某细菌DNA分子上有4个Sau3AI的酶切位点,该DNA分子经Sau3AI处理后会形成4个大小不同的DNA片段。若用BamHI处理该DNA分子,则只会形成2个大小不同的DNA片段。Sau3AI和BamHI的识别序列及切割位点如下表所示。下列叙述错误 的是( )
限制酶名称 | 识别序列及切割位点 |
BamHI | G↓GATCC |
Sau3AI | ↓GATC |
A.上述两种酶切割形成的DNA片段可互相连接 |
B.该细菌DNA分子与质粒都是环状DNA分子 |
C.BamHI酶可识别目的基因中的Sau3AI酶切割位点 |
D.该细菌DNA分子上含有两个BamHI酶的切割位点 |
更新时间:2024-05-01 12:46:49
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【知识点】 DNA重组技术的基本工具解读
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【推荐1】生长激素是医学实验及生物实验中常用的重要物质,最初生长激素是从牛和猪脑垂体中提取出来的,但副作用过多。而化学合成的方法效率较低,没有实用价值,因此,采用基因工程方法大规模生产人生长激素是满足临床大量需求的重要手段。该过程所用的质粒A与含生长激素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示,下列相关叙述错误的是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/1/3/e00c768f-344f-472c-a125-0f8ee596c767.png?resizew=652)
(限制性核酸内切酶BamHl、BclI、Sau3AI、HindⅢ,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/1/3/e00c768f-344f-472c-a125-0f8ee596c767.png?resizew=652)
(限制性核酸内切酶BamHl、BclI、Sau3AI、HindⅢ,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT)
A.图1的质粒与目的基因结合后不可直接导入受体细胞 |
B.BamHI酶和BclI酶切的DNA末端连接,连接部位用酶Sau3AI一定能用切开 |
C.用Sau3AI切图1所示的质粒A得到DNA片段对RNA聚合酶有一定的亲和力 |
D.生长激素基因也可以嵌入羊基因组的任何位置,以得到转基因羊并对生长激素进行大规模生产 |
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名校
【推荐2】关于载体特点的叙述中,正确的是
A.能够在宿主细胞中稳定的保存下来并复制,从而提供大量的目的基因 |
B.具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达 |
C.具有某些标记基因,以便目的基因能够与其结合 |
D.它的参与能够使目的基因通过主动运输进入细胞 |
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名校
解题方法
【推荐3】在构建基因表达载体时,传统方法常受限于限制酶识别序列。科研人员研发了新的DNA重组方法: In-Fusion技术。该技术关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA序列(即同源序列),然后用In-Fusion酶处理,使同源序列形成黏性末端,最终形成的重组质粒会在受体细胞内形成完整的重组序列。主要操作过程如图示。下列叙述错误的是( )
A.推测In-Fusion酶的作用是识别同源序列、形成黏性末端、连接磷酸二酯键 |
B.载体A端和B端的序列不同,可防止目的基因与质粒反向连接及自身环化 |
C.形成重组质粒时,如果温度远高于50℃,黏性末端的碱基不容易互补配对 |
D.该技术无需识别特定切割位点,需识别目的基因与线性质粒任意同源序列 |
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