同尾酶是指一组识别序列不同,但切出的黏性末端相同的限制酶。下图为EcoRI、Bam-HI、Bgl I和MboI四种限制酶的识别序列及酶切位点。下列说法正确的是( )
A.BamHI、BgⅡ、MboI属于同尾酶,他们的识别序列相同 |
B.使用同尾酶构建基因表达载体时,切割位点的选择范围扩大 |
C.选用两种不同的限制酶切割目的基因,都可以防止目的基因自身环化 |
D.用DNA连接酶将BamHI和MboI形成的黏性末端连接后,可被二者重新切开 |
更新时间:2024-05-01 09:29:45
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【知识点】 DNA重组技术的基本工具解读
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【推荐1】大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后,拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上,静置一段时间,质粒分布在上清液中。利用上述原理可初步获得质粒DNA,分别用限制酶1和限制酶2对提取的质粒DNA完全切割后进行扩增产物的琼脂糖凝胶电泳,结果如图所示(注:KB表示千碱基对数,M代表标准对照)。下列说法正确的是( )
A.在提取白色丝状物时双向搅拌比单向搅拌更有利于获得结构完整的DNA |
B.将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后,加入二苯胺试剂即可呈现蓝色 |
C.若同时用限制酶1和限制酶2切割该DNA,电泳结果至少呈现2个条带 |
D.用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒,被染色的质粒不需要通过紫光灯照射就能看到结果 |
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名校
【推荐2】图1为某种质粒简图,图2表示某外源DNA上的目的基因,小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是( )
A.使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理图1质粒,所得的产物中含有2个游离的磷酸基团 |
B.如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后,再用DNA连接酶连接,形成的重组DNA中具有2个EcoRⅠ酶的切点 |
C.为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理 |
D.使用EcoRⅠ处理外源DNA分子时需消耗4分子H2O |
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名校
【推荐3】通过引物设计,运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变,如图为基因工程中获取突变基因的过程,其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对,但不影响引物与模板链的整体配对,反应体系中引物1和引物2分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。有关叙述正确的是( )
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/23/2985653860548608/2986962136195072/STEM/e8cc4175-f930-4cf6-80b8-e695b34cfcbf.png?resizew=274)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2022/5/23/2985653860548608/2986962136195072/STEM/e8cc4175-f930-4cf6-80b8-e695b34cfcbf.png?resizew=274)
A.限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在引物1和引物2的3’端 |
B.PCR反应体系中需要加入脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶、Ca2+等 |
C.第2轮PCR中,引物1与图中②结合并形成两条链等长的突变基因 |
D.在第3轮PCR结束后,含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4 |
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