【推荐2】图1、图2分别表示DNA 甲基转移酶（DNMT）基因表达的两个过程，a、b、c、d代表相关物质或结构。在多细胞的真核生物中，DNMT将甲基选择性地添加到胞嘧啶上，形成5-甲基胞嘧啶，如图3所示，DNA甲基化会抑制基因的转录。回答下列问题：
         
(1)图1表示的过程中，RNA聚合酶的作用有__________。图2中的c与图1中的 ______是同一种物质；图2表示的结构能提高蛋白质合成的效率，原因是 ____________ 。
(2)DNMT基因的过量表达和抑癌基因甲基化都可能会引起细胞癌变；某种肺细胞的癌变是由ASPP基因（一种抑癌基因）甲基化引起的。抑癌基因的作用为 __________，或者促进细胞凋亡。与正常细胞相比，该种癌细胞中ASPP基因转录的mRNA和DNMT基因转录的mRNA含量变化分别是 ______和______（填“增加”、“减少”或“不变”）。

【推荐3】miRNA是真核生物中广泛存在的一种小分子RNA，它在细胞中通常与核酸酶等蛋白结合成诱导沉默复合物(RISC-miRNA复合物），复合物被活化后与靶RNA结合，①~⑧代表相关生理过程。

(1)基因的表达包括_________过程，该过程中某tRNA的反密码子序列为3'-UAG-5'，若严格遵循碱基互补配对原则，则其对应基因中相应位置模板链序列为5′_____3′。氨基酸大多可被多种tRNA转运，其意义是_________。
(2)据图可知，转录因子KLF5进入细胞核后能特异性识别基因，并与_________酶结合启动基因IGFL2-AS1和IGFL1的转录过程。综上分析，RNA干扰的可能机制是_________，IGFL2-AS1基因转录的RNA竞争性地与miRNA结合，从而对⑦⑧有_________ (填“促进”或“抑制”)作用，_________(填“提高”或“降低”)IGFL1的表达量。
(3)请结合上述信息，为研发治疗乳腺癌新药提供两种新思路。_________________。

【推荐1】核酸疫苗是指将含有编码抗原蛋白的基因序列的质粒载体，通过一定的方法递送到宿主体内，通过宿主细胞表达抗原蛋白，从而诱发机体对该蛋白的免疫反应，进而达到预防疾病的目的。核酸疫苗包含DNA疫苗和mRNA疫苗两种，其中mRNA疫苗的安全性更高。回答下列问题：
（1）在构建抗原蛋白基因表达载体前，常通过_____技术扩增该基因，该技术的中文名称是_____，需要_____种引物，每次循环分_____三步。扩增完成之后常采用_____来鉴定产物，DNA分子可以在波长为_____的紫光灯下被检出。
（2）构建的抗原蛋白基因表达载体除了含有目的基因外，还必须有启动子、终止子以及_____等。其中，启动子是位于基因首端的一段特殊结构的DNA片段，是_____识别和结合的部位。
（3）注射核酸疫苗后能够对相应的病原体起到防卫作用的机理是_____。
（4）与DNA疫苗相比，mRNA疫苗的安全性更高，原因是_____。

【推荐2】某些植物在进化过程中已经形成抵抗干旱、低温和高盐等逆境的调控机制，感受并响应各种外界刺激。水稻中的转录因子1是一类蛋白质，一方面可以结合RNA聚合酶，一方面可以结合水稻OrERF基因上不同的调控序列。水稻OrERF基因可以在植物抵抗逆境时发挥重要作用。科研人员对水稻OrERF基因进行系列研究。
（1）科研人员对水稻OrERF基因上游部分中的转录模板链进行测序，结果如下：

①②③三个元件分别在高盐、干旱、低温不同信号的诱导下，使此基因表达出不同的OrERF蛋白，以适应高盐、干旱、低温环境，此现象说明__________。
（2）科研人员欲将水稻OrERF基因导入拟南芥体内，获得抗逆性强的植株，设计的实验方案如图1：

①可利用PCR技术获得并扩增此基因。如果开始的OrERF基因只有一个，第n次循环至少需要引物__________对。
②图1中d阶段需要应用植物组织培养技术，其培养基中除加入必须的营养物质、植物激素和琼脂外，还需添加__________物质，一段时间后，可获得抗高盐的拟南芥植株。
③已知拟南芥从播种到收种需要3个月，从播种到产生耐盐性状需要1个月。那么从图1中d环节获得的拟南芥植株收获种子算起，至少需要__________个月才能拿到确认纯合的转基因拟南芥种子（已知拟南芥为二倍体）。

