【推荐1】埃博拉出血热是由埃博拉病毒引起的一种烈性传染病，死亡率在50％至90％之间。致死原因主要为中风、心肌梗塞、低血容量休克或多发性器官衰竭。下图是制备埃博拉病毒(EBOV)VP40蛋白的过程。请据图回答：

(1)埃博拉病毒是单链RNA病毒，可利用_____________法得到含(EBOV)VP40基因的DNA。过程①利用PCR技术扩增该DNA片段的前提是，要有一段_____________以便合成引物，该技术用到的酶是_________。
(2)过程②需要用到的工具酶是___________，一个完整的基因表达载体必须要有标记基因，标记基因的作用是__________。
(3)科学家制备(EBOV)VP40蛋白的目的是利用此蛋白进一步获取_________用于治疗埃博拉出血热。
(4)过程③中，选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有_____________(答出3点即可)。

【推荐2】如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答．

（1）过程②必需的酶是_____酶．
（2）从A到大量的A可以应用_____技术完成，此过程必需的酶是_____酶
（3）在利用AB获得C的过程中，必须用_____切割A和B，使它们产生_____，再加入_____，才可形成C．
（4）为使过程⑧更易进行，可用_____（药剂）处理D．
（5）人胰岛素基因能在微生物体内表达，说明：_____．

【推荐3】人体血清白蛋白在肝脏细胞中合成，是血浆中含量最丰富的蛋白质，在临床上有着广泛的用途。如图为利用动物乳腺生物反应器和工程菌生产人血清白蛋白的操作流程。回答下列问题：

(1)在基因工程中，原核生物细胞作为受体细胞，具有其他生物不具有的_____等特点。过程①需要的酶有_____。
(2)进行④操作之前，需要对早期胚胎进行鉴定来确定_____，取囊胚滋养层细胞，利用SRY基因（位于Y染色体上）探针进行探测，将检测反应呈_____（填“阳”或“阴”）性的胚胎进行移植。图中涉及的胚胎工程技术有_____（写出两个即可）。
(3)利用图示过程生产人血清白蛋白时，常用逆转录法获取目的基因，请写出用此法获取人血清白蛋白基因的操作流程：_____。
(4)简要写出检测人血清白蛋白基因在大肠杆菌和转基因绵羊中是否正常表达的实验思路：_____。

【推荐1】某患有严重自身免疫性疾病的患者正在接受来自自身的转基因细胞的治疗。科研人员分离出患者的T细胞，利用基因工程技术为T细胞装上能够特异性识别目标细胞表面的特殊蛋白质的嵌合抗原受体（CAR），这种细胞被称为CAR-T细胞。CAR-T细胞疗法的过程如图所示，请回答下列相关问题：
   
(1)CAR-T细胞疗法治疗特定种类的自身免疫病时临床效果比较好，原因是_______。
(2)可通过PCR技术扩增CAR基因的数量，PCR的产物一般通过_____电泳来鉴定；在凝胶中DNA分子的迁移速率与______（答出两点）等有关。
(3)CAR-T细胞疗法的本质属于_____（填“体内”或“体外”）基因治疗，该方法的优势在于______（答出两点）。
(4)在体外培养CAR-T细胞时，需要给其提供营养物质，由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在培养基中还需要加入_____等一些天然成分。培养过程中定期更换培养液，目的是_______。

【推荐2】现代生物科技不断发展，在治疗人类疾病方面发挥着越来越重要的作用。请回答下列相关问题：
(1)囊性纤维化病是一种遗传病，科学家们设计出基因治疗方法，利用经过修饰的腺病毒作为______，将治疗囊性纤维化病的正常基因转入患者的肺组织中，这种直接向人体组织细胞中转移基因的治疗方法叫做________。
(2)胰岛素是治疗糖尿病的有效药，天然胰岛素注射后会堆积在皮下，需较长时间才能进入血液，科学家利用________技术对胰岛素进行改造使其成为速效药，提高了胰岛素的治疗效果。
(3)单克隆抗体的出现能有效解决传统抗体产量低、特异性差的问题。在其制备过程中，需要进行两次筛选，第一次筛选的目的是筛选出________________；如果将抗癌细胞的单克隆抗体与化学药物结合制成“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的________作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。
(4)ES细胞的形态特征有____________________________，功能上，具有____________。ES细胞可以治疗人类由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾病，如帕金森综合征，利用ES细胞可以被________形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化部位得以修复。

【推荐3】在胚胎工程中，对牛、羊等哺乳动物移植前的胚胎进行性别鉴定，然后植入受体，可以控制后代的性别，但这种控制是在精子和卵子受精后，胚胎本身已经有了性别的前提下进行的，这种方法耗时长，对胚胎损伤大。SRY基因是Y染色体上的性别决定基因，SRY—PCR胚胎性别鉴定技术能准确鉴定早期胚胎性别，应用前景十分广阔。请回答与SRY—PCR法鉴定胚胎性别相关的问题：
（1）用SRY—PCR法鉴定胚胎性别需要充足的材料并保证被测胚胎的活性，因此，首先从被测胚胎中取出几个细胞，提取_______________，然后用___________________的一段脱氧核苷酸序列作引物，进行PCR扩增。
（2）进行PCR扩增时，需用____________________________为模板，以___________________为原料，反应体系中还应加入适量的__________________酶。
（3）鉴定扩增产物，首先制备具有 __________基因特异性的探针，探针需用__________等作标记，出现阳性反应者，胚胎为_____性。

