医学中的应用。图示为该团队构建的基因表达载体,请回答下列相关问题:

(1)科研人员曾经利用小鼠唾液腺组织中分离纯化的鼠源神经生长因子(mNGF)及大肠杆菌表达的hNGF进行一些神经损伤疾病的治疗,但其治疗效果均比人体自身合成的hNGF差。请分析mNGF治疗效果较差的原因可能是___________,导致mNGF的活性较低;大肠杆菌表达的hNGF治疗效果也较差的原因可能是___________,导致大肠杆菌表达的hNGF活性也较低。
(2)家畜的唾液腺是一种高效的生物反应器,与乳腺生物反应器相比较,其优点是___________(答出两点);在构建hNGF基因表达载体时,需将hNGF基因与___________等控制元件重组在一起,通过___________技术将基因表达载体导入猪的受精卵中,经___________等技术将受精卵培养成胚胎并转移到受体猪体内。
(3)为确定转基因猪是否培育成功,除了分子水平的鉴定,还可以进行个体水平的鉴定,具体的方法是___________

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【推荐1】普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2),其能在纤维细胞中特异性表达,产生的 β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解,使棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种,科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体,利用农杆菌转化法将其导入棉花细胞,成功获得转基因棉花品种,具体过程如下图所示。请分析回答:

(1)①和②过程中所用的限制性核酸内切酶分别为________________________
(2)过程①中纤维细胞E6启动子在质粒1上只以一种方向的相连,请解释GhMnaA2基因在质粒2上可以正向和反向两种方向相连的原因是_______________,这种操作的缺点是目的基因容易发生___________,从而影响与质粒的拼接。
(3)基因表达载体除了图示组成外,至少还有________________________
(4)过程③中需用CaCl2处理农杆菌,目的是________________________,从而使外源基因容易导入。
(5)过程④利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程,整合到棉花细胞染色体DNA上去的区段是重组质粒中的____________部分,在植物组织培养前需要把与农杆菌共培养后的外植体转移到含有____________的培养基上进行脱菌培养。
(6)导入棉花细胞内的反义GhMnaA2基因转录形成的mRNA能____________从而阻止____________合成,使棉纤维更长。
2019-10-16更新 | 173次组卷
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【推荐2】应用现代生物技术可以大量获得针对甲型H1N1病毒的抗体,并可用于临床治疗,如图表示制备该抗体的设想,请据图回答下列问题:

(1)转甲型H1N1病毒抗体基因牛可通过分泌乳汁来生产甲型H1N1病毒抗体,在基因表达中,甲型H1N1病毒抗体基因的首端必须含有________,它是____________识别和结合的位点。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用________技术,培养出多头相同的转基因牛。
(2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体,Ⅰ最可能是________细胞,Ⅱ代表的细胞具有___________的特点。
(3)制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术,与动物细胞融合过程不同,植物体细胞杂交在细胞融合之前要用________________对细胞进行处理,作用是除去________
2016-12-12更新 | 220次组卷
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【推荐3】近期《肝脏学》杂志发表了一篇文章称科学家经研究发现:乙肝病毒HBX蛋白间接调控宿主细胞内许多基因的转录,广泛影响宿主细胞的各种生命活动,包括调节细胞凋亡,抑制细胞DNA的修复,干扰细胞有丝分裂和细胞周期进程等,因此可利用该蛋白质治疗乙肝。下图表示利用乳腺反应器生产乙肝病毒HBX蛋白的流程示意图。

(1)已知HBX蛋白基因的核苷酸序列,则①可采用_____________方法获得目的基因,并用_______技术进行扩增。
(2)因哺乳动物的早期胚胎在一定时间内与母体子宫未建立组织上的联系,处于_____________________状态,因此可以用特制的冲卵装置从雌性个性内收集。
(3)④运载体为_____________________,⑤表示_____________________。⑥表示_____________________,在该步骤操作前对胚胎进行了检查和筛选,发现有些胚胎因为外源基因的插入而死亡,请你分析外源基因插入导致胚胎死亡的可能原因是:_____________________
2019-04-24更新 | 146次组卷
共计 平均难度:一般