下图1、2分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图,请据图回答下列问题:(1)图1和图2所示的过程中,都必须用到的动物细胞工程技术手段是__________________ 。
(2)获取小鼠新鲜的骨髓瘤组织,在37℃下用________________ 消化30-40分钟形成分散细胞。
(3)图1中②过程常在_____________ (生物法)诱导下完成,两两融合形成的细胞共有______ 种,所以需要利用__________ 培养基筛选出既能无限增殖又能分泌抗体的___________ 细胞。单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是__________________________________________ 。
(4)图2 克隆羊“多莉”从理论上证明了___________________ ;若不考虑变异及环境因素的影响,亲代和其克隆子代性状_________ (填“是”或“不是”)完全相同的,原因是______________ 。
(2)获取小鼠新鲜的骨髓瘤组织,在37℃下用
(3)图1中②过程常在
(4)图2 克隆羊“多莉”从理论上证明了
更新时间:2024-04-26 11:11:31
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【推荐1】Ⅰ、培养胡萝卜根组织可获得试管苗,获得试管苗的过程如图1所示。
(1)步骤③切取的组织块中要带有形成层,原因是________ 。
(2)从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基的原因是: i.诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同;ii.________ 。
(3)步骤⑥要进行照光培养,其作用是________ 。
(4)病毒在作物体内逐年积累,就会导致作物产量较低,品质变差。生产上,作物脱毒也用到了植物组织培养技术,选择茎尖为材料,原因是________ 。
Ⅱ、美西螈具有很强的再生能力。研究表明,美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制,科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14 的单克隆抗体,具体方法如下。抗CD14 单克隆抗体的制备流程如图2所示。回答下列问题:________ 。
(6)步骤②所用的SP2/0 细胞的生长特点是________ 。
(7)吸取③中的上清液到④的培养孔中,根据抗原—抗体杂交原理,需加入________ 进行专一抗体检测,检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗 CD14 抗体,原因是________ 。
(8)步骤⑥从________ 中提取到大量的抗 CD14 抗体,用于检测巨噬细胞。
回答下列问题:
(1)步骤③切取的组织块中要带有形成层,原因是
(2)从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基的原因是: i.诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同;ii.
(3)步骤⑥要进行照光培养,其作用是
(4)病毒在作物体内逐年积累,就会导致作物产量较低,品质变差。生产上,作物脱毒也用到了植物组织培养技术,选择茎尖为材料,原因是
Ⅱ、美西螈具有很强的再生能力。研究表明,美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制,科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14 的单克隆抗体,具体方法如下。抗CD14 单克隆抗体的制备流程如图2所示。回答下列问题:
(5)步骤⑤向小鼠注射
(6)步骤②所用的SP2/0 细胞的生长特点是
(7)吸取③中的上清液到④的培养孔中,根据抗原—抗体杂交原理,需加入
(8)步骤⑥从
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【推荐2】多发性骨髓瘤(MM)是一种致死率很高的癌症。跨膜糖蛋白CD38在正常组织细胞中低水平表达,但MM肿瘤细胞膜上CD38含量很高。科研工作者针对CD38制备单克隆抗体开展系列研究。
(1)CD38有多个与抗体结合的位点。用CD38免疫小鼠,分离出_____________ ,用____________ 诱导其与骨髓瘤细胞融合,经过筛选、培养杂交瘤细胞,最终获得甲、乙两种单克隆抗体。
(2)选取MM肿瘤细胞为靶细胞,评估甲、乙两种抗体的免疫功能,结果如下表。
注:IC50是指靶细胞凋亡一半所需的抗体浓度
根据实验结果,科研人员选择抗体甲继续进行后续研究,原因是________________ 。
(3)抗体(图1)由两条重链(H)和两条轻链(L)组成,分为可变区(V区)和恒定区(C区)。V区中与抗原特异性结合的区域称为CDR区,其他区域(FR区)在同一物种不同抗体间相对保守。为解决鼠源性抗体易引发人体免疫排斥的问题,将C区序列人源化,获得人鼠嵌合抗体,但免疫效果不理想。研究者拟继续改造V区,希望获得鼠源区域占比更小的改型抗体。
①选取图2中引物____________ ,扩增出拟改造的目标序列。
②经基因测序后,分析出对应的氨基酸序列,进行合理的人源化替换,获得改型抗体。
请从下列序号中选择恰当的步骤并排序____________ 。
a.推测对应的核糖核苷酸序列 b.设计替换CDR区氨基酸
c.设计替换FR区氨基酸 d.合成新的基因或改造基因
e.直接改变氨基酸从而改造蛋白质 f.导入真核细胞
g.从细胞内获得抗体 h.从细胞培养液中分离抗体
③检测发现改型抗体的免疫功能反而比改造前还要低,尝试分析可能的原因____________ 。