【推荐1】研究发现，帕金森等人类神经退行性疾病与R环结构有关。R环（转录形成的mRNA分子难与模板链分离，而形成的RNA—DNA杂交体，由一条mRNA与DNA杂合链及一条DNA单链所组成。

(1)mRNA与模板链通过___________连接。
(2)mRNA形成需要___________酶催化，依据___________原则mRNA能准确获取其模板链所携带的遗传信息。
(3)据题意推测R环区域模板DNA单链中___________碱基比例比较高（填A、T或G、C），因此我们可以依据密码子的简并性，通过基因定点编辑技术（在精确的位点剪断靶标DNA片段并插入新的基因片段），降低R环形成的概率，基因定点编辑过程中有_______键的断裂和重新形成。
(4)R环中，嘌呤碱基总数与啶碱基总数一定相等吗？________（填“一定”或“不一定”），请说明理由：___________________。

【推荐2】2020年两位女科学家埃玛纽埃尔·卡彭蒂娜和詹妮弗·杜德娜因发现“CRISPR / Cas9基因剪刀”而获得2020年诺贝尔化学奖。CRISPR/Cas9 系统可对基因组进行定点编辑，其工作原理如图1所示。该系统主要包含单链向导RNA和Cas9蛋白两个部分，能特异性识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白到相应位置并剪切DNA，最终实现对靶基因序列的编辑。请回答下列问题：

（1）图1为CRISPR/Cas9系统作用示意图，该系统能精准识别相关基因的原理是sgRNA与目标DNA发生______，Cas9蛋白可催化_____(化学键名称)水解，剪切特定DNA片段。
（2）LMNA基因编码的核纤层蛋白与维持细胞核正常形态有关。科研人员利用CRISPR/Cas9技术对体外培养的HepG2 (人源肺癌细胞)细胞株进行基因编辑，获得了LMNA基因敲除的稳定细胞系。
①HepG2细胞中没有编码Cas9的基因，需将Cas9基因及sgRNA基因拼接形成拼接基因并与质粒结合导入HepG2细胞，sgRNA的合成需要______催化。

②用下图2中的质粒以及含Cas9-sgRNA拼接基因的DNA片段构建表达载体时，应选用_______进行酶切。将构建好的表达载体与用______处理的细菌置于适宜反应体系中培养。然后将培养的细菌涂布于含______的平板培养基上，37℃培养，24h 后挑取菌落，提取质粒作为模板，选择图3中引物组合________和______，通过PCR和电泳技术鉴定是否重组成功。

③用鉴定成功的工程菌对HepG2细胞进行转染，培养三天后收集HepG2细胞，提取基因组，对其______序列进行检测，判断Cas9-sgRNA拼接基因是否导入成功。若从细胞水平进行检测，可以检测HepG2细胞数目增长量或______。
（3）华人科学家张锋是首个将CRISPR基因编辑技术应用于哺乳动物和人类细胞的科学家，为此项技术广泛应用于生命科学和医学领域做出了不可磨灭的贡献。但是更多的学者提出了CRISRP/Cas9基因编辑技术有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”，实验发现sgRNA的序列长短影响成功率，越短脱靶率越______，脱靶最可能的原因是______。

【推荐3】CRISPR/Cas 系统是细菌在进化中形成的一种防御机制。Cas 蛋白能截取噬菌体的 DNA 片段，并将其插入到细菌自身的 CRISPR 基因中，整合有噬菌体 DNA 片段的 CRISPR 基因经转录产生 RNA，此RNA与Cas 蛋白共同构成 CRISPR/Cas 复合物，在此 RNA 引导下，该复合物能定点切割对应的噬菌体 DNA片段。科学家通过改造此系统，产生了 CRISPR/Cas9 基因编辑技术，可以实现对DNA的定点切割，其工作原理如下图所示。2019年上海科研团队通过基因编辑技术切除猕猴受精卵中的生物节律核心基因 BMAL1，再利用体细胞克隆技术，获得了5只BMAL1基因敲除的克隆猴。这是国际上首次成功构建出的一批遗传背景一致的生物节律紊乱的猕猴模型。请回答下列问题：

(1)CRISPR/Cas 系统中的 Cas 蛋白合成的场所是_________，该系统需要对特定的 DNA序列识别并切割，其功能类似于基因工程工具酶中的_________，作用的化学键为_________。推测该系统在细菌体内的生理意义是____________________。
(2)由于 Cas9 蛋白没有特异性，用 CRISPR/Cas9系统切割 BMAL1基因，向导RNA的识别序列应具有的特点是能与____________________通过碱基互补配对结合。
(3)在个体水平鉴定 BMAL1 基因敲除成功的方法是观察猕猴是否表现为_____________。
(4)该团队利用一只 BMAL1 缺失的成年猕猴体细胞克隆出 5 只后代的实验中，涉及的生物技术有____________________(答出两项即可）。
(5)基因编辑后通过体细胞克隆得到的数只 BMAL1缺失猕猴(A组)，与仅通过基因编辑多个受精卵得到的数只BMAL1缺失猕猴(B 组)比较，________(填“A组”或“B组”)更适合做人类疾病研究模型动物，理由是_______________________。