（3）植物感受外界干旱、高盐、低温等信号，通过一系列信息传递合成转录因子1。转录因子1对下游基因调节过程如图2，其通过__________，启动转录的过程。最后通过基因产物的作用对外界信号在生理生化等方面作出适合的调节反应。

【推荐3】人类γ基因启动子上游的调控序列中含有 BCL11A 蛋白结合位点，该位点结合 BCL11A 蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定 BCL11A 蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。
   
(1)启动子是一段有特殊序列结构的_______片段，位于基因的__________，紧挨_____起始位点，它是__________识别和结合的部位。有时为了满足需求会在载体中构建诱导型启动子，当诱导物存在时，可以_______或_______目的基因的表达。
(2)为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在 F₁～F₇末端添加的序列所对应的限制酶是__________，在 R 末端添加的序列所对应的限制酶是__________。
(3)将构建的载体导入除去 BCL11A 基因的受体细胞，成功转化后，含 F₁～F₆与 R 扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含 F₇与 R 扩增产物的受体细胞无荧光。含 F₇与 R 扩增产物的受体细胞无荧光的原因是___________________。

【推荐1】下图为利用奶牛的乳汁生产胰岛素的流程图。回答下列问题：

（1）首先获取的胰岛素基因称为_____________。若要获得大量的胰岛素基因可采用_______技术。而质粒通常用作基因工程的载体，其基本组成单位是 _____________。
（2）据图分析，最好选用___（填限制酶名称）分别切割目的基因和质粒分子。当胰岛素基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（3）将重组质粒导入受精卵的方法是_____________；经检测，胰岛素基因已导入受体细胞的基因组中，需要在分子水平上检测是否能翻译出胰岛素，通常采用的方法是___________。
（4）通过乳腺生物反应器生产胰岛素，需提前对形成的受精卵进行筛选，保留含性染色体组组成为______________（填“XX”或“XY”）的类型。

【推荐2】回答下列（一）、（二）小题：
（一）锈去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使用的除草剂之一。锈去津在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下面程序选育能降解锈去津的细菌（目的菌）。已知锈去津在水中溶解度低，含过量锈去津的固体培养基不透明。

回答下列问题：
（1）为选取能降解锈去津的细菌，应选取____土壤样品加____（A．蒸馏水     B．清水   C．生理盐水     D．无菌水）制备成土壤浸出液。
（2）本实验中将细菌接种到固体培养基所用的接种方法为____，接种后的培养皿倒置后置于____中培养一段时间后，观察菌落特征。
（3）测得A～C瓶中三类细菌的最大密度如下图所示：

由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的目的是____并提高其密度；甲类细菌密度迅速降低的主要原因是____；
（4）图中固体培养基上，____菌落即为目的菌落。
（二）绿色荧光蛋白基因（GFP）被发现以来，一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记。回答下列问题：

几种限制酶识别序列及切割位点表

（1）若图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是—T   TCGA，N端伸出的核苷酸的碱基序列是—C   TGCA，则在构建含该GFP的重组质粒A时，应选用限制酶____，对____进行切割。
（2）重组质粒A常通过 ____法导入到猪胎儿成纤维细胞。
（3）检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上，可在荧光显微镜下观察的表达。图中绿色荧光蛋白转基因克隆猪中GFP既是____，也是____。
（4）绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中涉及到多项现代生物技术，图中⑤⑥⑦过程属于____技术，⑨过程通常选用____个细胞以上的早期胚胎进行移植。

【推荐3】玉米（单性花、雌雄同株）的高秆易倒伏（H）对矮秆抗倒伏（h）为显性，抗病（R）对易感病（r）为显性，两对基因分别位于两对同源染色体上．下图表示利用品种甲（HHRR）和乙（hhrr）通过三种育种方法培育优良品种（hhRR）的过程。

(1)利用方法Ⅰ培育优良品种时，获得hR植株常用的方法为________________，三种方法中，最难获得优良品种（hhRR）的是方法____________。
(2)方法Ⅱ中品种甲乙杂交的操作步骤是_____________________________（用文字和箭头写出主要的操作步骤即可），基因工程育种过程中需使用的工具酶有_____________。