(4)关于制备人源化单克隆抗体用于治疗多发性骨髓瘤,还需继续开展哪些研究?_________________
(1)CD38有多个与抗体结合的位点。用CD38免疫小鼠,分离出
(2)选取MM肿瘤细胞为靶细胞,评估甲、乙两种抗体的免疫功能,结果如下表。
抗体 | IC50值(ng/ml) |
甲 | 0.1661 |
乙 | 1.464 |
阳性抗体 | 0.1473 |
注:IC50是指靶细胞凋亡一半所需的抗体浓度
根据实验结果,科研人员选择抗体甲继续进行后续研究,原因是
(3)抗体(图1)由两条重链(H)和两条轻链(L)组成,分为可变区(V区)和恒定区(C区)。V区中与抗原特异性结合的区域称为CDR区,其他区域(FR区)在同一物种不同抗体间相对保守。为解决鼠源性抗体易引发人体免疫排斥的问题,将C区序列人源化,获得人鼠嵌合抗体,但免疫效果不理想。研究者拟继续改造V区,希望获得鼠源区域占比更小的改型抗体。
①选取图2中引物
②经基因测序后,分析出对应的氨基酸序列,进行合理的人源化替换,获得改型抗体。
请从下列序号中选择恰当的步骤并排序
a.推测对应的核糖核苷酸序列 b.设计替换CDR区氨基酸
c.设计替换FR区氨基酸 d.合成新的基因或改造基因
e.直接改变氨基酸从而改造蛋白质 f.导入真核细胞
g.从细胞内获得抗体 h.从细胞培养液中分离抗体
③检测发现改型抗体的免疫功能反而比改造前还要低,尝试分析可能的原因
(4)关于制备人源化单克隆抗体用于治疗多发性骨髓瘤,还需继续开展哪些研究?
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【推荐3】下图为细胞融合过程示意图,请据图回答:
(1)若A、B是植物细胞,则其融合形成的D细胞培养成植株,还要应用_____ 技术。
(2)若A、B是动物细胞,则一般取自胚胎或幼龄动物器官、组织,然后用_____ 处理一段时间,将组织分散成单个细胞。然后,用培养液将细胞制成细胞悬液。A、B到C的过程中,常用的不同于植物细胞工程的方法是用_____ 诱导细胞融合。
(3)若该过程用于制备单克隆抗体,A为小鼠_____ 细胞,在获得此细胞之前,应给小鼠注射相应的抗原。B为_____ 细胞。
(4)从A、B到C的过程中,可形成_____ 种类型的C细胞(仅考虑两个细胞间的融合)。若该过程用于制备单克隆抗体,应筛选出符合要求的D细胞,方法是用特定的_____ 培养基培养,筛选出的D细胞称为_____ 。
(1)若A、B是植物细胞,则其融合形成的D细胞培养成植株,还要应用
(2)若A、B是动物细胞,则一般取自胚胎或幼龄动物器官、组织,然后用
(3)若该过程用于制备单克隆抗体,A为小鼠
(4)从A、B到C的过程中,可形成
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【推荐1】近年来,我国死于狂犬病的人数有上升之势。狂犬病病毒的核酸是RNA,机体感染病毒后产生的特异性lgG抗体,能消除狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。
请根据上述材料,回答下列问题:
(1)狂犬病病毒的毒力可发生变异。从自然感染动物体内分离的病毒株称为野毒株,其致病力强。将野毒株在家兔脑内连续传50代后,变成固定毒株。固定毒株对人及动物致病力弱,不引起狂犬病。巴斯德首先利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病。制成减毒活疫苗需要用_______ (活/死)细胞培养。
(2)特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程的技术是___________ 、____________ 。
(3)下图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:
①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是________ 细胞,该细胞能够产 生___________ 。从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射特定的物质是___________ 。
②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的__________ 、聚乙二醇或电激等诱导。
③特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有______ 、_______ 、______ 等优点。
(4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有____ 、__ 、___ 、_____ 。
(5)单克隆抗体技术还有哪些用途?__________ 、__________ 。
请根据上述材料,回答下列问题:
(1)狂犬病病毒的毒力可发生变异。从自然感染动物体内分离的病毒株称为野毒株,其致病力强。将野毒株在家兔脑内连续传50代后,变成固定毒株。固定毒株对人及动物致病力弱,不引起狂犬病。巴斯德首先利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病。制成减毒活疫苗需要用
(2)特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程的技术是
(3)下图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:
①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是
②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的
③特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有
(4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有
(5)单克隆抗体技术还有哪些用途?
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【推荐2】P53 基因是正常细胞内重要的抑癌基因,研究表明 P53 基因突变可导致肝脏细胞癌变。科学家研究发现 P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用,请回答下列问题:
(1)切下新鲜的肝癌组织,在 37℃下用_____ 消化 30~40 分钟,用培养液制成_____ 在培养箱中培养,在培养基中加入一定量的抗生素,其目的是_______________________ 。
(2)若P53 基因两侧的一段核苷酸序列是已知的,则获取P53 基因的方法通常是_____ 。
(3)将 P53 基因经过一系列的处理并与脂质体混合,将混合物滴加至肝癌细胞上,轻轻混匀。最后筛选出含有 P53 基因的肝癌细胞。脂质体在这个操作中的作用是_____ 。
(4)为证明P53 基因对肝癌细胞有抑制作用,需将两种细胞接入多孔板中,并从次日开始检测每孔的细胞总数,绘制成如图所示的生长曲线。请分析两条曲线分别是哪种细胞,曲线 1 是_____ 细胞,曲线 2 是_____ 细胞。
(1)切下新鲜的肝癌组织,在 37℃下用
(2)若P53 基因两侧的一段核苷酸序列是已知的,则获取P53 基因的方法通常是
(3)将 P53 基因经过一系列的处理并与脂质体混合,将混合物滴加至肝癌细胞上,轻轻混匀。最后筛选出含有 P53 基因的肝癌细胞。脂质体在这个操作中的作用是
(4)为证明P53 基因对肝癌细胞有抑制作用,需将两种细胞接入多孔板中,并从次日开始检测每孔的细胞总数,绘制成如图所示的生长曲线。请分析两条曲线分别是哪种细胞,曲线 1 是
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【推荐3】在转基因体细胞核移植过程中,供体细胞对重构胚的正确重编程及以后的发育有着非常重要的影响。利用转hLF基因的山羊成纤维细胞进行核移植(过程如图所示),可以作为核移植奶山羊的生产。回答下列问题:
(1)转hLF基因的山羊成纤维细胞作为
(2)过程①表示
(3)获得的重构胚
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解题方法
【推荐1】下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图,有关叙述错误的是( )
A.过程①细胞培养液中通常需要添加血清等物质 |
B.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 |
C.过程③后,胚胎分割获得同卵双胎属于无性繁殖 |
D.过程④胚胎移植前,需对代孕牛进行选择和处理 |
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解题方法
【推荐2】随着生物科学技术的发展,动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是健康的黄牛,请据图分析并回答下列问题。________ (填数字)。应用1中为了大量获取细胞B,需对供体2注射_____ 。使用_______ 技术获得重组细胞,最终获得的良种小牛性别为____ 。(雌性或雄性)
(2)人工授精时,受精卵形成的场所是在______ 。在应用2、3、4中,若要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行__________ 处理。
(3)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题:对_____ 阶段的胚胎通过______ 技术获得二分胚①和②,操作时需要注意______ ,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。应用4中胚胎干细胞培养过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外,培养液通常还要加入________ 等天然成分。
(1)图中产生小牛的几个途径中,属于无性繁殖途径的有应用
(2)人工授精时,受精卵形成的场所是在
(3)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题:对
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【推荐3】胚胎工程技术包含的内容很丰富。下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是本地黄牛。
(1)图中应用1利用了_____ 技术,该技术的繁殖方式是__________ 。
(2)在应用2过程中为获取更多的卵细胞,通常需对供体1用_____ 激素处理;早期胚胎移植之前还需对受体小牛进行_____ 处理。
(3)通过应用3所获取的胚胎干细胞具有______ 的特点。
(4)在应用4获取二分胚的操作过程中需注意_________ 。胎移植前需进行性别鉴定,目前SRY-PCR法是性别鉴定最有效、最准确的方法。操作的基本程序是从被测的囊胚中取_____ 细胞,提取DNA,然后用位于Y染色体上的性别决定基因,(即SRY基因)的一段碱基序列作_____ ,用被测胚胎DNA作模板进行PCR扩增,出现_____ 反应(填“阳性”或“阴性”)的胚胎为雄性。
(5)通过各种技术获得的胚胎都必须移植给受体才能获得后代,胚胎移植技术的优势在____ 。
(1)图中应用1利用了
(2)在应用2过程中为获取更多的卵细胞,通常需对供体1用
(3)通过应用3所获取的胚胎干细胞具有
(4)在应用4获取二分胚的操作过程中需注意
(5)通过各种技术获得的胚胎都必须移植给受体才能获得后代,胚胎移植技术的优势在
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